湖羊羊痘疫苗免疫抗體消長規律分析

吳 婷，劉躍生，徐雅萍，邱寒峰，俞乾挺，翟漢平，嚴 羽

(1.桐鄉市動物疫病預防控制中心，浙江 桐鄉 314500； 2.嘉興職業技術學院，浙江 嘉興 314036；3.桐鄉市畜牧獸醫局，浙江 桐鄉 314500)

湖羊羊痘疫苗免疫抗體消長規律分析

吳 婷1，劉躍生2，徐雅萍1，邱寒峰3，俞乾挺3，翟漢平3，嚴 羽1

(1.桐鄉市動物疫病預防控制中心，浙江 桐鄉 314500； 2.嘉興職業技術學院，浙江 嘉興 314036；3.桐鄉市畜牧獸醫局，浙江 桐鄉 314500)

采用間接ELISA方法開展湖羊羊痘疫苗免疫效果監測，研究羊痘疫苗免疫后其抗體的消長規律。結果表明：湖羊在羊痘疫苗免疫后的第7、14、28、61、210 天，羊痘病毒抗體水平合格率分別達到94.3%、97.1%、99.1%、85.7%、79.1%。羊痘疫苗注射后30 d內抗體陽性率整體呈平穩上升趨勢， 30～60 d緩慢下降，但依然保持較高水平；60～210 d 抗體陽性率平穩持續下降，但抗體水平合格率仍保持在70%以上，達到國家規定的免疫合格標準。本研究為湖羊場制定合理的羊痘免疫程序提供了實驗依據。

桐鄉湖羊； 羊痘； 免疫； 抗體消長規律

羊痘是一種急性、熱性、接觸性傳染病，是由羊痘病毒感染所致，主要特征是在病羊皮膚和粘膜上形成特殊的痘疹。羊痘不僅具有很高的發病率和死亡率，常引起孕羊流產，而且致使多數病羊喪失生產力，對養羊業造成嚴重的經濟損失[1]。羊痘傳播速度快，可發生于全年任何季節，但以春秋兩季多發，主要在冬末春初流行，常呈地方性流行或大流行[2]。羊痘屬于我國一類動物疫病，一旦發病應采取嚴格控制撲滅措施，疫病的預防應采取加強飼養管理和疫苗免疫為主的綜合性防控措施，盡量避免該病的發生[3]。桐鄉是湖羊養殖大市，2015年全年養殖量約21.25萬只。因此，切實做好湖羊羊痘防控工作，對于本地區湖羊養殖業持續健康發展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物

在桐鄉市某規模湖羊養殖場選取170～200日齡、體重30～35 kg，未經羊痘疫苗免疫且無臨床疾病癥狀的健康湖羊作為試驗動物。

1.1.2 疫苗來源

羊痘疫苗為遼寧益康生物股份有限公司生產的山羊痘活疫苗，批號：201601，免疫有效期為12個月。

1.1.3 試劑

羊痘間接ELISA抗體檢測試劑盒，批號：20160412119，購自中國農業科學院蘭州獸醫研究所。

1.1.4 儀器

Eppendorf單、雙道可調移液器；中科PHW-165Q恒溫培養箱；美國伯樂MODEL680酶標儀。

1.2 方法

1.2.1 試驗地點

桐鄉市某規模湖羊養殖場，總存欄量為1 200 只，在3棟、5棟隨機選取未經羊痘疫苗免疫且在相同環境下飼養的105 只健康湖羊。

1.2.2 免疫方法

山羊痘活疫苗按說明書要求，用生理鹽水稀釋為每頭份0.5 mL；采用尾根內側皮內注射的方法，免疫劑量為0.5 mL·只-1。注射時應當注意消毒，嚴格遵守操作規范。

1.2.3 臨床觀察及血樣采集

在注射山羊痘活疫苗前后各1 周內，觀察實驗羊的臨床癥狀，如體溫、呼吸、采食、精神等方面均無不良反應。分別在免疫后的第7天、第14天、第28天、第61天、第210天經頸靜脈采血，分離血清。其中，3棟采樣70 份，5棟采樣35 份。

1.2.4 實驗室檢測

采用間接ELISA檢測羊痘病毒抗體，按試劑盒使用說明書操作。判定標準：D450≥0.25，抗體陽性；D450≤0.2，抗體陰性；0.25>D450>0.20，判為陽性可疑，重復檢測一次，若D450≥0.23判定為陽性，D450<0.23則判為陰性。

2 結果與分析

湖羊羊痘疫苗免疫后抗體檢測結果見表1。試驗湖羊在羊痘疫苗注射后第7天已經產生較高水平的抗體，抗體合格率達到94.3%；第14天、第28天抗體水平合格率分別為97.1%和99.1%，說明抗體水平整體呈平穩向上態勢，并在第28天左右達到峰值；第61天抗體水平合格率為85.7%，抗體水平有所下降；第210天抗體水平合格率為79.1%，抗體效價水平明顯下降，但總體維持在國家規定的免疫合格率70%標準以上。

表1 免疫后不同時間羊痘抗體水平的變化

從表1中還可以看出，在免疫后第7天均產生了較高水平的抗體，在免疫后第14至28天抗體陽性率平穩上升，且在第28天左右達到最高水平。在第30至60天抗體陽性率略有下降，但依然保持較高的水平。第61～10天，抗體陽性率繼續平穩下降，但抗體水平合格率仍保持在70%以上。

3 討論

通過對湖羊免疫羊痘疫苗后不同階段抗體水平及消長規律的實驗研究，為改進桐鄉地區以往羊痘免疫工作中存在的不足，提供了科學依據。

羊痘是嚴重危害養羊業生產的重大動物傳染病[4]。在湖羊飼養過程中，定期接種疫苗，建立合理的免疫程序至關重要。根據農業部動物疫病免疫監測要求，加強對羊群羊痘的普查、抗體水平的監測，及時分析疫苗免疫后抗體的消長規律，明確免疫間隔時間。一般安排在春季或秋季集中免疫，避免過度免疫或免疫不足，造成不必要的損失，以達到較好的免疫效果。

本試驗在桐鄉市某規模湖羊養殖場，通過持續抽樣監測湖羊群免疫羊痘弱毒活疫苗后血清抗體的消長動態，表明羊痘疫苗抗體消長呈現規律性，免疫后第7天左右產生抗體，第14天左右逐步上升，到第28天左右達到高峰水平，群體免疫合格率可保持到210 d，這與該疫苗在山羊群的免疫抗體消長規律基本一致[5-6]。

羊痘疫苗的免疫應嚴格遵守疫苗接種操作要求，如羊痘疫苗一般選擇在羊只股內側、尾根內側下方進行注射，每只皮下注射0.5 mL。大多數情況下，羊只接種后4～5天就能夠產生主動免疫力[1]。

通過對湖羊羊痘疫苗免疫后抗體消長規律的研究，為浙江省有效預防和控制羊痘的發生，制定合理的湖羊羊痘免疫程序提供了科學的實驗依據。

[1] 吳麗娟.羊痘病的病因、癥狀和防控措施[J].現代畜牧科技，2016(10)：143.

[2] 康文玉，徐自忠，高洪，等. 羊痘的研究進展[J].畜牧獸醫雜志，2005，24(3)：18-20.

[3] 吳永忠，胡南. 山羊痘的診治[J].中國動物保健，2016(10)：63-64.

[4] 顏新敏，吳國華，李健，等. 羊痘在中國的流行現狀分析[J].中國農學通報，2010，26(24)：6-9.

[5] 劉忠偉，周碧君，虞天德. 山羊痘免疫效果檢測[J].貴州農業科學，2007，35(5)：82-84.

[6] 趙利平，魏學峰，高換河，等.山羊痘滅活疫苗免疫持續期試驗[J].中國獸藥雜志，2007，41(3)：18-20.

(責任編輯：盧福莊)

2017-02-15

吳 婷(1981—)，女，浙江嘉興人，助理獸醫師，本科，從事動物疫病預防控制技術工作， E-mail：405697210@qq.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170449

S851.3

A

0528-9017(2017)04-0709-02

文獻著錄格式：吳婷，劉躍生，徐雅萍，等. 湖羊羊痘疫苗免疫抗體消長規律分析[J].浙江農業科學，2017，58(4)：709-710.