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人骨髓間充質干細胞過表達白細胞介素-34對THP-1細胞的調節作用

2017-05-06 07:09:42高雪明張順許兆軍單艷王子鴻蔡挺江雪
生物工程學報 2017年4期

高雪明,張順,許兆軍,單艷,王子鴻,蔡挺,江雪

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人骨髓間充質干細胞過表達白細胞介素-34對THP-1細胞的調節作用

高雪明*,張順*,許兆軍,單艷,王子鴻,蔡挺,江雪

寧波市第二醫院,浙江寧波 315010

構建人IL-34真核表達載體并將其轉染到人骨髓間充質干細胞,觀察高表達IL-34的骨髓間充質干細胞對THP-1細胞的影響。PCR擴增IL-34 DNA,并將其克隆到真核表達載體pIRES2-EGFP;將構建成功的重組體轉染到骨髓間充質干細胞,Western blotting和ELISA分析IL-34在細胞中的表達;用高表達IL-34的骨髓間充質干細胞培養上清液來培養THP-1細胞,Real-time PCR分析THP-1細胞中IL-10和TNFα的表達變化。經雙酶切和測序鑒定,成功構建了pIRES2-EGFP-IL-34重組體;轉染至骨髓間充質干細胞的IL-34可以促進THP-1細胞表達IL-10和TNFα。結果表明,骨髓間充質干細胞表達分泌的IL-34對THP-1有調節作用。

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近十幾年來,研究發現間充質干細胞 (Mesenchymal stem cells,MSCs) 可以促進慢性創傷愈合,并且已經應用于臨床試驗,同時研究者發現MSCs也可以促進燒傷和放射損傷創面愈合[1-4]。MSCs作用于傷口,可以加速傷口愈合并促進肉芽組織和血管形成[5]。MSCs在促進傷口愈合過程中并不是通過分化并替代損傷的組織來修復創面,而是通過分泌可溶性細胞因子來調節多種細胞應答皮膚損傷。MSCs通過分泌細胞因子和生長因子促進血管再生、減少細胞死亡量并促進創面處疤痕形成[6]。MSCs也可以分泌免疫抑制因子來抑制免疫細胞增殖,如T細胞、B細胞和NK細胞。外源性MSCs能夠促進傷口愈合、肉芽組織形成和新血管形成;……

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