益生菌大腸桿菌Nissle 1917抗逆性能、豬腸上皮細(xì)胞黏附率及抑菌效果研究

李金龍 鄧 歡 劉金艷 毛俊霞 王 瑤 唐志如

(西南大學(xué)動物科技學(xué)院，生物飼料與分子營養(yǎng)室驗室，重慶400715)

益生菌大腸桿菌Nissle 1917抗逆性能、豬腸上皮細(xì)胞黏附率及抑菌效果研究

李金龍 鄧 歡 劉金艷 毛俊霞 王 瑤 唐志如*

(西南大學(xué)動物科技學(xué)院，生物飼料與分子營養(yǎng)室驗室，重慶400715)

本試驗旨在研究益生菌大腸桿菌Nissle 1917(EcN)抗逆性能、豬腸上皮細(xì)胞黏附率及抑菌效果。采用體外法對EcN進行生長曲線繪制和耐酸、耐膽鹽、耐熱性能的測定；以豬腸上皮細(xì)胞IPEC-J2細(xì)胞為體外細(xì)胞模型，考察了EcN對該細(xì)胞的黏附率以及對致病菌大腸桿菌K88的黏附抑制率；同時通過蛋白質(zhì)印跡法檢測了EcN對IPEC-J2細(xì)胞β-防御素-2和Toll樣受體4的水平的影響。結(jié)果表明：1)EcN對高酸、高膽鹽和高溫環(huán)境具有一定耐受能力。2)EcN對IPEC-J2細(xì)胞的黏附作用以對數(shù)期最佳，黏附率達33.96%，顯著高于遲緩期、穩(wěn)定期和衰亡期(P<0.05)。3)EcN對致病菌大腸桿菌K88具有良好的抑制效果，黏附抑制率達87.84%。4)EcN還能上調(diào)IPEC-J2細(xì)胞β-防御素-2和Toll樣受體4水平。結(jié)果提示，益生菌EcN具有較好的抗逆性能，能夠良好地黏附豬腸上皮細(xì)胞，對致病菌大腸桿菌K88具有良好的抑制作用。

大腸桿菌Nissle 1917；豬腸上皮細(xì)胞；IPEC-J2細(xì)胞；黏附性能；抗逆性能；耐熱性能；抑菌效果

大腸桿菌Nissle 1917(EcN)(血清型為O6∶K5∶H1)是一株被德國醫(yī)生Alfred Nissle在一戰(zhàn)期間發(fā)現(xiàn)并分離得到的無致病性的革蘭氏陰性益生菌[1]。EcN的益生功能與其對腸道微生物的調(diào)控和腸道內(nèi)細(xì)胞因子引起免疫反應(yīng)存在關(guān)聯(lián)[2]。EcN通過調(diào)控抗菌肽的表達，增加免疫球蛋白A(IgA)和黏蛋白的分泌以及促進抗炎癥免疫反應(yīng)[3]，在腸道中發(fā)揮重要的免疫功能。EcN也能通過上調(diào)緊密連接蛋白閉鎖小帶的表達以及促進緊密連接蛋白上調(diào)和再分布[4-5]，對增強豬腸上皮細(xì)胞的緊密連接和提高黏膜屏障具有重要的作用。……