畢赤酵母高密度發酵產Ⅲ型類人膠原蛋白及其胃粘膜修復功能

李偉娜，尚子方，段志廣，李林波，賀婧，范代娣

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畢赤酵母高密度發酵產Ⅲ型類人膠原蛋白及其胃粘膜修復功能

李偉娜1,2，尚子方1,2，段志廣1,2，李林波1,2，賀婧1,2，范代娣1,2

1 西北大學化工學院陜西省可降解生物醫用材料重點實驗室，陜西西安 710069 2 西北大學化工學院陜西省生物材料與發酵工程技術研究中心，陜西西安 710069

為提高重組畢赤酵母發酵重組人Ⅲ型膠原蛋白產量，采用響應面對其生長階段的BMGY培養基(Buffered minimal glycerol-complex medium) 組成進行優化。通過Placket-Burman試驗，得出酵母提取物、蛋白胨、甘油對膠原蛋白產量有顯著影響，通過Box-Behnken中心組合實驗以及Design-Expert分析軟件建立了以膠原蛋白產量為響應值的響應方程，得到最適濃度分別為酵母提取物1.13%，蛋白胨1.61%，甘油0.86%。經實驗驗證，在最優BMGY培養基條件下培養12 h后，所得到畢赤酵母干重為4.41 g/L，生長階段的菌重量增加了26%。在22 L發酵罐中通過高密度發酵，產量達到4.71 g/L。該重組膠原蛋白對大鼠乙酸灼傷胃粘膜有明顯修復作用，為生物醫用材料的應用制備奠定了基礎。

畢赤酵母，重組人Ⅲ型膠原蛋，響應面優化法，胃粘膜

膠原蛋白是結締組織中最主要的結構蛋白，對維持細胞形態、維護生物組織和器官的正常生理功能和損傷修復都有著重要作用[1-2]。因良好的生物相容性、生物可吸收性和促新細胞形成等特征，廣泛應用于包括生物醫用材料、化妝品、食品工業、醫藥和印染等領域[3]。相比酸、堿水解法或酶解法從動物的皮和骨組織中提取并純化過程中易帶來病毒隱患、生物功效和臨床療效不穩定等問題，利用基因工程技術重組表達膠原蛋白成為研究熱點和研究方向[4-5]。……