我院14 287例孕婦的不規則抗體結果分析和臨床意義

張京+盧新+劉曉紅+宜小如

[摘要] 目的 分析孕婦不規則抗體陽性結果，了解不規則抗體的臨床意義。 方法 采用戴安娜微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡，對2015年10月～2016年9月于北京市海淀區婦幼保健院建卡就診的14 287例孕婦血清中不規則抗體進行檢測，對陽性結果者進一步鑒定其特性。 結果 14 287例孕婦中檢出不規則抗體陽性63例，21例為RH陰性孕婦，在產前注射過免疫球蛋白，實際不規則抗體陽性孕婦42例，陽性率為0.294%，14 287例孕婦中9246例為多次妊娠的孕婦。不規則抗體的類型有抗D 2例，抗E 8例，抗C 7例，抗CD 1例，抗Ce 6例，抗cE 6例，抗M 4例，抗S 1例，抗Fyb 4例；抗Lea 3例。 結論 圍生期孕婦產前不規則抗體篩檢具有臨床應用價值，應將其列入產前血清學檢查常規項目。

[關鍵詞] 不規則抗體；圍生期；免疫球蛋白；臨床意義

[中圖分類號] R714 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）03（b）-0096-03

Result analysis and clinical significance of irregular antibody about 14 287 pregnancies

ZHANG Jing LU Xin LIU Xiaohong YI Xiaoru

Department of Clinical Laboratory， Maternal and Child Health Care Hospital of Haidian District， Beijing 100081， China

[Abstract] Objective To analyze positive results of irregular antibody about pregnancy， and to understand clinical significance of irregular antibody. Methods Diana micro column gel anti globulin test card was used in irregular antibody. Irregular antibodies of 14 287 pregnancies from October 2015 to September 2016 were detected in Maternal and Child Health Care Hospital of Haidian District， Beijing. Positive result characteristic was further identified. Results There were 63 positive irregular antibody cases in 14 287 pregnancies. 21 cases were RH negative pregnancies， who had injected immunoglobulin before delivery. Irregular antibody positive cases were 42 actually. Positive rate was 0.294%， there were 9246 cases of multiple pregnant women in 14 287 cases. The types of irregular antibody were anti D 2， anti E 8， anti C 7， anti CD 1， anti Ce 6， anti cE 6， anti M 4， anti S 1， anti Fyb 4， anti Lea 3. Conclusion Screening prenatal irrgular antibody has clinical application value， it should be included in the routine prenatal serological examination project.

[Key words] Irregular antibody； Perinatal period； Immunoglobulin； Clinical significance

人類血型不規則抗體是指除外ABO血型系統以外的所有抗體[1]，檢測不規則抗體有著非常重要的臨床意義。如果不做不規則抗體篩查，輸注含有某抗體相應抗原的血液，會引起溶血性輸血反應。孕婦進行血型不規則抗體篩查，還可以盡早發現不規則抗體，在孕期進行新生兒溶血病的有效預防和治療，減少不規則抗體對胎兒或新生兒帶來的傷害，降低新生兒溶血病的發病率[2]。2016年國家的二孩政策全面放開，第二胎的高齡經產婦明顯增加，產后出血率顯著高于初產婦。在北京市海淀區婦幼保健院（以下簡稱“我院”）孕婦不規則抗體篩檢是產前必須檢查的項目，為臨床輸血工作提供了極大幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2015年10月～2016年9月于我院就診的孕婦14 287例，年齡18～45歲，9246例為多次妊娠的孕婦，平均孕齡38+2周。

1.2 方法

用真空采血EDTA抗凝管抽取孕婦血液2 mL，分離孕婦血漿。不規則抗體篩查應用戴安娜微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡，每個標本對應3個孔，做好標記，分別加入50 μL戴安娜Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號抗篩細胞，每孔再分別加入患者的血漿25 μL。37℃孵育15 min，使用戴安娜專用離心機，轉速1500 r/min，離心9 min。若紅細胞均沉入管底則為陰性，若浮于管頂或分散在凝膠中則為陽性。初篩陽性結果全部送檢北京市紅十字血液中心。

2 結果

14 287例孕婦中，9246例為多次妊娠的孕婦，占64.7%。檢出不規則抗體陽性63例，21例為RH陰性孕婦經產前注射免疫球蛋白后的檢測陽性，實際陽性人數42例，占0.294%，63例不規則抗體陽性孕婦中第一次妊娠的為26例，占41.2%。42例陽性的不規則抗體中Rh系統共30例：其中抗D 2例，抗E 8例，抗C 7例，抗CD 1例，抗Ce 6例，抗cE 6例；MNS系統共5例：抗M 4例，抗S 1例；Duffy系統4例：抗Fyb 4例；Lewis系統3例：抗Lea 3例。

3 討論

在產科搶救中，輸血治療是現今不可替代的重要治療手段，而血庫的首要任務就是保證輸血的安全，為臨床提供安全有效的血液制品[3]。

近年來，輸血技術飛速發展，由于輸注ABO同型的成分血是常規的輸血治療方法，所以由ABO血型不合引起的溶血反應已比較少見。引起溶血性輸血反應的主要原因是不規則抗體，在劉達莊等[4]臨床調查中，免疫性輸血反應中檢測的抗體，紅細胞的不規則抗體占抗體種類約20%。對進行血型不規則抗體篩查，可以利用充分的時間選擇合適的血液，選擇不含有針對某抗體的相應抗原的血液，這樣可以防止因為輸注含有某抗體相應抗原的血液后，引起的溶血性輸血反應，從而保證輸血的安全。例如患者體內檢出抗E，就應該選擇RhE抗原陰性的血液進行輸注。

不規則抗體產生的原因很多，絕大多數是通過輸血或妊娠免疫產生的[5]，這類抗體多為IgG類抗體，可通過胎盤進入胎兒體內引起胎兒或新生兒溶血病。我院在孕婦進行常規產科檢查時就進行血型不規則抗體篩查，可以盡早發現不規則抗體，在孕期進行新生兒溶血病的有效預防和治療，減少不規則抗體對胎兒或新生兒帶來的傷害，降低新生兒溶血病的發病率。

不規則抗體在一般人群中檢出率為0.3%～2.0%[6]。它的陽性率高低與多種因素有關，我院是專科醫院，病種單一，基本只做孕婦的不規則抗體篩查，大多是健康人，也是導致不規則抗體陽性率低的原因。雖然不規則抗體檢出率低，但是陽性患者如果輸入具有相應抗原的紅細胞，當抗原抗體發生免疫結合，就可引起溶血性輸血反應，反應嚴重時能夠危及生命。所以，檢測有重要的臨床意義。

2016年1月1日正式實施了計劃生育二孩新政策，也就是，2016年元旦以后出生的二孩，都是合法的。在我院2015年10月～2016年9月中14 287例孕婦中就有9246例是多次妊娠的。多次妊娠同種免疫產生不規則抗體的頻率要明顯高于首次妊娠[7]，這也造成臨床不規則抗體的種類日趨復雜和多樣化，對實驗室的檢測技術要求更高。最早檢測不規則抗體篩查使用的手工抗人球的方法，操作復雜，檢出率低。前幾年改進了試驗方法使用國產的抗篩細胞和凝膠卡，靈敏度大大提高，但陽性率偏低。2015年開始使用了Diana公司的抗篩細胞和抗篩卡，大大地提高了檢出率。目前，凝膠凝集卡的方法因為用量少，操作方便，已經廣泛應用于臨床不規則抗體篩查的檢驗中[8]。

在2015年10月～2016年9月檢測出的不規則抗體的結果，63例不規則抗體有30例為RH系統抗體，占71.4%。RH系統抗體是引起免疫性溶血性輸血反應最常見的不規則抗體[9-10]。在我國人群中D抗原陰性占0.2%～0.5%，因為抗D抗體引起的溶血反應在臨床上非常兇險而難以控制，所以現在已經普遍推廣和熟練應用RhD血型配合性輸血，也使抗D抗體產生明顯減少。孕婦的RhD同種免疫反應往往發生于第二胎及以后。RhD抗原陰性和RhD抗原陽性的丈夫在生育第一胎時，RhD抗原陽性的胎兒紅細胞經胎盤進入RhD抗原陰性母親的血液，母體得到初次免疫刺激，當她再次妊娠時，曾經進入母體的胎兒紅細胞上存在的RhD抗原會刺激母體免疫系統的回憶反應，產生抗D抗體。這些抗體有可能會通過胎盤進入到胎兒的血液循環，與胎兒紅細胞發生抗原抗體反應，導致胎兒紅細胞凝集和受到破壞，發生胎兒或新生兒的免疫性溶血。RhD抗原陰性出現這類Rh同種免疫，在妊娠的早期可能會出現流產，妊娠中晚期可能出現早產，分娩時有可能因為胎盤過大而引起產后出血。少數病例新生兒出生后出現智力發育不全等后遺癥，甚至死亡[11]。由于Rh系統多種抗原中，D抗原的抗原性最強，并且常在孕22周后使胎兒的器官受累，所以引起死胎和新生兒溶血病也最多[12]。注射抗D免疫球蛋白是一種有效的方法，可以避免發生同種免疫，產生抗D抗體，使Rh同種免疫的發生率下降為0.1%。本文中一年有21例RH陰性經過了抗免疫球蛋白的注射，說明RH陰性血型的群體，已經有較強風險意識，提前進行免疫的注射，勢必會減少抗D抗體的產生，降低新生兒溶血的發生率。現在國內，仍然沒有在正規醫療機構開展抗免疫球蛋白的注射[13]。RhE是RH系統中除RhD抗原外抗原性最強的抗原（D>E>c>C>e），RhE抗原陰性者約占50%，但RhE還不是醫院檢驗科常規檢測的項目，所以如果夫妻雙方E抗原不和，女方可能會產生抗E抗體，同時有些RhE陰性患者因為輸血，接受了RhE抗原陽性血液的刺激后產生抗E抗體病，以上的情況越來越多。據報道，我國漢族人Rh抗原中存在RhE抗原陽性（47.88%）比RhD抗原陽性（99.66%）低的分布特點。所以相對RhE抗原不合的免疫在臨床出現的概率比RhD抗原高，也就是產生抗E比抗D的概率大[14]，因此Rh血型中RhE抗原陽性的患者輸血應引起重視[15]。另外，向東等[16]報道，抗D引起的新生兒溶血病平均發現時間是9.1 d，抗E引起的平均發現時間是16.6 d，由此可以反映出產前診斷存在的問題，如果能夠早期地從實驗數據中預測和早期治療，新生兒溶血的診斷和治療應該有更好的效果。還有報道稱，現有的產前檢測，還沒有對Rh系統中除外RhD抗原的其他抗原進行具體的檢測，這就很容易造成同種免疫，給臨床輸血的工作帶來一定的危險。因此，非常有必要進行RH系統中常見抗原的檢測，這樣可以減少因反復輸血引起的同種免疫反應[17]。本次檢測還發現患者體內同時存在兩種不規則抗體，抗c在西方國家是臨床上僅次于抗D的Rh抗體[18]，而我國以抗Ec聯合抗體較為多見，這可能與亞洲人血型系統的抗原分布情況有關[19]，這種聯合不規則抗體的情況共13例，占30.95%，這類患者如果不進行抗體鑒定而直接交叉配血，難度將會比較大，需要在獻血員標本中盲篩，勢必耗費臨床寶貴的救治時間，例如對于抗Ce的患者遇到匹配的ccDEE表型紅細胞的概率為1.2%，如果用盲配的辦法進行交叉配血，要耗費大量的患者血清和獻血員血液。

在全年的數據分析中，檢出抗M抗體共4例，占9.5%。MNSs系統的抗體是以抗M最為常見的，其次是抗N抗體，在目前的研究數據顯示，這兩類抗體大多為自然發生，一般在體內不能引起溶血性反應，只有在37℃或抗球蛋白試驗出現陽性時才具有臨床意義。如果患者在手術過程中，出現低溫麻醉狀態，這一類抗體可能激活補體，發生溶血反應，應該引起醫生和輸血人員的注意。在MNS系統中抗S抗體是同種免疫產生的抗體，能夠引起溶血性輸血反應和新生兒溶血等嚴重后果。以前沒有抗人球蛋白、微柱凝膠卡的應用，檢出率低，現在抗人球蛋白、微柱凝膠卡的應用廣泛，大大提高了MNSs系統抗體的檢出率，這些抗體的臨床意義也越來越受到重視。近期有一篇報道不規則抗體檢出率占據第一位的就是抗M抗體[20]。Duffy血型系統的抗Fyb抗體是少見抗體，大多因妊娠和輸血免疫而產生。抗Fyb抗體通常是IgG抗體，在抗球蛋白試驗中反應良好。一般蛋白酶均會破壞Fy抗原性，故用酶法檢測抗Fyb抗體無反應。有報道稱，抗Fyb抗體可以造成致命性的溶血性輸血反應和遲發性輸血反應[21]。在檢驗報告里，抗Le抗體越來越多，以往都認為抗Le抗體是自然發生的，以IgM抗體為主，多數在37℃沒有活性，很少能夠引起新生兒溶血病和溶血性輸血反應。抗Lea和抗Leb抗體都非常少見，但近年國外和國內都有抗Leb抗體引起溶血性輸血反應和新生兒溶血病的報道[22]。

總之，由于血型抗原的多元化，不規則抗體產生的復雜性，以及同種免疫的溶血性輸血反應嚴重危害性，我們對孕婦，特別是有多次妊娠史的孕婦，進行不規則抗體檢測能夠有效預防輸血不良反應的發生，圍產期孕婦產前不規則抗體篩檢具有重要的臨床應用價值。

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