兒童支氣管哮喘患者血清骨橋蛋白和嗜酸細胞趨化因子表達及臨床意義

蘭芙蓉 陳文燕 王明章

兒童支氣管哮喘患者血清骨橋蛋白和嗜酸細胞趨化因子表達及臨床意義

蘭芙蓉 陳文燕 王明章

目的 研究支氣管哮喘患兒血清骨橋蛋白(OPN)和嗜酸細胞趨化因子(Eotaxin)的表達情況，探討支氣管哮喘發病機制。方法 89例支氣管哮喘患兒為研究對象，觀察急性期與緩解期血清骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及嗜酸性粒細胞(Eos)的檢測情況，以49例健康兒童為對照組。研究骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞的相關性。結果 支氣管哮喘急性期、緩解期以及對照組三組骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞依次降低。組間差異均有統計學意義；支氣管哮喘患兒骨橋蛋白(r=0.635)、嗜酸細胞趨化因子(r=0.678)與嗜酸性粒細胞均呈正相關。結論 骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及嗜酸性粒細胞的研究于支氣管哮喘發病機制的研究以及治療均提供了一個新的角度，對支氣管哮喘的防治有重要的臨床價值。

支氣管哮喘；骨橋蛋白；嗜酸性粒細胞；嗜酸細胞趨化因子

支氣管哮喘為多炎性細胞及介質參與的氣道慢性炎性疾病，可見于各年齡段。據有關資料統計[1]：在我國兒童支氣管哮喘的發病率在3%-7.45%，疾病的反復發作引起氣道重塑導致疾病的遷延性。支氣管哮喘的發病機制尚未完全明確，變態反應、炎癥以及氣道的高反應性均被認為與支氣管哮喘密切相關[2]。骨橋蛋白(OPN)為骨組織中一種基質蛋白，近年，研究顯示其作為細胞因子在變態反應性疾病中作用是關鍵[3]。嗜酸細胞趨化因子為一類特異性地募集、趨化和活化嗜酸性粒細胞(Eos)的β-趨化因子。本研究著重于支氣管哮喘患兒血清骨橋蛋白和嗜酸細胞趨化因子的表達情況，探討骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子在支氣管哮喘防治的臨床應用價值。

資料與方法

一、一般資料及分組

89例支氣管哮喘患兒來源于2013年1月至2016年1月我院兒科住院患者設為支氣管哮喘組，男34例，女55例，年齡2-9歲，平均年齡(5.3±2.7)歲，診斷參考2008年中華醫學會頒布的《兒童支氣管哮喘診斷和防治指南》[4]，另選同期49例健康兒童為對照組，男19例，女30例，年齡2-9歲，平均年齡(5.5±2.5)歲，兩組性別、年齡構成無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。研究對象的選擇，注意排除感染性疾病患者，受試者1月內無激素抗膽堿類、抗組胺類藥物使用史，無嚴重內科疾患。受試者家屬均簽署知情同意書。

二、研究方法

對支氣管哮喘患兒進行詳細病史記錄及體格檢查，于患兒入院急性發作期空腹取血5mL檢測骨橋蛋白、嗜酸性粒細胞及嗜酸細胞趨化因子，緩解期(臨床緩解期系指經過治療或未經治療癥狀、體征消失，肺功能恢復到急性發作前水平，并維持3個月以上)空腹取血5mL復檢骨橋蛋白、嗜酸性粒細胞及嗜酸細胞趨化因子，對照組空腹取血作相關檢測。比較支氣管哮喘患兒急性期、緩解期以及對照組三組骨橋蛋白、嗜酸性粒細胞及嗜酸細胞趨化因子的差異，研究骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞的相關性。

三、實驗室檢查

酶聯免疫吸附法檢測骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子，試劑盒由武漢博士德生物有限公司提供，嚴格按試劑說明書操作，全自動血細胞計數儀(東亞)檢測嗜酸性粒細胞，試劑使用中山創藝產品，當日室內質控保證結果的有效性。

四、統計學處理

采用統計學軟件SPSS19.0進行研究數據分析處理，多組均值比較采用方差分析，組間兩兩比較采用SNK法，pearson直線相關分析骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞相關性，以P<0.05有統計學意義。

結 果

一、三組骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞比較

支氣管哮喘急性期、緩解期以及對照組三組骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞經方差分析均有統計學差異(P<0.05)，組間兩兩比較，經SNK法比較，也均有統計學差異(P<0.05)，氣管哮喘急性期、緩解期以及對照組三組骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞依次降低。(見表1)。

表1 三組骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與

注：與對照組比較：*P<0.05，與緩解期比較：#P<0.05，其他P>0.05

二、支氣管哮喘患兒骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞的相關性分析

支氣管哮喘患兒骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞經pearson直線相關性分析均呈正相關，均有統計學意義(P<0.05)，相關系數以嗜酸細胞趨化因子較高。(見表2)。

表2 支氣管哮喘患兒骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與

討 論

支氣管哮喘急性發作系指突然發生喘息、氣促、咳嗽、胸悶等癥狀或原有癥狀急劇加重，伴呼吸困難，呼氣流量降低，常因接觸變應原、刺激物或呼吸道感染等因素誘發。支氣管哮喘的發病機制尚未完全明確，有研究報導[5]：變態反應、氣道慢性炎癥、氣道高反應性、氣道神經調節失常、遺傳機制、呼吸道病毒感染、神經信號轉導機制和氣道重構及其相互作用等因素均與支氣管哮喘有關。嗜酸性粒細胞浸潤為支氣管哮喘的一大特點，研究發現嗜酸性粒細胞升高的程度與支氣管哮喘嚴重程度呈正相關[6]。嗜酸性粒細胞大量沉積于氣道上皮內，并釋放諸如嗜酸性粒堿性蛋白及陽離子蛋白等多種效應分子介導氣道上皮炎性損傷及重塑。骨橋蛋白具備細胞外基質蛋白及細胞因子特性，嗜酸細胞趨化因子在嗜酸性粒細胞募集與浸潤上起重要的促進作用，各類細胞因子網絡失衡被認為是支氣管哮喘發病的基礎[7]。研究骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及與嗜酸性粒細胞的關系在支氣管哮喘發病機制的探討上有重要的臨床意義。

研究數據顯示：支氣管哮喘患兒急性期血清骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及嗜酸性粒細胞大幅升高，緩解期出現一定程度的降低但仍高于正常對照組，三組間差異具有統計學意義。相關性分析顯示：支氣管哮喘患兒骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子與嗜酸性粒細胞均呈正相關，相關系數以嗜酸細胞趨化因子較高。哮喘發病機制為超敏反應，動物實驗顯示[8]：變應原進入小鼠的致敏階段，骨橋蛋白具有促炎作用而在激發階段具有抗炎作用，激發階段予以小鼠外源性骨橋蛋白會刺激嗜酸粒細胞的增多。Kohan[9]等研究發現：骨橋蛋白與氣道平滑肌纖維化及氣道重塑關系密切。骨橋蛋白上調IL-13、金屬蛋白酶-9、血管內皮生長因子等表達促進平滑肌纖維化及新生血管的生成。部分難治性哮喘血清及痰液中均可檢測到骨橋蛋白的高表達。糖皮質激素在支氣管哮喘的治療上療效良好，其藥理為減少機體骨橋蛋白mRNA的表達水平及促進嗜酸性粒細胞的凋亡[10]。嗜酸細胞趨化因子可選擇性結合嗜酸粒細胞表面的趨化因子受體，促使嗜酸粒細胞向炎性聚集。研究人員在致敏小鼠模型注入抗嗜酸細胞趨化因子抗體可導致哮喘豚鼠肺泡灌洗液嗜酸粒細胞減少[11]。嗜酸細胞趨化因子被認為是反應支氣管哮喘急性發作的客觀指標[12]。研究數據符合上述觀點，隨著支氣管哮喘急性期的緩解，血清骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及嗜酸性粒細胞均出現不同程度的降低。數據說明骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及嗜酸性粒細胞的升高一定程度反映了患兒支氣管哮喘疾病病情。

綜上所述，骨橋蛋白、嗜酸細胞趨化因子及嗜酸性粒細胞的研究，對支氣管哮喘發病機制的研究以及治療均提供了一個新的角度，對支氣管哮喘的防治有重要的臨床價值。

[1] Uchida M, Shiraishi H, Ohta S, et al. Periostin, a matricellular protein, plays a role in the induction of chemokines in pulmonary fibrosis[J]. Am J Respir Cell Mol Biol， 2012， 46(5): 677-686.

[2] Ontsuka K, Kotobuki Y, Shiraishi H, et al. Periostin, a matricellular protein, accelerates cutaneous wound repair by activating dermal fibroblasts[J]. Exp Dermatol， 2012，21(5): 331-336.

[3] Singh M, Foster CR, Dalal S, Singh K. Osteopontin: role in extracellular matrix deposition and myocardial remodeling post-MI[J]. J Mol Cell Cardiol, 2010,48(3): 538-543.

[4] 洪建國. 中國兒童支氣管哮喘防治指南修訂要點的探討[J]. 臨床兒科雜志, 2014, (2):101-103.

[5] Sidhu SS, Yuan S, Innes AL, et al. Roles of epithelial cell-derived periostin in TGF-beta activation, collagen production, and collagen gel elasticity in asthma[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2010,107(32): 14170-14175.

[6] Tischer C, Chen CM, Heinrich J. Association between domestic mould and mould components, and asthma and allergy in children: a systematic review[J]. Eur Respir J, 2011, 38(4): 812-824.

[7] 張永明, 林江濤, 蘇楠,等. 支氣管哮喘患者氣道炎癥表型研究[J]. 中華結核和呼吸雜志, 2015,38(5): 348-351.

[8] Puxeddu I, Berkman N, Ribatti D, et al. Osteopontin is expressed and functional in human eosinophils[J]. Allergy, 2010,65(2): 168-174.

[9] Kohan M, Breuer R, Berkman N. Osteopontin induces airway remodeling and lung fibroblast activation in a murine model of asthma[J]. Am J Respir Cell Mol Biol, 2009, 41(3): 290-296.

[10] Kurokawa M, Konno S, Matsukura S, et al. Effects of corticosteroids on osteopontin expression in a murine model of allergic asthma[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2009,149(Suppl 1): 7-13.

[11] 朱述陽, 呂麗麗, 夏春偉,等. Eotaxin和CCR3在哮喘豚鼠肺和骨髓組織的表達及調控[J]. 細胞與分子免疫學雜志， 2007， 23(6): 543-545.

[12] 耿秀娟, 徐波, 李雙拾,等. 支氣管哮喘患者血清骨橋蛋白和嗜酸細胞趨化因子表達及臨床意義[J]. 中國免疫學雜志， 2011， 27(1): 68-69.

Study on serum osteopontin and eotaxin expression in children with bronchial asthma and its clinical significance

LANFu-rong,CHENWen-yan,WANGMing-zhang

the404thHospitalofMianyang,Mianyang,Sichuan621000,China

Objective To study the expression of serum osteopontin (OPN) and eosinophil chemotactic factor (Eotaxin) in bronchial asthma children, and to explore the pathogenesis of bronchial asthma. Methods 89 patients with bronchial asthma were selected to observe the levels of serum osteopontin, eosinophil chemotaxis factor and eosinophil eosinophil (EOS) during acute and remission period. Another 49 healthy children were taken as the control group. The correlation between osteopontin and eosinophils eotaxin level and eosinophils was studied. Results The level of osteopontin (OPN), eosinophil chemotaxis factor and EOS decreased gradually in the acute group, the remission group and the control group. Osteopontin (r=0.552) and eosinophil chemotactic factor (r=0.678) were positively correlated with eosinophil eosinophil. Conclusion The detection of osteopontin, eosinophil chemotactic factor and eosinophile granulocyte provides a new point of view in the pathogenesis of bronchial asthma research and treatment, which has important clinical value on prevention and treatment of bronchial asthma.

asthma; osteopontin; eosinophil; eosinophil chemotactic factor

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.05.028

621000 四川 綿陽，綿陽四○四醫院兒科

2016-09-27]