新型酵母培養(yǎng)物的制備及其在斷奶仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用研究

李帥

【摘 要】本文從傳統(tǒng)酒曲和酸面團(tuán)中分離出兩株釀酒酵母，結(jié)合現(xiàn)代發(fā)酵工藝制備一種酵母培養(yǎng)物，并將其應(yīng)用到仔豬生產(chǎn)中，觀察其對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用和糞便微生物的作用效果。

【關(guān)鍵詞】酵母培養(yǎng)物；仔豬生產(chǎn)；宿主免疫功能

一、材料與方法

（一）材料

麥芽汁培養(yǎng)基，MRS瓊脂培養(yǎng)基，麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，電熱恒溫培養(yǎng)箱，三目生物顯微鏡，立式高壓蒸氣滅菌鍋，酒曲和酸面。

（二）方法

1.菌種分離鑒定

將酒曲和酸面團(tuán)各10g分別加人200ml YPD液體培養(yǎng)基中，無(wú)菌條件下30℃培養(yǎng)24h后，搖勻，用無(wú)菌生理鹽水梯度稀釋，選取10-6、10-7、10-8 3個(gè)稀釋度，準(zhǔn)確吸取0.1ml稀釋液均勻涂布于YPD固體培養(yǎng)基上，30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，分別從兩種曲劑中挑取一種類似釀酒酵母的典型單菌落于YPD液體培養(yǎng)基中，30℃下培養(yǎng)24h后劃線分離2 ～ 3次，將純培養(yǎng)物轉(zhuǎn)YPD同體斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)12h后，置于4℃低溫冰箱保藏。從酒曲和酸面團(tuán)分離到的菌種分別標(biāo)記為SY和JY。將分離到的菌種進(jìn)行分子鑒定，確定菌種。

2.酵母培養(yǎng)物制備

利用YPD培養(yǎng)基分別接種兩環(huán)純化好的兩種菌株于液體培養(yǎng)基中，30℃，200r/min搖床培養(yǎng)12h，得種子液。然后按照5%的添加量，將兩種種子液分別添加到麥芽汁培養(yǎng)基中進(jìn)行液體有氧發(fā)酵，30℃，200r/min搖床發(fā)酵24h。最后按10%的添加量將兩種發(fā)酵液，以1：1的比例，添加到固體培養(yǎng)基中混勻，密封瓶口，放于30℃靜置發(fā)酵48h。將所制得的酵母培養(yǎng)物均勻散于瓷盤中，放于室溫，自然風(fēng)干。粉碎過(guò)40-60目篩，即為復(fù)合酵母培養(yǎng)物。

3.YC對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能的影響

選擇健康、平均體重為（15.7±0.26）kg的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交生長(zhǎng)豬90頭，按體重、性別基本一致的原則隨機(jī)分為2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15頭。]對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧；酵母培養(yǎng)物組飼喂基礎(chǔ)日糧+5g/kg YC，試驗(yàn)期為35d。測(cè)定指標(biāo)有平均日增重、平均日采食量、料重比、腹瀉率、表觀消化率以及腸道微生物。試驗(yàn)采用的基石出日糧為參照NRC（1998）配制的粉狀飼料，飼料的常規(guī)原料根據(jù)豬場(chǎng)實(shí)際情況而定，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。采用SPSS 19.0軟件的one-way ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析，以Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

1）預(yù)混料為每千克飼糧提供：V A 20001U，V D 3750IU，V E 175mg，VB1 20mg，VB275mg，VB625mg，煙酰胺225rng，泛酸鈣100mg，葉酸10mg，氧化膽堿3g，Cu 625mg， Fe 625mg，Zn 375mg，Mn 357mg，I 4mg，Se 0.6 mg，食鹽12g。

2）均為實(shí)測(cè)值。

二、結(jié)果與分析：YC對(duì)保育豬生長(zhǎng)性能的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在仔豬日糧中添加YC可提高平均日增重7.2%，提高平均日采食量1.74%，降低料重比5.45%（P>0.05）。顯著提高了仔豬對(duì)能量和干物質(zhì)的消化率，且顯著增加腸道乳酸菌數(shù)量，降低大腸桿菌數(shù)量，從而使仔豬腹瀉率顯著降低（P<0.05）。見表2、3、4。

三、討論

本實(shí)驗(yàn)表明：YC組對(duì)平均日增重及采食量沒有顯著變化（P>0.05），但顯著降低了仔豬的腹瀉率（P<0.01）。YC可顯著提高斷奶仔豬對(duì)CP、干物質(zhì)、能量的消化率（P<0. 05），鈣、磷的消化率則不顯著（P>0.05）。本試驗(yàn)研究結(jié)證實(shí)YC對(duì)總能和干物質(zhì)消化率顯著高于對(duì)照組（P<0.05），對(duì)有機(jī)物、粗蛋白、粗脂肪以磷消化低于對(duì)照組（P>0.05），而粗纖維和鈣的消化則顯著低于對(duì)照（P< 0.05）。

YC中酵母多糖抑制有害菌對(duì)腸道定植，且其中含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為腸道有益菌繁殖提供強(qiáng)大的動(dòng)力，從而改善胃腸環(huán)境。但是YC組生長(zhǎng)性能未見顯著提高。