亮氨酸對奶牛乳腺上皮細胞內乳脂合成相關基因和蛋白表達的影響

趙艷麗 陳 璐 史彬林 郭曉宇 閆素梅

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

亮氨酸對奶牛乳腺上皮細胞內乳脂合成相關基因和蛋白表達的影響

趙艷麗 陳 璐 史彬林 郭曉宇 閆素梅*

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

本試驗旨在研究亮氨酸(Leu)對泌乳奶牛乳腺上皮細胞(BMECs)內乳脂合成相關基因和蛋白表達的影響，以探討Leu對乳脂合成的影響機理。將第3代BMECs隨機分為6個處理，每個處理6個重復。6個處理培養液中Leu濃度分別為0.45、0.90、1.80、2.70、3.60和7.20 mmol/L，37 ℃、5% CO2培養48 h后測定BMECs內甘油三酯(TG)的含量及乳脂合成相關基因和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)與固醇調節元件結合蛋白(SREBP1)蛋白的相對表達量。結果顯示：Leu濃度對BMECs內TG含量無顯著影響(P>0.05)。適宜濃度的Leu顯著促進脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰輔酶A羧化酶A(ACACA)基因的表達(P<0.05)，FASN基因的相對表達量以1.80～2.70 mmol/L Leu處理、ACACA基因的相對表達量以1.80～7.20 mmol/L Leu處理較高。Leu濃度顯著影響BMECs內SREBP1基因及蛋白表達(P<0.05)，以1.80 mmol/L Leu的促進效果最好。雖然Leu顯著抑制BMECs內脂肪酸結合蛋白3(FABP3)、脂蛋白脂酶(LPL)、乙酰甘油磷酸脂酰轉移酶6(AGPAT6)、線粒體甘油-3-磷酸酰基轉移酶(GPAM)和嗜乳脂蛋白亞家族1成員1(BTN1A1)基因的表達(P<0.05)，但只有高濃度(3.60～7.20 mmol/L)的Leu抑制作用較大。綜合來看，Leu濃度影響BMECs乳脂合成相關基因及PPARγ和SREBP1蛋白的表達。Leu濃度為1.80～2.70 mmol/L時，對脂肪酸從頭合成相關基因及調控因子SREBP1蛋白表達的促進效果較好，對TG合成及脂滴形成相關基因表達的抑制作用較小。

奶牛；乳腺上皮細胞；亮氨酸；乳脂

牛奶總固形物中乳脂含量高達27%，是構成牛奶的重要物質基礎，也是衡量乳品質的重要指標。氨基酸(AA)作為乳蛋白合成的主要前體物，不僅影響乳蛋白合成，對乳脂的合成也有影響[1]，因此，深入研究AA對乳脂合成的影響及其機理對改善乳品質有重要的意義。亮氨酸(Leu)是動物的必需氨基酸，研究發現，小鼠飼糧缺乏Leu后其白色脂肪組織中的脂肪合成受限制，脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰輔酶A羧化酶A(ACACA)基因以及固醇調節元件結合蛋白1c(SREBP1c)和FASN蛋白的表達顯著下降，血清游離脂肪酸和甘油的含量也顯著下降[2]。體外研究發現，Leu在影響乳蛋白合成的同時，也促進奶牛乳腺上皮細胞(BMECs)內固醇調節元件結合蛋白-1(SREBP1)基因的表達和甘油三酯(TG)的合成[3]。這……