10種生物和化學殺菌劑防治葡萄霜霉病的藥效評價

吉沐祥，吳琴燕，王建華，楊 勇，吳 祥，莊義慶

（江蘇丘陵地區鎮江農業科學業研究所，江蘇句容212400）

10種生物和化學殺菌劑防治葡萄霜霉病的藥效評價

吉沐祥，吳琴燕，王建華，楊 勇，吳 祥，莊義慶

（江蘇丘陵地區鎮江農業科學業研究所，江蘇句容212400）

篩選生物與化學新藥劑或新劑型用于科學防控葡萄霜霉病。采用室內孢子萌發法和田間預防及治療試驗，分別比較5種生物藥劑和5種化學藥劑對葡萄霜霉病菌孢子萌發的抑制作用及田間防治效果。5種生物藥劑對孢子的萌發表現出一定的抑制效果；田間預防試驗中，4%嘧啶核苷類抗菌素AS 1000倍液和3×108CFU/g哈茨木霉菌WP 200倍液施藥3次后防效均超過50%，但治療效果均低于50%；5種化學藥劑10%氟噻唑吡乙酮OD 3000倍液、80%烯酰嗎啉WDG 2000倍液、23.4%雙炔菌酰胺SC 1500倍液和250 g/L吡唑醚菌酯EC 2000倍液對孢子萌發有較好抑制作用，且在田間預防和治療試驗中均具有較好防效，但250 g/L嘧菌酯SC 2000倍液田間防效偏低。嘧啶核苷類抗菌素和哈茨木霉菌應在發病前用藥；除嘧菌酯外的4種化學新藥劑或新劑型對葡萄霜霉病均有較好的預防和治療效果，且氟噻唑吡乙酮持效期較長，具備推廣價值。

葡萄霜霉病；生物殺菌劑；化學殺菌劑；劑型；藥效評價

Key words:Grape Downy Mildew;Biological Fungicide;Chemical Fungicide;Formulation;Pharmacodynamic Evaluation

0 引言

由病原真菌[Plasmopara viticola(Berk.et Curtis) Berl.et de Toni]引起的葡萄霜霉病(grape downy mildew)是葡萄上的重要病害[1-2]，該病菌為專性寄生卵菌，在中國葡萄產區分布較廣，幾乎所有葡萄產區都有發生[3]，主要危害葉片，也能侵染嫩梢、花序、幼果等幼嫩組織[4]。近幾年來，隨著暖冬氣候條件、葡萄種植規模大、品種不斷增加、農田生態環境改變，葡萄霜霉病危害加重[5-6]。筆者調查，江蘇蘇南丘陵地區常年露天栽培葡萄霜霉病發病率高達90%以上，年減產30%以上，而且還影響翌年的產量。

目前生產上防治葡萄霜霉病主要依靠化學藥劑進行防治，主要有保護劑（波爾多液、代森錳鋅、氫氧化銅等）和內吸性殺菌劑及其混劑三大類。當前，多種化學藥劑的抗藥性風險不能忽視[7-9]，已報道葡萄霜霉病菌對甲霜靈、殺毒礬、乙磷鋁等藥劑產生了抗藥性[10-13]；有些藥劑或劑型落后，還具有副作用、藥害、污染等問題，特別是近幾年，化學農藥造成的食品安全事件、農藥殘留超標事件時有發生，已經不能適應現代葡萄產業的發展、不能保證葡萄生產的正常進行，篩選新型高效環保的殺菌劑并提供合理安全的用藥技術是葡萄生產中的迫切需求。

近幾年來，葡萄霜霉病的生物防治也是研究熱點之一，先后開發與篩選出一些對葡萄霜霉病的有效生物藥劑[14-15]，但在夏季多雨的江蘇等長江中下游地區，葡萄霜霉病常年發生嚴重，一些常用化學藥劑抗藥性嚴重或劑型落后，特別是生物藥劑應用研究還很少。本項研究選擇環境友好型的5種生物殺菌劑和5種化學殺菌劑新品種或新劑型，對夏季多雨的江蘇蘇南丘陵地區葡萄霜霉病進行了室內和田間藥劑防治試驗，評價其應用效果，為生產中科學安全合理防治葡萄霜霉病提供依據。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑及濃度

供試選擇10種殺菌劑，其中5種生物藥劑和濃度為：1.5%苦參·蛇床素AS1000倍液（山西德威生化有限責任公司），4%嘧啶核苷類抗菌素AS1000倍液（武漢科諾生物科技股份有限公司），0.3%丁子香酚SL500倍液（南通神雨綠色藥業有限公司），3×108CFU/g哈茨木霉菌WP200倍液（美國拜沃股份有限公司），0.5%蛇床子素AS500倍液（江蘇蘇科農化有限責任公司）；5種化學藥劑和濃度：80%烯酰嗎啉WDG2000倍液[興農藥業（中國）有限公司]，10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液（上海杜邦農化公司），23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液（瑞士先正達作物保護有限公司），250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液（巴斯夫歐洲公司），250 g/L嘧菌酯SC2000倍液（英國先正達有限公司）。另設清水對照。

1.2 供試品種及菌種

室內藥劑篩選試驗所用葡萄霜霉病菌采自鎮江市農科院葡萄試驗示范園的‘夏黑’品種的病葉，保濕后待產生大量孢子囊后供用。田間藥劑試驗地點在鎮江市農科院葡萄試驗示范園，葡萄品種為感病的‘夏黑’，露天籬架栽培，樹齡4年，株行距為400 cm×400 cm，且田間長勢與管理條件一致，常年霜霉病發病較重，分別進行藥劑田間發病前預防保護和發病后治療試驗。

1.3 方法

1.3.1 室內藥劑篩選試驗 采用孢子囊萌發法，于2016年6月25日在鎮江市農科院中心實驗室進行。即首先用滅菌水分別配制各藥劑到所需濃度，并各吸取100 μL到凹玻片上；然后將事先采集并保濕12 h的葡萄霜霉病葉背面上的新鮮孢子囊用濕毛筆尖刮下，與凹玻片中的藥液充分混合。之后將凹玻片放入盛有濕潤濾紙的培養皿中，以不加藥劑、加無菌水的孢子囊懸浮液為對照。在23℃的SPX型生化培養箱中培養，每個處理重復3次，24 h后鏡檢并統計不同處理中孢子囊的萌發情況，計算孢子囊萌發的抑制率，計算見公式(1)。

1.3.2 田間發病前預防和發病后治療試驗

（1）田間發病前預防試驗

藥劑種類和濃度同室內藥劑篩選試驗。供試藥劑均采取現用現配。江蘇露天栽培葡萄常年在6月上旬發病，因此試驗于發病前進行噴藥預防，分別于2016年5月19日、5月26日、6月2日，間隔7天，連續施藥3次，用電動噴霧器分別將10種藥劑均勻噴施到葡萄葉片的正反面，以藥液不下淌為止，每個藥劑處理噴1株葡萄樹，所有葉片都噴到，以不噴藥噴清水為對照，共11個處理。試驗采取順序排列，重復3次。3次藥后7天、14天調查，每株樹調查10個當年抽生新梢葉片，采用9級分級法[16-18]調查發病情況。最后用DPS軟件對防治效果進行分析。

9級分級標準（以葉片為單位）如下：

0級：無病斑；

1級：病斑面積占整個葉面積的5%以下；

3級：病斑面積占整個葉面積的6%～25%；

5級：病斑面積占整個葉面積的26%～50%；

7級：病斑面積占整個葉面積的51%～75%；

9級：病斑面積占整個葉面積的76%以上。

（2）田間發病后治療試驗

試驗前30天以上不用藥劑防治，待田間普遍發病顯癥后進行治療試驗。藥前采用上述9級分級法調查病情，并計算病情指數，作為施藥前的病情。2016年6月29日、7月5日、7月12日，間隔7天一次，噴藥防治3次，其藥劑種類、濃度、處理、排列、重復和調查方法均與發病前保護試驗相同，以噴施同量的清水為對照。3次藥后7、14天調查治療效果，最后用DPS軟件對防治效果進行分析。

2 結果與分析

2.1 室內藥劑篩選試驗

室內藥劑篩選試驗表明（見表1、圖1、圖2），供試10種生物與化學殺菌劑對葡萄霜霉病菌孢子囊的萌發都有抑制作用，但其間存在明顯的差異。5種生物藥劑對葡萄霜霉病孢子囊萌發抑制率70.26%～86.48%，5種化學藥劑對葡萄霜霉病孢子囊萌發抑制率82.43%～97.29%。其中80%烯酰嗎啉WDG2000倍液、10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液對葡萄霜霉病菌孢子囊的萌發抑制率在90%以上；其次是0.3%丁子香酚SL500倍液、3×108CFU/g哈茨木霉菌WP200倍液、0.5%蛇床子素AS500倍液、250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液、23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液和250 g/L嘧菌酯SC2000倍液，對葡萄霜霉病菌孢子囊的萌發抑制率＞80%～90%；其他2種生物藥劑1.5%苦參·蛇床素AS1000倍液和4%嘧啶核苷類抗菌素AS1000倍液，對葡萄霜霉病菌孢子囊的萌發抑制率＞70%～80%。

表1 10生物與化學藥劑對葡萄霜霉病菌孢子囊萌發的抑制效果

圖1 藥劑處理前未釋放的孢子囊

圖2 藥劑處理后空囊與消解的孢子囊

2.2 藥劑田間發病前預防試驗

試驗表明（表2），供試10種生物和化學藥劑對田間葡萄霜霉病均有一定預防保護效果，但差異明顯。

5種生物藥劑，3次藥后7天預防效果24.05%～55.68%，其中4%嘧啶核苷類抗菌素AS1000倍液和3× 108CFU/g哈茨木霉菌WP200倍液防效超過50%，其他3種生物藥劑防效均低于40%；3次藥后14天的預防效果12.12%～35.58%，防效均較低，說明持效期短，相比而言，1.5%苦參·蛇床素AS1000倍3次藥后7天防效不高，而14天的持效性好于其他4種供試生物藥劑。

5種化學藥劑，3次藥后7天的預防效果53.13%～84.40%，其中23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液和80%烯酰嗎啉WDG2000倍液，防效超過80%；10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液和250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液防效在70%～80%，250 g/L嘧菌酯SC2000倍液防效低于60%。3次藥后14天的預防效果35.13%～68.76%，其中10%氟噻唑吡乙酮SC3000倍和80%烯酰嗎啉WDG2000倍液防效在60%～70%，23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液和和250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液防效在50%～60%，250 g/L嘧菌酯SC2000倍液防效低于50%。

因此，發病前預防，以10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液持效期長，3次藥后14天防效最好，與其他各處理差異均顯著；80%烯酰嗎啉WDG2000倍液和23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液3次藥后7天防效最高，兩者差異不顯著，但3次藥后14天防效均顯著低于10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液；其次為250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液防效較好；250 g/L嘧菌酯SC2000倍液防效較低。

2.3 田間發病后治療試驗

試驗表明（表3），供試5種生物藥劑和5種化學藥劑，在葡萄霜霉病田間葉片發病后防治，均有一定治療效果，但化學藥劑防效均明顯好于生物藥劑，差異明顯。

5種生物藥劑，3次藥后7天治療效果21.32%～46.24%，3次藥后14天治療效果18.47%～38.55%，均低于50%，說明發病后治療效果均較差，且持效期短，但相比而言，3×108CFU/g哈茨木霉菌WP200倍液防效好于供試其他生物藥劑。

5種化學藥劑，3次藥后7天治療效果50.87%～84.82%，其中10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液和80%烯酰嗎啉WDG2000倍液防效超過80%，23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍防效在60%～70%，250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液和250 g/L嘧菌酯SC2000倍防效低于60%。3次藥后14天治療效果46.83%～73.55%，其中10%氟噻唑吡乙酮SC3000倍液防效超過70%，80%烯酰嗎啉WDG2000倍防效60%～70%，23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液和250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液防效在50%～60%，250 g/L嘧菌酯SC2000倍防效低于50%。

表2 10生物與化學藥劑對葡萄霜霉病的發病前預防試驗效果

因此，5種化學藥劑治療效果，以10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液無論速效性與持效性最高；其次為80%烯酰嗎啉WDG2000倍液，與10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液相比，3次藥后7天防效無顯著差異，但顯著低于3次藥后14天防效；23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液3次藥后7天和14天防效，均低于10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液和80%烯酰嗎啉WDG2000倍液；250 g/L吡唑醚菌酯EC2000倍液，防效低于23.4%雙炔菌酰胺SC1500倍液，但兩者無顯著差異；250 g/L嘧菌酯SC2000倍防效偏低。

試驗中觀察，以上藥劑對葡萄生長均無明顯不良影響，葉片色澤形態均良好。

表3 10種生物與化學藥劑對霜霉病發病后治療性試驗效果

3 討論

國內外有關葡萄霜霉病防控技術的研究表明，種植抗病品種、避雨栽培、準確預警及配套藥劑防治是葡萄霜霉病的重要防控手段[19]。岳憲化等報道哈茨木霉菌可濕性粉劑對葡萄霜霉病具有較好的防效[20]。李寶燕等報道，0.3%丁子香酚SL 3 mg/L、1.5%苦參堿AS 25 mg/L、3%多抗霉素WP 60 mg/L、0.5%小檗堿AS 25 mg/L在二次藥后7天及末次藥后8天的防效均在80%以上，是防治葡萄霜霉病的有效生物殺菌劑，而2%蛇床子素EC在加倍劑量（4～6倍）條件下，防效仍不理想[21]。王猛報道10%氟噻唑吡乙酮可分散油懸浮劑對葡萄霜霉病有很好的防治效果[22]。郭建國等[23]通過3種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑對甘肅天水地區葡萄霜霉病病菌的敏感性測定，發現甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑對天水地區葡萄霜霉病病菌的敏感性高，其250 g/L嘧菌酯SC1000倍液、25%烯肟菌酯EC1000倍液和250 g/ L吡唑醚菌酯EC1000倍液噴霧對葡萄霜霉病均有較好的防治效果。有關已報道的藥劑試驗是在葡萄霜霉病田間發病后的防治結果，不能完全評價藥劑的防治作用，因不同藥劑和種類對靶標對象作用機理有差異，發病前和發病后的使用效果差異也較大。

本研究5種生物藥劑室內測定對葡萄霜霉病孢子囊萌發均有一定抑制效果，但田間實際防效較低，持效期較短，且田間發病前預防效果好于發病后治療效果。5種化學藥劑或新劑型對葡萄霜霉病孢子囊萌發抑制效果均較高，10%氟噻唑吡乙酮OD田間發病后防效好于發病前防效，且持效性好；23.4%雙炔菌酰胺SC、250 g/L吡唑醚菌酯SC等田間發病前防效高于發病后治療效果，80%烯酰嗎啉WDG田間發病前和發病后防治效果相近，而250 g/L嘧菌酯SC發病前預防和發病后治療效果均偏低。由于霜霉病的發生和流行與雨水的關系很大[24-25]，高濕低溫對孢子囊產生和侵染十分有利[26-27]。本試驗于2016年5月中旬至7月上中旬進行，期間本地區雨水頻繁和持續時間長，十分有利霜霉病大發生，是本地區霜霉病發生較重的年份，此外葡萄品種、栽培方式和菌源等的差異，可能會導致本試驗結果得出的供試藥劑特別是生物藥劑的防效與有關報道偏低。對于江蘇蘇南丘陵地區露天栽培的感病葡萄品種和雨水多的年份，單一使用供試的生物藥劑防治葡萄霜霉病有一定風險，建議縮短防治間隔期或與其他藥劑合理混用，以提高防效。由于本試驗各藥劑選擇在商品標注濃度范圍內的一種濃度配制，由于同一種藥劑不同濃度使用效果不同,因此適宜劑量范圍,需要根據當地葡萄品種、栽培方式、氣候特點和發病程度等實際情況調整用量。為了解決生物源農藥防效不穩定及大面積推廣應用風險較高、化學防治普遍存在的抗藥性及農藥殘留超標等問題，可將生物源農藥與化學農藥交替使用或合理混用協同防病，達到優勢互補、降低化學農藥的用量、增強防效及擴大防治病害范圍的目的[28]，還有待進一步研究。

4 結論

本研究表明，供試的5種生物藥劑對葡萄霜霉病孢子囊萌發均有一定抑制效果，但孢子囊萌發抑制率與田間實際防效不盡一致，如0.3%丁子香酚SL500倍液對孢子囊萌發抑制作用較好，但田間防效相對較差。在田間葡萄霜霉病發病前，3×108CFU/g哈茨木霉菌WP200倍液、4%嘧啶核苷類抗菌素AS1000倍液三次藥后7天防效超過50%，但均低于60%，其他3種生物藥劑防效均低于40%；3次藥后14天的預防效果均低于40%，說明持效期短，相比而言，1.5%苦參·蛇床素AS1000倍3次藥后14天的持效性好于其他4種供試生物藥劑。發病后治療效果來看5種生物藥劑均較差。因此嘧啶核苷類抗菌素、哈茨木霉菌等在葡萄霜霉病田間發病前預防有一定防效，但應縮短防治間隔期。

供試5種化學藥劑對葡萄霜霉病孢子囊萌發抑制效果均較高，以10%氟噻唑吡乙酮OD3000倍液和80%烯酰嗎啉WDG2000倍液對孢子囊萌發抑制效果高達90%以上，且田間發病前預防和發病后治療效果也均最高，特別是10%氟噻唑吡乙酮OD持效性好，可以適當減少使用次數；23.4%雙炔菌酰胺SC、250 g/L吡唑醚菌酯SC等田間發病前防效高于發病后治療效果，本著經濟有效的原則，適當提早在發病前使用；而250 g/L嘧菌酯SC發病前預防和發病后治療效果均偏低，建議適當提高劑量在發病前使用，或與其他防治霜霉病藥劑復配使用，如譚玉嫻等研究表明嘧菌酯與烯酰嗎啉2:1時復配對葡萄霜霉病菌生長的抑制作用較強[29]。另有報道吡唑醚菌酯、嘧菌酯等甲氧丙烯酸酯類殺菌劑具有高效、廣譜、低毒、低殘留、對環境安全、作用機制獨特等特點[30]，對葡萄炭疽病、白粉病等多種病害有較好兼治效果[31-33]，可結合防治。同時注意不同藥劑的交替使用和合理混用，以防止和延續抗藥性。

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Pharmacodynamic Evaluation of 10 Biological and Chemical Fungicides Against Grape Downy Mildew

Ji Muxiang,Wu Qinyan,Wang Jianhua,Yang Yong,Wu Xiang,Zhuang Yiqing
(Zhenjiang Agricultural Science Institute of Jiangsu Hilly Regions,Jurong 212400,Jiangsu,China)

The aim is to select new biological and chemical fungicides and formulations for controlling the grape downy mildew scientifically.The indoor spore germination and field control were used to compare the inhibition and control effect of five biological fungicides and five chemical fungicides on grape downy mildew. Five biological fungicides showed certain inhibitory effects on sporangium germination.Control effect of pyamidine nucleotide bacteriophages(4%,AS diluted by 1000 times)and hartz trichoderma(3×108CFU/g,WP diluted by 200 times)were all over 50%in prevention trial after 3 times’application;however,the treatment results were less than 50%.Among the five chemical fungicides,oxathiapiprolin(10%,OD diluted by 3000 times),dimethomorph(80%,WDG diluted by 2000 times),mandipropamid(23.4%,SC diluted by 1500 times), and pyraclostrobin(250 g/L,EC diluted by 2000 times)showed a better inhibitory effect on spore germination, and had better control effect in prevention and treatment trials in field,but azoxystrobin(250 g/L SC diluted by 2000 times)had bad control effect in field.The pyrimidine nucleoside antibiotic and hartz trichoderma should be applied before the onset and could shorten the control cycle effectively.Except pyraclostrobin,the remaining four new chemical fungicides or new formulations showed better prevention and treatment effect in field against grape downy mildew,and oxathiapiprolin had a longer duration and was of promotion value.

S436.631.1+2

：A論文編號：cjas16100025

江蘇省農業科技自主創新項目“優質安全鮮食葡萄產業鏈關鍵技術創新與集成應用”[SCX(16)1378]；國家科技富民強縣專項“應時鮮果病蟲害綠色防控技術落集成研究及示范推廣”(BN20156222)。

吉沐祥，男，1963年出生，江蘇寶應人，研究員，本科，研究方向：果樹植保與農藥應用開發研究。Tel：0511-80978060，E-mail：jilvdun2800@163.com。

莊義慶，男，1964年出生，江蘇丹徒人，研究員，博士，研究方向：農作物植保技術研究。通信地址：212400江蘇省句容市華陽鎮弘景路1號江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所，Tel：0511-80978060，E-mail：yqzhuang@sina.com。

2016-10-27，

：2016-12-23。