CK19、P53在甲狀腺癌中的表達(dá)及其臨床意義

張偉華+閆斌+劉可心

【關(guān)鍵詞】 甲狀腺癌；甲狀腺癌旁；CK19；P53；病理組織；臨床意義

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.01.033

甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的腫瘤， 占頭頸部惡性腫瘤的5.11% ， 占所有惡性腫瘤的 3.00% ， 占癌癥死亡的0.20% [1]。近些年， 甲狀腺癌（thyroid cancer， TC）在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率逐年升高， 馮紅芳等[2]報(bào)道從2008～2013年， 甲狀腺癌發(fā)病率顯著增加， 尤以甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid cancer， PTC）增加了4.09%， 女性患者是男性的3.75倍。乳頭狀腺癌是甲狀腺癌最為常見的一種類型 ， 占甲狀腺癌的60%～70%， 與其他類型相比乳頭狀癌的惡性程度較低， 發(fā)展相對(duì)緩慢， 從發(fā)現(xiàn)腫塊到手術(shù)確診， 5年以上存活率大約達(dá)到30%左右， 生存率最長可達(dá)20年左右。腫瘤常單發(fā)， 原發(fā)灶大多較小 [3-5]。頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶率較高、出現(xiàn)早、范圍廣， 但是發(fā)展較為緩慢[6]。甲狀腺癌組織學(xué)上有四種主要類型：乳頭狀癌、濾泡癌、髓樣癌、未分化癌。本次實(shí)驗(yàn)中同樣乳頭狀癌（95.1%）最多見， 與其他地區(qū)的報(bào)道相近[7]；髓樣癌、未分化癌低于其他地區(qū)的報(bào)道。由于頸部超聲配合超聲下甲狀腺穿刺細(xì)胞學(xué)檢查提高了甲狀腺癌的檢出率， 特別是微小癌的檢出率[8]。甲狀腺癌的組織學(xué)分型除與預(yù)后關(guān)系相當(dāng)密切外， 與腫瘤的其他生物學(xué)行為的關(guān)系也較其他器官明顯得多。因此， 遇到一個(gè)甲狀腺腫瘤， 做好良惡性的判斷、組織學(xué)分類、預(yù)后的判斷顯得尤為重要。

1 材料與方法

1. 1 標(biāo)本來源 病理標(biāo)本來自2014年1月～2015年12月吉林省四平市中心醫(yī)院普外科行手術(shù)且病理證實(shí)的102例甲狀腺癌患者， 包括甲狀腺乳頭狀癌病理組織標(biāo)本97例、甲狀腺髓樣癌3例， 甲狀腺混合性癌（濾泡癌、乳頭狀癌）1例， 甲狀腺鱗狀細(xì)胞癌1例， 術(shù)前患者均未行放化療。甲狀腺癌病理組織標(biāo)本中男 18例， 女84例， 男女比例1：4.7， 年齡 23～68歲， 36～55歲為發(fā)病高峰。病理組織標(biāo)本取材包括腫瘤原發(fā)灶及周邊組織， 同時(shí)避開鈣化區(qū)及壞死區(qū)。

1. 2 試劑 細(xì)胞角質(zhì)白19（CK19）兔抗人抗體購自于福州邁新生物科技公司、兔抗人P53購自于北京中杉金橋生物科技有限公司、SP法免疫組織化學(xué)試劑盒購自于北京中杉金橋物科技有限責(zé)任公司、枸櫞酸鈉抗原修復(fù)液及聯(lián)苯二胺（DAB）顯色劑購自于中國福州邁新生物科技公司。

1. 3 免疫組織化學(xué)技術(shù)CK19、P53在甲狀腺癌中的陽性表達(dá) 具體步驟按照試劑盒的操作說明進(jìn)行， 組織切片置于顯微鏡下進(jìn)行觀察， 抗原陽性表達(dá)為細(xì)胞胞漿中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的顆粒；評(píng)價(jià)依據(jù)陽性表達(dá)細(xì)胞的染色強(qiáng)度和百分比分別計(jì)分， 然后相加得到總積分。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。 P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用靈敏度、特異度和診斷符合率來評(píng)價(jià)CK19、P53診斷甲狀腺癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的價(jià)值。

2 結(jié)果

2. 1 CK19、P53 陽性表達(dá)為細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒。CK19在 102例甲狀腺癌組織中陽性表達(dá)的例數(shù)102例， 陽性率為 100.0%；在癌旁正常甲狀腺組織中陽性表達(dá)的例數(shù)為36例， 陽性率為35.3%， 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。P53在102例甲狀腺癌組織中陽性表達(dá)的例數(shù)為 73例， 陽性率為 71.6% ；在癌旁正常甲狀腺組織中的陽性表達(dá)例數(shù)為28例， 陽性率為27.5%， 比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。在甲狀腺良惡性疾病中CK19鑒別診斷的靈敏度為100.0%、特異度為64.7%、診斷符合率為82.4%；P53陽性表達(dá)的靈敏度為 71.6%、特異度為72.5%、診斷符合率為 72.1%。見表1。

2. 2 102例甲狀腺癌組織中有26例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移， 其中有18例

P53陽性表達(dá)， 陽性表達(dá)率69.2%；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移P53陽性例數(shù)為27例， 陽性率為35.5%， 甲狀腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的組織中P53陽性明顯高于未轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌陽性表達(dá)， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

隨著甲狀腺癌的發(fā)病率增高， 病理醫(yī)生的診斷水平也在逐步提升， 但是對(duì)于濾泡上皮排列較為特殊以及極為微小癌的診斷， 臨床診斷還較為困難。CK19是由上皮細(xì)胞所分泌的一種糖蛋白 ， 主要標(biāo)記各種單層上皮包括腺上皮， 主要用于腺癌的診斷。對(duì)于甲狀腺乳頭狀癌與濾泡癌、濾泡性腺瘤以及良性增生性濾泡的鑒別中具有重要價(jià)值[9， 10]。CK免疫組化染色時(shí)常常在切片上出現(xiàn)斑點(diǎn)狀假陽性反應(yīng)， 李鵬飛等[11]研究發(fā)現(xiàn) ， 在甲狀腺乳頭狀癌中存在 CK19 彌漫性陽性表達(dá) ， 主要定位于細(xì)胞質(zhì) ， 陽性率達(dá)到95%， 在甲狀腺良性病變或正常甲狀腺組織中陽性表達(dá)占8.5%。因此， CK19在甲狀腺癌中表達(dá)呈強(qiáng)陽性， 但在甲狀腺良性或者正常組織中多呈現(xiàn)彌漫性或者灶性 ， 且陽性較弱。本實(shí)驗(yàn)中 ， CK19 在甲狀腺癌中的陽性表達(dá)率為 100.0%， 并且多呈強(qiáng)陽性， 而在癌旁正常甲狀腺中的陽性表達(dá)率為35.3%， 對(duì)于良惡性病變的診斷敏感度和特異度分別為100.0% 和 64.7%， 特異度并不非常理想 ， 與佟杰等[12]報(bào)道接近。但CK19 的強(qiáng)陽性表達(dá)對(duì)于提高臨床診斷準(zhǔn)確率有一定的參考價(jià)值。

P53蛋白是P53基因編碼分子量為53KD的核磷酸蛋白， 野生型P53基因功能與細(xì)胞分化、DNA合成修復(fù)以及細(xì)胞程序性死亡有關(guān)， 是一種抑癌基因。P53基因異常， 表現(xiàn)為野生型P53的缺乏， 突變型P53擴(kuò)增， 是人體惡性腫瘤中常見的基因改變[13]。P53作為細(xì)胞周期G1-S期檢查點(diǎn)控制因子參與細(xì)胞周期調(diào)控， P53基因的異常與腫瘤的惡性行為及不良預(yù)后有關(guān)[14-20]。李田軍等[17]對(duì)甲狀腺腫瘤研究發(fā)現(xiàn)P53的突變是甲狀腺腫瘤發(fā)生中的晚期事件， 其存在常提示預(yù)后不良。本實(shí)驗(yàn)中， P53在甲狀腺癌中的陽性表達(dá)率是71.6%， 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率是69.2%， 提示 P53 基因突變可能參與了甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展， 并與甲狀腺癌的進(jìn)展、侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

綜上所述， CK19、P53 在甲狀腺癌及癌旁正常甲狀腺組織中的陽性表達(dá)明顯增強(qiáng)， 是甲狀腺良惡性腫瘤診斷、鑒別診斷的重要輔助指標(biāo)， 對(duì)預(yù)后的評(píng)估有一定的參考。

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