ABO血型鑒定的質量控制

王春光

摘 要：目的：討論ABO血型鑒定時的影響因素。方法：對800例患者采用玻片法和試管法進行血型鑒定。結果：玻片法和試管法存在一定結果不相同的情況，玻片法準確率低于試管法。結論：血型鑒定存在一定的影響因素，血型鑒定時應綜合考慮。

關鍵詞：ABO血型；血型鑒定。

【中圖分類號】R446.6

血型是人類血液以血型抗原為表現形的遺傳性狀，ABO血型系統和RH血型系統是紅細胞的兩大血型抗原抗體系統，在臨床輸血和血液遺傳學研究上有重要意義。血型鑒定是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。臨床常用的血型鑒定方法有鹽水凝集法和凝膠微柱法。鹽水凝集法因簡單易行在臨床上廣泛應用，其又分為玻片法和試管法，結果在實際操作中會受到諸多因素的影響。本文通過對800名住院患者進行玻片法和試管法的血型鑒定通過對其結果分析，探討ABO血型鑒定中的影響因素。

一、資料與方法

（一）資料 從2013年6月-2013年12月本院需進行血型鑒定的住院患者800名，每人抽取edta抗凝血，在2小時內用玻片法和試管法完成血型鑒定。

（二）試劑 人abo血型反定型用紅細胞試劑盒，上海血液生物醫藥有限責任公司；抗a、抗b血型鑒定單克隆抗體；長春博德生物技術有限公司提供。

（三）方法 正定型法：① 玻片法：取清潔且帶有圓形凹陷的推片1張，并注明A、B字樣。將抗A試劑、抗B試劑各1滴分別滴于玻片上A、B處。分別取等體積待檢血樣（5%紅細胞懸液或全血）于抗A試劑和抗B試劑。另取潔凈推片1張，標明A細胞、B細胞和0細胞，用滴管各加受檢者血清1滴，再分別用滴管滴加A、B和0型試劑紅細胞懸液1滴。用不同的竹簽將分型試劑與待檢血樣調勻，同時不停的搖動玻片并觀察血型凝集（或溶血）反應，也可用低倍鏡觀察結果。②試管法：取潔凈小試管2支，分別標上抗A、B字樣，分別加入抗A、抗B標準血清各1滴，于相應標記的試管；然后分別加入被檢者5%紅細胞生理鹽水懸液l滴于各試管充分混勻；以1000轉/分的速度離心1分鐘。將試管輕輕搖動，使沉于管底的紅細胞浮起，先以肉眼觀察有無凝集（或溶血）現象。

反定型法：首先將待檢血以2500轉/分離心3分鐘，分離血清；取小試管3支，分別標記A、B、O，各管加被檢者血清1滴，然后按標記分別加入5% 的A、B、O型標準紅細胞生理鹽水1滴，混勻；以1000轉/分離心1分鐘后取出試管，輕搖管底，觀察凝集。

結果判斷：凝集判斷標準紅細胞均勻分布，無凝集顆粒，顯微鏡下紅細胞分散存在，無凝集靠攏現象為陰性，紅細胞出現凝集為陽性。

二、結果

玻片法檢驗結果：O型253人 ；B型205人 ；A型202人；AB型140人

試管法檢驗結果：O型260人； B型201人； A型199人； AB型140人

不論是玻片法還是試管法，800名受檢者 的血型分布是一致的，即O型最多，之后依次為B型、A型、AB型，即O>B>A>AB。② 玻片法和試管法的鑒定結果顯示AB型人數相同，而A型、B型和O型人數不完全一致，存在一定的差異。

三、討論

血型由血型基因決定，是血細胞的主要特征之一，在臨床輸血和血液遺傳學研究上有重要意義。輸血安全是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。

（一）醫務人員的問題 臨床醫生在填寫輸血申請時，沒有做血型檢測，單憑印象或聽信患者的自訴血型而造成血型錯誤；臨床護士在抽取血標本時，未校對患者的姓名、床號，僅憑印象，抽了其他人的血液而造成血型報告錯誤或交叉配血不合；檢驗科人員沒有對報告核對正確，造成血型鑒定錯誤。

（二）被檢紅細胞

①血型測定的錯誤血型：檢測時，因患者紅細胞懸液濃度過低，又只用肉眼觀察結果，使之在血型抗原較弱的情況下，微弱、細小的凝集未看到，而造成定型報告錯誤。②標本新鮮，嚴防污染。細菌污染的標本，紅細胞上t抗原被激活，與標準血清中的抗t抗體結合，出現全凝集現象，干擾血型鑒定。當疑有血漿成分干擾血型鑒定時，可用生理鹽水反復洗滌紅細胞以除去干擾。③ 冷凝集素屬于冷反應性的自身抗體，4℃ 條件下，正常人血清中的冷凝集素效價低于1：16，冷凝集素效價增高是導致獻血者血型正反定型不符的常見情況。在較低溫度條件下，冷凝集素能夠與標準紅細胞和自身紅細胞產生凝集現象，凝集強度隨著溫度的升高而減弱。低效價的冷凝集素在37℃不能凝集標準rbc和自身rbc，因此不會造成血型誤判，但高效價的冷凝集素在37℃仍可產生較強凝集，容易造成血型誤判。④ abo亞型在血型血清學試驗中是導致正反定型不符的主要原因之一。亞型屬于同一血型抗原，是由基因所決定的抗原結構和位點數改變導致的弱表現型。⑤ abo血型抗體減弱：abo血型規則抗體合成量的不足也是造成正反定型不符的重要因素。當獻血者血清中抗a和抗b效價減弱，其反定型格局總表現為ab型。在這種情況下，可以通過增加血清用量，降低反應溫度，延長反應時間，應用低離子強度溶液等方法，檢出低效價的抗a和抗b。

（三）實驗器材

① 所用器材必須清潔、干燥，試管、滴管要專用，標記清楚。②用試管法定型時，應同時進行正向和反向定型。每批測定均須設置對照。③紅細胞濃度按要求配制，紅細胞與相應抗體的比例適當。④反應溫度、反應時間、離心時間是血型鑒定的重要影響因素，要按操作規程嚴格控制。

（四）其它因素

① 經輸血或妊娠等免疫刺激產生，在獻血者中常見的不規則抗體是抗m、抗n和抗a等。在反定型試驗中，不規則抗體可以和標準紅細胞上相應的抗原發生凝集反應，而這種反定型結果與a或b抗原無關，所以導致abo血型鑒定時正反定型結果不一致。②類b抗原某些受腸道革蘭氏陰性桿菌感染的病人，紅細胞獲得了類b抗原，a型病人可誤定為ab型，o型誤定為b型。因此，感染體征病人配血不合時，應考慮類b。③磺胺類藥物引起的凝集有人報道一個b型的獻血員闌尾術后用氨苯磺胺，3個月后，其血清能凝集a、ab型的紅細胞，也能凝集b型的紅細胞。另外，注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗體，而青霉素已吸附在紅細胞表面，當此紅細胞與含有青霉素抗體的血清相遇時便發生凝集。

因此，在具備認真的工作態度的基礎上，還需要不斷積累豐富的血型鑒定經驗，對異常結果進行系統全面地分析，查明原因，以獲得abo血型的準確定型，確保安全輸血。

參考文獻

[1]衛生部醫政司：《全國臨床檢驗操作規程》第3版，2005.