SOX9在食管鱗癌中的表達及臨床病理學意義

崔連艷，楊昭婷，倪衛東，玄延花*

(1.延邊大學醫學院 2013級口腔醫學專業，吉林 延吉133002；2.延邊大學醫學院病理學教研室)

SOX9在食管鱗癌中的表達及臨床病理學意義

崔連艷1，楊昭婷2，倪衛東2，玄延花2*

(1.延邊大學醫學院 2013級口腔醫學專業，吉林 延吉133002；2.延邊大學醫學院病理學教研室)

目的 觀察性別決定區Y框蛋白9 (sex-determining region Y box protein 9，SOX9)在食管鱗癌組織中的表達情況，并探討其在食管鱗癌中的臨床病理學意義。方法 在177例食管鱗癌組織中通過免疫組織化學染色法觀察了SOX9、P21、CyclinD1、p-AKT-Thr308和 CyclinE的表達情況，并分析研究了SOX9的表達與食管鱗癌患者的性別、年齡、腫瘤大小、原發腫瘤分期、淋巴結轉移、臨床TNM分期、組織學分級、放療、化療和預后的關系。結果 SOX9在食管鱗癌組織中表達與T分期(P=0.026)、TNM分期(P=0.030)、淋巴結轉移(P=0.035)和總生存率(P<0.001)密切相關。此外，食管鱗癌中過表達的SOX9和細胞周期相關因子p-AKT-Thr308(P=0.032)、P21(P=0.021) 和Cyclin D1 (P=0.028)陽性表達呈正相關。結論 SOX9與食管鱗癌的發生發展、轉移及預后密切相關,SOX9可能成為治療食管鱗癌的一個重要靶點。

食管鱗癌；SOX9;預后

(ChinJLabDiagn,2017,21:0386)

在中國，食管鱗癌的發病率占全部食管癌的60%-70%并且其預后較差，五年生存率僅僅只有15%[1]。判斷識別有效的預后因子對于靶向治療食管鱗癌具有重要的臨床價值。人性別決定區Y框蛋白9 (sex-determining region Y box protein 9，SOX9)是轉錄因子SOX家族的一個重要成員，它包含著DNA高突變的結合位點。有研究報道過表達的SOX9可增加前列腺癌的侵襲性，促進前列腺癌移植瘤中腫瘤的生長、血管生成和浸潤等[2,3]。本論文通過免疫組織化學染色法研究SOX9在食管鱗癌組織中的表達情況，探討其與食管鱗癌之間的關系。

1 材料與方法

1.1 材料

本研究選取韓國首爾三星醫療中心病理科1998-2008年的食管鱗癌組織存檔蠟塊標本157例和20例手術切緣處正常食管黏膜組織。食管鱗癌組織中男150例，女7例；年齡小于65歲40例，大于65歲117例。依據美國癌癥聯合會(AJCC)食管鱗癌TNM分期(2010年)標準：118例無遠處轉移，39例有遠處轉移；47例無淋巴轉移，110例有淋巴轉移；TNM分期I期14例，Ⅱ-Ⅳ期143例；組織學分級Ⅰ級13例，Ⅱ級116例，Ⅲ級28例。所有病例術前未經任何放化療治療。所有病例隨訪5年以上。

1.2 免疫組織化學染色

免疫組織化學染色采用EnVision法,免疫組化EnVision檢測試劑盒購自DAKO公司,SOX9抗體購自Abnova公司，p-AKT-Thr308抗體、P21抗體、CyclinD1抗體和CyclinE抗體均購自北京中杉金橋公司。染色步驟按免疫組化染色常規操作步驟進行。 為證明免疫組化檢測的特異性,實驗中應用了兔IgG代替一抗作為對照,結果為陰性。

1.3 染色結果判定標準

以陽性染色細胞數所占的百分比作為主要分類依據,陽性細胞數超過10%為陽性，陽性細胞數低于10%為陰性。

1.4 統計學方法

統計學分析采用SSPS19.0軟件進行，實驗數據之間的參數比較采用χ2檢驗，同時應用Kaplan-Meier法繪制SOX9的表達與患者術后生存時間曲線的關系圖，P<0.05的差異有統計學意義。

2 結果

SOX9、p-AKT-Thr308、P21和CyclinD1均主要表達于食管鱗癌組織的細胞核中(圖1)。SOX9在食管鱗癌組織中的表達與T分期(χ2=4.966，P=0.026)、淋巴結轉移(χ2=4.449，P=0.035)和TNM分期(χ2=4.691，P=0.030)有關；而與患者性別、年齡、遠處轉移、腫瘤大小、組織學分級及化療、放療均無顯著關系(表1)。

此外，SOX9與p-AKT-Thr308(χ2=4.590，P=0.032)，P21(χ2=5.306，P=0.021)和CyclinD1(χ2=4.810，P=0.028)陽性表達呈正相關，而與CyclinE(χ2=0.005，P=0.946)陽性表達無關(表2)。Kaplan-Meier 分析表明,SOX9表達陽性組與食管鱗癌患者總生存率(χ2=14.765，P<0.001)顯著相關，而與無病生存率(χ2=2.712，P=0.100)無關(圖2)。

表1 SOX9在食管鱗癌組織中的表達與臨床病理參數的關系

表2 SOX9在食管鱗癌組織中的表達與細胞周期相關因子的關系

圖1 食管鱗癌組織中SOX9(A),P21(B),CyclinD1(C)和pAKT-Thr308(D)的表達,EnVision法

圖2 SOX9蛋白表達分別與食管鱗癌患者總生存率(A)、無病生存率(B)的關系

3 討論

SOX9 在乳腺癌、結直腸癌、胃癌中均異常表達，并與其發生發展、侵襲轉移、增殖分化及凋亡等密切相關，但SOX9 與食管鱗癌的關系尚不清楚。本研究結果發現，SOX9在食管鱗癌組織中與T分期、TNM分期、淋巴結轉移和腫瘤細胞增殖密切相關。因此，對 SOX9與食管鱗癌關系的研究有利于進一步了解食管鱗癌發生、發展及轉移機制，為靶向治療提供新途徑。

在Barrett食管或食管腺癌的早期階段SOX9的表達均具有重要的意義[4]。本研究結果示，SOX9表達率在食管鱗癌T1期比T2-4期顯著增高，說明SOX9參與食管鱗癌的進展過程。在食管鱗癌細胞與神經膠質瘤U251細胞中，過表達SOX9均顯著增加腫瘤細胞的遷移和侵襲能力[5]。邵長明等[6]報道，在胃癌中SOX9的表達與腫瘤的Lauren分型、浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移、臨床TNM分期和患者的5年生存率有關。此結果與我們研究結果類似，表明SOX9可能在食管鱗癌進展及預后過程中起重要的作用。SOX9對神經纖維瘤、髓母細胞瘤、胰腺癌以及前列腺癌預后具有重要的參考價值[7]。本研究結果也發現SOX9高表達與食管鱗癌患者預后密切相關，提示SOX9是評價食管鱗癌患者預后的一個關鍵因素。

大多數惡性腫瘤細胞中均存在著細胞周期功能異常,從而導致腫瘤細胞惡性增殖[8]。Jiang 等[9]發現SOX9 在肺腺癌組織中高表達，通過影響細胞周期調節分子 P21的表達促進腫瘤細胞增殖。Wang等[10]研究結果顯示，SOX9還能促進前列腺癌的增殖和侵襲。在食管鱗癌中SOX9的表達與p-AKT-Thr308、P21和CyclinD1陽性表達呈正相關。說明SOX9可通過影響細胞周期,促進食管鱗癌細胞的增殖，具體的調節機制尚有待進一步的深入研究。

[1]Conteduca V,Sansonno D,Ingravallo G,et al.Barrett’s esophagus and esophageal cancer:an overview[J].International journal of oncology,2012,41:414.

[2]Wang H,Leav I,Ibaragi S,et al.SOX9 is expressed in human fetal prostate epithelium and enhances prostate cancer invasion[J].Cancer Res,2008,68:1625.

[3] Schaeffer EM,Marchionni L,Huang Z,et al.Androgen-induced programs for prostate epithelial growth and invasion arise in embryogenesis and are reactivated in cancer[J].Oncogene,2008,27:7180.

[4]Darlavoix T,Seelentag W,Yan P,et al.Altered expression of CD44 and DKK1 in the progression of Barrett’s esophagus to esophageal adeno-carcinoma[J].Virchows Archiv:an international journal of pathology,2009,454:629.

[5]Liu H,Liu Z,Jiang B,et al.SOX9 Overexpression Promotes Glioma Metastasis via Wnt/beta- Catenin Signaling[J].Cell biochemistry and biophysics,2015,73:205.

[6]邵長明，邵欽樹，姚海波,等.SOX9在胃癌組織中的表達及與預后的關系[J].中華胃腸外科雜志，2012,15(7)：736.

[7]Jo A,Denduluri S,Zhang B,et al.The versatile functions of Sox9 in development,stem cells,and human diseases[J].Genes Dis,2014,1(2):149.

[8]Lange CA,Yee Killing D.The second messenger:targeting loss of cell cycle control in endocrine-resistant breast cancer[J].Endocr Relat Cancer，2011，18(4):C19.

[9]Jiang SS,Fang WT,Hou YH,et al.Upregulation of SOX9 in lung adenocarcinoma and its involvement in the regulation of cell growth and tumorigenicity[J].Clin Cancer Res,2010,16(17):4363.

[10]Wang H,Leav I,Ibaragi S et al.SOX9 is expressed in human fetal prostate epithelium and enhances prostate cancer invasion[J].Cancer Res,2008,68:1625.

The clinical pathologic significance of SOX9 expression in esophageal squamous carcinoma

CUILian-yan,YANGZhao-ting,NIWei-dong,etal.

(2013OralMedicineSpecially,YanbianUniversityCollegeofMedicine,Yanji133002,China)

Objective To observe the expression of sex-determining region Y-box 9 (SOX9) proteins and explore the clinicopathologic significance in human esophageal squamous cell cancer (ESCC).Methods The relationship of the expression of SOX9 with sex,age,size,tumor (pT) stage,lymph node metastasis,TNM stage,grade,chemotherapy，radiotherapy and prognosis were examined,respectively.Moreover,we also investigated the SOX9,P21,CyclinD1,CyclinE and p-AKT-Thr308 expression using immunohistochemistry in 177 tissue specimens from ESCC patients.Results The results found that the SOX9 overexpression in ESCC was positively correlated with pT stage (P= 0.026),lymph node metastasis (P=0.035) and TNM stage (P=0.030) and shorter overall survival (P<0.001) markedly.In addition,SOX9 overexpression was positively association with cell cycle-related factors p-AKT-Thr308 (P=0.032),P21(P=0.021) and CyclinD1(P=0.028).Conclusion SOX9 expression was invovled in tumorigenesis,metastasis and prognosis of ESCC and SOX9 maybe a key targeted therapy of ESCC.

esophageal squamous cell cancer;SOX9;prognosis

國家自然科學基金(81460390)；延邊大學大學生創新創業訓練計劃項目基金(ydbksky2016169)

1007-4287(2017)03-0386-04

R735.1

A

2016-12-15)

*通訊作者