胸水P53抗體聯合CEA檢測在癌性胸水診斷中的價值

文智能 李霞

胸水P53抗體聯合CEA檢測在癌性胸水診斷中的價值

文智能1李霞2

目的 測定胸水的P53抗體、癌胚抗原(Cancer embryo antigen，CEA), 分析對良惡性胸水的鑒別意義。方法 采用酶聯免疫吸附法來測定80例癌性胸水、50例良性胸水的P53抗體及CEA進行比較。結果 P53抗體在癌性胸水與良性胸水濃度分別為(20.151±5.002)IU/mL、(1.086±2.836)IU/mL，差異有統計學意義(P<0.05)；CEA濃度分別為(1001.06±220.08)μg/L、(60.54±10.51)μg/L，差異同樣有統計學意義(P<0.01)。胸水中P53抗體測定聯合CEA測定在癌性胸水診斷特異度為91.3% ，敏感度為90% 。結論 胸水P53抗體可作為獨立癌性胸水生物標記物, 聯合CEA測定更有利于提高癌性胸水的診斷水平。

P53抗體；癌胚抗原；肺癌

腫瘤是多種抑癌基因、癌基因共同作用的多步驟的復雜演變過程。目前有研究資料顯示P53基因突變與人類多種腫瘤的發生有關[1]。早期肺癌就會出現p53基因的突變，因此肺癌在早期便可采用此方法診斷[2]。有研究表明50%-70%的肺癌患者有P53基因改變[3]。P53基因突變可引起表達產物P53蛋白空間構象的改變, 延長了生物半衰期，導致在細胞內囤積明顯, 故而促使相應的P53 抗體的產生。癌胚抗原(CEA)是一種重要的腫瘤標志物，它通常被用于臨床診斷惡性腫瘤的輔助指標。本文就測定良惡性胸水P53 抗體及CEA水平，分析在胸水中的表達情況。

資料與方法

一、研究對象

本文收集廣西醫科大學第四附屬醫院2000年1月至2015年12月胸腔積液住院患者，且均征求患者同意。癌性胸水組:女27例，男53例, 共80例， 平均年齡57.8歲。均據胸水脫落細胞學、組織病理學檢查確診。結核性胸水組：女18例，男32例, 共50例, 平均年齡48.2歲。據影像學、臨床、胸水病原學培養、胸膜活檢以及抗結核治療隨診有效確診。

二、標本收集

將加有肝素抗凝劑的無菌試管收集胸水標本,離心后則取2-3mL， 最后保存在- 70℃環境中, 等待檢測。

三、測定方法

采用德國IBL公司P53-Autoantibodies 酶聯免疫吸附反應試劑盒作為試劑來測定P53抗體。采用Bayer公司癌胚抗原試劑盒測定CEA，用ELISA方法檢測。

四、統計學方法

以SPSS13.0軟件包進行t檢驗。據胸水CEA蛋白、p53抗體測定情況，分別將良性胸水組50例、癌性胸水組80例進行分析比較，分段求出不同的臨界點的特異性和敏感性，根據兩者的相互關系制成受試者工作特性曲線(receiver operator characteristic curve，ROC曲線)，據曲線特征來選用特異性、敏感性較高的臨界點作為正常的參考值。

結 果

一、胸水p53抗體、CEA在兩組病人的比較分析，提示在癌性胸水(惡性胸水)p53抗體和CEA平均水平均要明顯高于結核性胸水(良性胸水)者，經過統計學t檢驗，癌性胸水(惡性胸水)與結核性胸水(良性胸水)p53抗體、CEA測定值的差異均有統計學意義，p53抗體(P<0.05)，CEA (P<0.01)。(見表1)。

表1 不同胸水中CEA、p53抗體水平的比較

二、本實驗CEA、p53抗體在單獨測定及聯合測定癌性胸水診斷的特異性、敏感性進行評價。根據最佳臨界點(CEA<200ug/L，p53抗體< 7IU/mL)。結果兩者聯合測定特異性、敏感性均較高，達91.3%、90% ，明顯高于單一測定。(見表2)。

表2 p53抗體、CEA單獨或聯合檢測診斷癌性胸水的敏感性和特異性(%)

討 論

胸腔積液病因診斷有一定困難，或有創性(如內科胸腔鏡)或陽性率太低[4]。目前已知, P53有致癌、抑癌作用, 主要取決生物學上功能情況。p53基因突變在多種腫瘤中均較常見，突變區域通常在進化保守區中的第5-8外顯子[5]。野生型p53蛋白對細胞由G1期進入S期的轉變有著重要作用，起著調控細胞增殖作用[6]。野生型的P53基因有著多種重要功能，但突變型P53基因不僅干擾野生型P53的功能而且失去了原有的生物學功能(如抑癌功能)，在體內或體外形成突變P53 /野生聚合物，從而野生型P53喪失抗逆轉、增殖、抑癌作用,加快腫瘤的發生、發展[7]。突變型P53蛋白在細胞中的半衰期較短, 容易水解, 故用突變型P53蛋白作為檢測方法在臨床上對腫瘤的早期診斷有一定困難。Winter[8]等報道有30%-40% 的突變蛋白可以使機體產生特異性P53 抗體。故測定P53抗體可間接反映機體P53蛋白進而了解有無基因突變。有研究表明據ELISA 法建立了針對P53 蛋白的相應抗體的測定方法, 并在臨床上用來測定血清中的P53抗體取得成功[9]。郭品娥等[10]對各種腫瘤患者共240例的血清，進行P53抗體測定, 發現陽性率為22%-36%。本文已測定胸水標本中P53抗體,發現惡性(癌性)胸水P53抗體平均水平高于良性(結核性)胸水，特異度為88%，敏感度為60.5%，說明胸水P53抗體可考慮為獨立的癌性胸水生物標記物之一。P53抗體對機體抗體活性無影響，可以在-80℃長期保存。較好的穩定性便于臨床應用。

有報道胸水CEA為鑒別良惡性胸水中最有價值的腫瘤標志物[11]。Park等人[12]比較了68例良性胸水、67例惡性胸水患者CEA濃度，提出胸水中CEA濃度檢測對惡性胸水患者準確度達93.4%，明顯優于其他腫瘤標志物。本文測定結果發現惡性胸水CEA平均水平高于良性胸水，特異度為90%，敏感度為79.1%，也符合CEA在良惡性胸水的鑒別上具有重要的臨床意義。另本文發現，在良惡性胸水的鑒別診斷上，聯合胸水p53抗體、CEA的檢測其特異度、敏感度均高于單獨測定，因此聯合測定互補了單一指標的不足, 對提高癌性胸水的診斷率有重要的臨床意義。綜上，建議對臨床上高度懷疑惡性胸水，但胸膜組織病理學、胸水細胞學檢查均為陰性者，應聯合胸水p53抗體、CEA測定，以減少惡性胸水漏診率，提高其檢出率，早期有效治療。

[1] Ecke TH，Schlechte HH，Schiemenz K，et al．TP53 gene mutations in prostate cancer progression[J]．Anticancer Res，2010,30(5)：1579-1586.

[2] 張向群．肺癌與血清P53抗體關系的研究進展[J]. 中國急救復蘇與災害醫學雜志，2008，3(1):60-62.

[3] Lee S O，Andey T，Jin UH，et al．The nuclear receptor TR3 regulates mTORCl signaling in lung cancer cells ex pressing wild-type p53[J]．Oncogene，2012， 31(27)：3265-3276．

[4] Maskell NA, Butland RJ, Pleuml Diseases Group.Standards of Care Committee，British Thoracic Society．BTS guidelines for the investigation of a unilateral pleural effusion in adults [J]．Thorax，2003，58(2)：8-17.

[5] Soussi T，Lozano G. P53 mutatiun heterogeneity in cancer [J]．Bioehem Biophys Res Commun，2005，331(3)：834-842.

[6] Otsuki T，Kanno T，Fujita Y，et al. A3 adenosine receptor-mediated p53-dependent apoptosis in Lu-65 human lung cancer cells[J]．Cell Physiol Biochem，2012，30(1)：210-220.

[7] 馬軍莉，胡云衢，蒲志賢. P53在非小細胞肺癌中表達的研究現狀[J].醫學綜述，2010，16(22)：3399-3402.

[8] Winter SF, Minna JD, Johnson BE,et al. Development of antibodies against P53 in lung cancer patients appears to be dependent on the tpye of P53 mutation[J]. Cancer Res, 1992, 52(15): 4168-4174.

[9] Lubin R, Schlichtholz B, Teillaud JL,et al. P53 antibodies in patients with various types of cancer: assay, identification,and characterization[J]. Clin Cancer Res, 1995,1(12): 1463-1469.

[10] 郭品娥,沈茜,關月琴.檢測抗P53蛋白抗體ABC-ELISA 法的建立和初步臨床應用[J]. 第二軍醫大學學報, 2000, 21(1): 53-55.

[11] Wang X F, Wu YH, Wang MS, et al. CEA, AFP, CA125,CA153 and CA199 in malignant pleural effusions predict the cause[J]. Asian Pac J Cancer Prev,2014,15(1):363-368.

[12] Park DS，Hwang KE，Shim H，et al．Elevated survivin is associated with a poor response to chemotherapy and reduced survival in lung cancer with malignant pleural effusions[J]．Clin Exp Metastasis．2012．29(2)：83-89．

Diagnostic value of pleural effusion P53 antibody combined with CEA in the diagnosis of malignant pleural effusion

WENZhi-neng,LIXia.

DepartmentofRespiratoryMedicine,theFourthAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Liuzhou,Guangxi545005,China

Objective To investigate the clinical significance of differential diagnosis of benign and malignant pleural effusion by detecting P53 antibody and CEA in patients with pleural effusion. Methods P53 antibodies and CEA in 80 cases of malignant pleural effusion and 50 cases of benign pleural effusion were detected by enzyme linked immunosorbent assay. Results P53 in malignant pleural effusion and benign hydrothorax antibody concentration were respectively (20.151±500.2) IU/mL and (1.086±283.6) IU/mL (P<0.05). CEA concentration were respectively (1001.06±22008) g/L and (60.54±10.51) g/L (P<0.01). The diagnostic specificity of pleural effusion P53 antibody and CEA was 91.3%, and the sensitivity was 90%. Conclusion P53 antibody is an independent tumor marker of pleural effusion, and the combined detection of CEA is helpful to improve the diagnostic level of malignant pleural effusion.

P53 antibody; CEA; lung cancer

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.04.012

1. 545005 廣西 柳州，廣西醫科大學第四附屬醫院呼吸與危重癥醫學科一病區2. 545005 廣西 柳州，廣西腦科醫院

2016-08-15]