戊型肝炎病毒樣顆粒在重組漢遜酵母中的發酵表達、純化及其免疫原性分析

蘇彩霞，李邐，金貞姬，韓旭東，趙平，王琳，江春虎，王月麗，王文雯，徐德啟，朱乃碩

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戊型肝炎病毒樣顆粒在重組漢遜酵母中的發酵表達、純化及其免疫原性分析

蘇彩霞1,2，李邐1，金貞姬1，韓旭東1，趙平1，王琳3，江春虎1，王月麗1，王文雯1，徐德啟1，朱乃碩2

1 大連漢信生物制藥有限公司，遼寧大連 116600 2 復旦大學生命科學學院，上海 200433 3 大連市血液中心，遼寧大連 116001

為了研制戊型肝炎新型基因工程疫苗，利用漢遜酵母表達系統表達重組戊型肝炎病毒樣顆粒，成功構建了重組戊型肝炎疫苗工程菌株HP/HEV2.3，對該菌株的發酵條件和純化工藝進行了研究。先將工作種子批進行發酵培養，收集發酵后的細胞培養物；對其先后進行細胞破碎、澄清和超濾、硅膠吸附和解吸附、超濾濃縮換液、色譜純化及除菌過濾，制得重組漢遜酵母戊型肝炎病毒樣顆粒，純化收率為33%，純度達99%；電鏡觀察顯示該重組漢遜酵母戊型肝炎病毒樣顆粒與天然戊型肝炎病毒顆粒理論大小一致，為32 nm；基因序列與理論一致；SDS-PAGE分析結果表明其表達的外源蛋白質分子量與預期的目的蛋白質分子量大小一致，均為56 kDa，表達量占細胞總蛋白的26%，表達水平為1.0 g/L發酵液；Western blotting、ELISA活性檢測及小鼠免疫接種效力試驗50結果表明，此重組漢遜酵母戊型肝炎病毒樣顆粒具有良好的抗原性和免疫原性，可用于制造戊型肝炎新型基因工程疫苗。

戊型肝炎病毒，病毒樣顆粒，發酵，純化，免疫原性

戊型肝炎 (Hepatitis E，HE) 是一種急性地方性流行腸道疾病，主要由糞-口途徑傳播，戊型肝炎多為急性發病，較少發展為慢性肝炎[1]。……