卵巢癌患者血清Galectin-3水平及診斷價值研究

馬國慶 藍玲 李艷

·論著·

卵巢癌患者血清Galectin-3水平及診斷價值研究

馬國慶 藍玲 李艷

目的 觀察卵巢癌患者血清半乳糖苷酶-3(Galectin-3)水平，并探討其用于卵巢癌診斷的臨床價值。方法 納入2010年6月至2015年12月就診的初治卵巢癌患者92例，并設置良性卵巢腫瘤組(n=44)及健康對照組(n=43)。患者初次就診時收集一般情況并檢測血清CA125及HE4，收集剩余血清檢測Galectin-3水平。分析Galectin-3與臨床檢測指標的相關性，并使用ROC曲線評估其用于卵巢癌的診斷價值。結果 卵巢癌患者Galectin-3[(1.64±0.68)ng/ml]顯著高于良性卵巢腫瘤組[(0.86±0.42)ng/ml]及健康對照組[(0.69±0.20)ng/ml]，臨床分期較高及存在遠處轉移患者Galectin-3水平更高。卵巢癌組中，Galectin-3與CA125(r=0.431，P<0.001)、HE4(r=0.331，P=0.001)及臨床分期(rs=0.431，P<0.001)顯著正相關。Galectin-3單獨診斷卵巢癌的AUC為0.861(95%CI：0.804～0.918)，其聯合CA125及HE4的AUC為0.916(95%CI：0.871～0.961)。結論 卵巢癌患者血清Galectin-3顯著升高，且與臨床分期顯著相關。Galectin-3聯合CA125及HE4可提高對卵巢癌的診斷效能。

卵巢腫瘤；半乳糖苷酶-3；人附睪蛋白-4；糖類抗原125；診斷

卵巢癌在臨床較常見，由于來源于生殖系統，因此病理類型復雜多樣，早期確診較為困難。目前，世界范圍內每年約22萬女性患卵巢癌，在婦科惡性腫瘤致死病因中排第二位，如北美地區每年新增約22 500例，其病死率可達67.7%，造成了嚴重的衛生及經濟負擔[1]。卵巢癌早期缺乏典型臨床癥狀及特異性篩查方法，大部分發現時已處于病程中晚期，無法進行手術切除，臨床預后極差。目前對卵巢癌的確診仍依賴于病理活檢，但是其存在有創性及不適于大規模篩查的缺點，同時活檢陽性率也受到腫瘤分期的影響。臨床上也一直在尋找更為簡便準確的無創血清學指標來改進對卵巢癌的早期診斷及預后。糖類抗原125(CA125)及人附睪蛋白4(HE4)是目前臨床應用最多的卵巢癌診斷及預后的無創血清學指標，也積累了大量的臨床研究數據[2,3]。然而CA125及HE4也易受到其他腫瘤干擾，準確性有待進一步提高。半乳糖苷酶-3(Galectin-3)的分子量為31 kDa，屬于β-糖苷結合凝集素家族成員，由人14號染色體上的LGALS3基因編碼[4]。研究顯示，Galectin-3在肝細胞癌(HCC)、結直腸癌、乳腺癌及甲狀腺癌等多種惡性腫瘤中均存在異常表達，并在惡性腫瘤的發生與發展中發揮重要調節功能[5,6]。因此，本研究通過檢測卵巢癌患者血清Galectin-3水平，并探討Galectin-3單獨或聯合CA125及HE用于改進卵巢癌無創診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院婦產科收治的2010年6月至2015年12月初治卵巢癌患者92例(卵巢癌組)，年齡(50.37±6.36)歲，其中61例(66.3%)患者已經絕經。卵巢癌均經由組織活檢或術中病理活檢確診。患者臨床分期及病理分型按照最新的國際婦產科協會(FIGO)的指南標準進行分期[7]。卵巢癌組患者臨床分期情況：Ⅰ期11例(12.0%)，Ⅱ期18例(19.6%)，Ⅲ期25例(27.2%)及Ⅳ期38例(41.3%)。病理分型分布情況：漿液性囊腺癌57例(62.0%)、黏液性囊腺癌14例(15.2%)、子宮內膜樣癌10例(10.9%)、透明細胞癌5例(5.4%)、惡性畸胎瘤4例(4.3%)及分類不明型2例(2.2%)。同時納入我院就診(體檢)的良性卵巢腫瘤患者44例(良性卵巢腫瘤組)及健康女性43例(健康對照組)，年齡分別為(51.13±7.12)及(52.45±6.44)歲。

1.2 血清Galectin-3、CA125及HE4的檢測 所有患者初次就診(或體檢)時收集常規實驗室檢測項目剩余血清，凍存于-20℃冰箱。血清Galectin-3的檢測使用成品化商業酶聯免疫試劑盒(Human Galectin-3，ELISA Kit)，購自北京安必奇生物科技有限公司，檢測方法按照試劑盒相關步驟進行(每份血清標本設置2個復孔)。血清HE4的檢測使用相應ELISA試劑盒(Human HE4，ELISA Kit)，購自上海樊克生物科技有限公司，檢測方法按照相關步驟進行。使用酶標儀(Scientific Multiskan FC，Thermo公司)檢測OD值，根據標準品濃度及標準曲線計算樣品Galectin-3濃度，患者Galectin-3水平由復孔濃度取平均值確定。血清CA125使用電化學發光法檢測(Roche，COBAS6000)。

2 結果

2.1 3組患者血清Galectin-3、CA125及HE4水平比較 卵巢癌組中，血清Galectin-3水平顯著高于良性卵巢腫瘤組及健康對照組，差異有統計學意義(P<0.001)。卵巢癌組患者血清CA125及HE4水平也高于良性腫瘤組及健康對照組，差異有統計學意義(P<0.01)。不同卵巢癌臨床分期患者Galectin-3水平由高至低依次為：Ⅳ期(2.01±0.75)ng/ml、Ⅲ期(1.49±0.56)ng/ml、Ⅱ期(1.37±0.43)ng/ml及Ⅰ期(1.16±0.34)ng/ml；存在遠處轉移(n=33)較無遠處轉移(n=59)的卵巢癌患者Galectin-3水平[(1.98±0.77)ng/mlvs.1.46±0.55)ng/ml]更高，差異有統計學意義(P=0.004)。見表1，圖1。

表1 3組患者一般情況及血清Galectin-3、CA125及HE4水平比較

2.2 血清Galectin-3水平與臨床指標及分期的相關性 卵巢癌組中，Galectin-3與CA125(r=0.431，P<0.01)、HE4(r=0.331，P=0.001)、臨床分期(rs=0.431，P<0.001)呈正相關；Galectin-3水平與年齡(r=0.103，P=0.329)、BMI(r=0.017，P=0.869)均無相關性。良性卵巢腫瘤組中，Galectin-3水平與年齡(r=0.186，P=0.227)、BMI(r=0.044，P=0.778)、CA125(r=0.216，P=0.158)及HE4(r=0.055，P=0.724)均無相關性；健康對照組中，Galectin-3水平也與年齡(r=0.011，P=0.942)、BMI(r=0.139，P=0.374)、CA125(r=0.220，P=0.157)及HE4(R=0.067，P=0.670)無相關性。見圖2。

2.3 Galectin-3用于卵巢癌的診斷價值分析ROC曲線分析 血清Galectin-3單獨診斷卵巢癌的AUC為0.861，95%CI為0.804～0.918；HE4的AUC為0.871，95%CI為0.871～0.924；CA125的AUC為0.844,95%CI為0.789～0.899。血清Galectin-3聯合HE4診斷卵巢癌的AUC為0.891，95%CI為0.840～0.941；Galectin-3聯合CA125的AUC為0.899，95%CI為0.851～0.948；Galectin-3聯合HE4、CA125的AUC為0.916，95%CI為0.871～0.961。見圖3、4。

3 討論

卵巢癌是來源于生殖系統的惡性腫瘤，由于臨床上缺乏早期特異性檢查診斷方法，患者確診時往往處于中晚期，預后極差[8]。作為金標準的病理活檢由于有創且不適用于早期患者，因此臨床應用受到一定限制。學者們也一直在探索更為優良的無創血清學指標來指導臨床診斷及預后[9]。Galectin-3是作為一種β-糖苷結合凝集素，廣泛表達于上皮及免疫細胞表面，同時也在多種腫瘤細胞中高度表達，與腫瘤細胞生長、運動、侵襲及轉移高度相關[10]。但是，Galectin-3在卵巢癌中的表達情況及其臨床價值的相關研究還較為匱乏。因此，研究通過檢測卵巢癌患者血清Galectin-3水平，并聯合經典卵巢癌標志物CA125及HE4分析了Galectin-3用于卵巢癌診斷的臨床價值。

圖1 不同臨床分期及遠處轉移情況的卵巢癌患者血清Galectin-3水平

圖2 血清Galectin-3與CA125、HE4、年齡及BMI的相關性分析

圖3 Galectin-3、HE4及CA125單獨用于診斷卵巢癌的ROC曲線

圖4 Galectin-3、HE4及CA125聯合用于診斷卵巢癌的ROC曲線

本研究基于較大樣本的初治卵巢癌患者隊列分析顯示，卵巢癌患者血清Galectin-3水平顯著高于良性卵巢腫瘤患者及健康女性，而且Galectin-3水平與卵巢癌臨床分期及遠處轉移顯著相關。Min等[11]的研究納入了129例卵巢癌患者，結果顯示，59.7%的患者均存在Galectin-3的表達升高，而且Galectin-3的高表達與臨床分期及不良預后相關。Serizawa等[12]的研究顯示，Galectin-3可通過激活RhoA GTP酶及肌球蛋白輕鏈2的磷酸化來調節HCC細胞的侵襲，這種機制是否也存在于其對卵巢癌的調節中也值得深入探討。靶向Galectin-3的治療可在一定程度上抑制卵巢癌的增殖及轉移，驗證了Galectin-3在卵巢癌中的重要調節作用。Mirandola等[13]在研究中使用了內源性Galectin-3拮抗劑(Galetic-3C)治療卵巢癌細胞株及來自患者的原始癌細胞，結果顯示Galetic-3C可以顯著降低癌細胞的生長、運動、侵襲及促血管生成能力，提示了Galectin-3是卵巢癌這些功能的重要調節因子。

我們也通過聯合血清CA125、HE4的方式，分析了Galectin-3用于卵巢癌診斷的臨床價值。結果顯示，血清Galectin-3與CA125及HE4水平呈顯著正相關，Galectin-3單獨診斷卵巢癌的價值(AUC=0.861)與CA125(AUC=0.844)及HE4(AUC=0.871)相近，Galectin-3聯合CA125及HE4時可獲得最佳的診斷價值(AUC=0.916)。CA125及HE4是目前臨床上應用較為廣泛且得到公認的卵巢癌診斷及預后血清指標，Galectin-3與兩者的相關性也提示其具有卵巢診斷及預后價值。同時，我們的研究也通過ROC分析進一步驗證了Galectin-3的診斷卵巢癌的效能。Kim等[14]的研究中納入了71例卵巢癌患者，免疫組化結果顯示，Galectin-3在88.7%(63/71)的患者標本中存在表達升高，而在健康對照的卵巢組織中表達并無升高。Galectin-3表達的升高還與更短的無病生存率相關(P=0.039)。此外，Lee等[15]研究也顯示，卵巢癌患者原位癌組織中Galectin-3存在顯著表達升高，而且不同的病理分型也存在一定差異，其中透明細胞癌、漿液性腺癌及粘液性腺癌中Galectin-3的表達更高。這些研究與我們的結果相似，均提示了Galectin-3作為卵巢癌診斷及預后標志物的潛在臨床價值。

本研究檢測了卵巢癌患者血清Galectin-3水平，并探討了Galectin-3單獨或聯合CA125及HE4診斷卵巢癌的臨床價值。血清Galectin-3水平在卵巢癌患者中顯著升高，且其單獨或聯合其他指標診斷卵巢癌的價值較高，可能作為臨床候選指標。然而本研究也存在一定的不足，如缺少Galectin-3對患者預后影響的觀察分析。在下步的研究中還需對Galectin-3用于卵巢癌診斷及預后的價值進行更深入的探討，以求為更準確的臨床診斷及預后提供參考。

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The serum levels of Galectin-3 in patients with ovarian cancer and its clinical diagnostic value

MAGuoqing,LANLing,LIYan.

DepartmentofObstetricsandGynecology,TraditionalChineseMedicineHospitalofTongnanDistrict,Chongqing401121,China

Objective To investigate the serum levels of Galectin-3 and its clinical diagnostic value in patients with primary ovarian cancer.Methods A total of 92 patients with ovarian cancer who were treated from June 2010 to December 2015 were enrolled in the study as observation group, moreover, benign ovarian tumor group (n=44)andcontrolgroup(43healthysubjects)weresetup.Thegeneralconditionsofpatientswererecordedintheirfirstvisiting,andtheserumlevelsofCA125,HE4andGalectin-3weredetected.MoreoverthecorrelationbetweenGalectin-3andclinicalparameterswasanalyzed.TheROCcurvewasusedtoevaluatethediagnositcvalveofGalectin-3inovariancancer.Results The serum levels of Galectin-3 in observation group [(1.64±0.68)ng/ml] were significantly higher than those in benign ovarian tumor group [(0.86±0.42)ng/ml] and control group [0.69±0.20)ng/ml],and the serum levels of Galectin-3 were even higher in patients with higher clinical stage and with distant metastases. In observation group, Galectin-3 was positively correlated to CA125 (r=0.431,P<0.01),HE4 (r=0.331,P<0.01)andclinicalstages(RS=0.431,P<0.01).TheAUCofGalectin-3insingleindexdiagnosisgroupwas0.861 (95%CI:0.804～0.918),however,whichincombinationdiagnosisofGalectin-3withHE4andCA125was0.916 (95%CI: 0.871～0.961).Conclusion The serum levels of Galectin-3 are obviously increased in patients with ovarian cancer,moreover,which are closely correlated with clinical stages.The combination diagnosis of Galectin-3 with CA125 and HE4 can enhance diagnostic efficacy for ovarian cancer.

ovarian cancer；galectin-3；human epididymis protein 4；carbohydrate antigen 125；diganosis

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.02.005

401121 重慶市潼南區中醫院婦產科

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1002-7386(2017)02-0182-04

2016-07-18)