過(guò)氧化氫誘導(dǎo)斜帶石斑魚(yú)原代肝細(xì)胞氧化損傷模型的構(gòu)建

張潤(rùn)蔚 王 玲 張春曉 宋 凱

(集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，廈門(mén)市飼料檢測(cè)與安全評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廈門(mén)361021)

過(guò)氧化氫誘導(dǎo)斜帶石斑魚(yú)原代肝細(xì)胞氧化損傷模型的構(gòu)建

張潤(rùn)蔚 王 玲 張春曉 宋 凱*

(集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，廈門(mén)市飼料檢測(cè)與安全評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廈門(mén)361021)

本試驗(yàn)以斜帶石斑魚(yú)原代培養(yǎng)肝細(xì)胞為研究對(duì)象，以過(guò)氧化氫為刺激源，以肝細(xì)胞存活率和抗氧化指標(biāo)的變化為判斷指標(biāo)，旨在建立穩(wěn)定的斜帶石斑魚(yú)原代肝細(xì)胞氧化損傷模型。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)液中分別添加0(對(duì)照)、100、200、400、600、800和1 000 μmol/L過(guò)氧化氫，使之分別作用2、4、6、8、12和24 h，共42組，每組10個(gè)重復(fù)，測(cè)定肝細(xì)胞存活率。在得出適宜過(guò)氧化氫作用時(shí)間的基礎(chǔ)上，使每個(gè)濃度的過(guò)氧化氫(每個(gè)過(guò)氧化氫濃度設(shè)6個(gè)重復(fù))作用于肝細(xì)胞適宜時(shí)間后，收集肝細(xì)胞和培養(yǎng)液測(cè)定抗氧化指標(biāo)，篩選使肝細(xì)胞發(fā)生氧化損傷的適宜過(guò)氧化氫作用濃度。結(jié)果顯示：800 μmol/L過(guò)氧化氫作用肝細(xì)胞8 h，斜帶石斑魚(yú)肝細(xì)胞的存活率降低至61.98%；800和1 000 μmol/L組與其他各組相比，肝細(xì)胞超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(600 μmol/L組除外)和過(guò)氧化氫酶活性顯著降低(P<0.05)，丙二醛與脂質(zhì)過(guò)氧化物含量顯著升高(P<0.05)，但800和1 000 μmol/L組之間差異不顯著(P>0.05)。以上結(jié)果表明，過(guò)氧化氫作用濃度為800 μmol/L、作用時(shí)間為8 h，可作為建立斜帶石斑魚(yú)肝細(xì)胞氧化損傷模型的適宜條件。

斜帶石斑魚(yú)；原代肝細(xì)胞；過(guò)氧化氫；氧化損傷模型

石斑魚(yú)為我國(guó)重要的海水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)之一。近年來(lái)，高密度養(yǎng)殖脅迫、水體富營(yíng)養(yǎng)化與營(yíng)養(yǎng)失衡等集約化養(yǎng)殖帶來(lái)的各種不利因素嚴(yán)重阻礙了石斑魚(yú)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展[1-3]。……