卡式微柱凝膠技術在ABO、RH（D）血型鑒定中的應用

李金輝+黃秋燕+胡志愿+何秀琴+蘇丹+李豪柏

摘要：目的 探討卡式微柱凝膠技術在ABO、RH（D）血型鑒定中的主要應用。方法 對英德市人民醫院檢驗科采集的45558例病人血液標本同時采用卡式微柱凝膠法與傳統手工操作法進行血型鑒定檢測。結果 卡式微柱凝膠法正確率為100%，手工法正確率為99%。兩種方法比較差異無統計學意義（P>0.05）。結論 卡式微柱凝膠法操作標準化，結果判定清晰準確，具有很大的臨床應用價值，值得推廣和應用。

關鍵詞：血型鑒定；手工操作法；卡式微柱凝膠法；

Application of Card Microsphere Gel in ABO， RH （D） Blood Type Identification

LI Jin-hui，HUANG Qiu-yan，HU Zhi-yuan，HE Xiu-qin，SU Dan，LI Hao-bai

（Yingde City People's Hospital Laboratory of Guangdong Province，Yingde 513000，Guangzhou，China）

Abstract：Objective To investigate the main application of card microcolumn gel technique in ABO and RH（D）blood group identification.Methods Blood samples were collected from 45558 patients collected by Yingde City People 's Hospital，and the blood type was detected by the method of card micro-column gel method and traditional manual method.Results The correct rate of card microcolumn gel was 100%，and the correct rate was 99%. There was no significant difference between the two methods（P>0.05）.Conclusion Cartridge microcolumn gel method is standardized，and the result is clear and accurate.It has great clinical value and worthy of popularization and application.

Key words：Blood type identification；Manual method；Card microcolumn gel method

血型鑒定在急診搶救、手術治療、貧血治療、獻血和輸血前檢查等過程中是不可缺少的試驗，血型鑒定是否正確無誤，與臨床輸血是否安全有效息息相關。它的正確與否關系到病人生命安危。目前在國內中小型醫院大多數采用手工操作法鑒定血型，由于手工操作法鑒定不易標準化，且干擾因素較多，觀察結果主觀性強，造成血型錯檢時有發生。近年來卡式微柱凝膠ABO、RH（D）血型抗原試驗在血型鑒定方面由于操作簡單、易于標準化和判定結果清晰準確在各級醫院推廣應用普及。我院檢驗科于2012年6月開始采用微柱凝膠法和傳統手工操作法進行血型鑒定，現將實驗結果報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料 全部病例血液標本來自我院2015年1月～2016年5月住院及門診患者45558例，采集待檢者靜脈血液2ml，用常規EDTA-K2抗凝，分別進行手工操作法和卡式微柱凝膠ABO、RH（D）血型抗原檢測法血型鑒定。

1.2儀器 離心機：采用中山市生科試劑儀器有限公司提供專用離心機。

1.3試劑

1.3.1卡式微柱凝膠ABO、RH（D）血型抗原鑒定試劑 中山市生科試劑儀器有限公司生產。

1.3.2手工鑒定操作法試劑 ABO 正定型抗-A、抗-B血清為上海血液生物醫藥有限責任公司生產提供，RH（D）試劑為長春博德生物技術有限公司生產。

1.4鑒定方法

1.4.1卡式微柱凝膠ABO、RH（D）血型抗原檢測法 按中山市生科試劑儀器有限公司提供的說明書進行標準操作和判讀結果。

1.4.1.1制備1%待檢紅細胞生理鹽水。

1.4.1.2撕開檢測卡的封膜，于A、B、D、Control微柱管反應腔中加入1%待檢RBC生理鹽水懸浮液各50 ul。

1.4.1.3檢測卡置專用離心機，1800 r/min，2 min，2500 r/min， 1 min。

1.4.1.4取出判定結果 結果判定標準如下；凝集的紅細胞被排阻在具有三維空間網狀結構的凝膠表層或凝膠顆粒間隙之中，判定為陽性結果，表示待檢紅細胞含有相應血型抗原；RBC全部沉積于凝膠孔腔底部，判定為陰性結果，表示待測待檢紅細胞不含有相應血型抗原。

1.4.2手工操作 按《全國臨床檢驗操作規程》[1]規定進行。

1.5 統計學處理 采用SPSS13.0統計學軟件包進行數據處理，計數資料結果用率表示，統計方法采用？字2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2結果

將上述兩種方法的鑒定結果進行比較，如果所檢測血型結果不符合者，將標本血液紅細胞用生理鹽水離心洗滌3次，再用兩種方法重復測定檢查，統計出正確百分率。

3討論

微柱凝膠技術是1994年獲得美國FDA批準的一項免疫學檢測技術，其特異性、靈敏度試驗、重復性、穩定性試驗結果符合其性能指標要求。目前已在歐美等發達國家作為常規性檢測技術廣泛應用于臨床[2-3]。卡式微柱凝膠法是抗原抗體反應與凝膠分子篩技術相結合的產物。通過調節葡聚糖凝膠的濃度來控制分子篩孔徑大小，使分子篩只允許單個紅細胞通過，從而達到分離凝集紅細胞和游離紅細胞的目的。即將紅細胞和血清加在凝膠的上部反應離心以后，凝集紅細胞將受到凝膠的阻礙而停留在凝膠的上部或凝膠中，則證明發生凝集反應為陽性，反之，所有紅細胞都停留在凝膠腔底部，證明未發生凝集反應，則可判為凝集反應陰性。

卡式微柱凝膠ABO、RH（D）血型抗原檢測法采用標準化定量操作，最大限度減少了實驗室操作人員的主觀性，隨意性，重復性好，由于采用了凝膠分子篩技術， 免疫學檢測技術，大大提高了血型鑒定技術的靈敏度，安全性。將凝集紅細胞與游離紅細胞分離開，使試驗結果一目了然，避免了鏡下的主觀影響和人為因素失誤。所需檢測標本量少，大約為手工法用血量的1/2～1/4，尤其適用于新生兒、大面積燒傷等患者標本不易抽取采集血液的待檢測者。卡式微柱凝膠法操作簡便，省去繁瑣的洗滌紅細胞過程，不再擔心抗人球蛋白抗體被中和而產生假陰性影響導致血型鑒定錯誤發生。便于保存，一般置室溫可保存數月至1年，還可進行拍照攝像取證提供永久記錄，以備發生血型鑒定差錯和發生醫療糾紛時查找原始資料方便核查。

綜上所述，鑒于卡式微柱凝膠法具有以上的優點，雖然成本相對較高，但具有很大的臨床應用價值，值得推廣和應用。

參考文獻：

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京：東南大學出版社，2006：135.

[2]Titlestad K，Georgsen J，Andersen H，et al.Detection of irregular red cell antibodies：more than 3 years of experience with a gel technique and pooled screening cells[J].Vox Sanguinis，1997，73（4）：246.

[3]Langston M M，Lynn P J，Cipolone K M，et al.Evaluation of the gel system for ABO grouping and D typing[J].Transfusion，1999，39（3）：300-305.編輯/雷華