注射用炎琥寧有關物質檢查方法研究

張慶昆

摘 要：目的：建立注射用炎琥寧有關物質的檢查方法。方法：采用高效液相色譜（HPLC）法研究注射用炎琥寧中有關物質的含量；色譜柱條件為ODS HYPERSIL-C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm），以0.05%的磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調節pH值在2.50±0.05范圍內）-甲醇（330∶650）作為流動相；在251nm的波長下進行檢測；設定流速為1.0mL/min。結果：注射用炎琥寧與各已知雜質及其他講解產物可明顯的分離開，且系統適用性良好，表明該法用于注射用炎琥寧有關物質的測定是可行的。結論：該法在對炎琥寧有關物質的檢查上簡便操作，專屬性強，靈敏度較高，結果準確可靠，重現性好，可用于注射用炎琥寧有關物質含量的檢查。

關鍵詞：炎琥寧；有關物質；檢查方法

高效液相色譜法1985年被《中國藥典》收錄，是藥物分析中常用的一種檢測分析方法，其以均勻規則的顆粒（通常直徑在10μm以下）作為固定相，以流動相作為載體通過高壓輸液泵輸送，利用不同組分被流動相攜帶時對應的移動的速度不同，而將各組分進行分離和檢測。注射用炎琥寧是將穿心蓮內酯從草本植物穿心蓮中提取出來，經部分合成后制成穿心蓮內酯半酯單鉀鹽，該成分生物活性較高，投加適量的輔料后制成的凍干制劑，該藥為抗病毒藥，可增強機體的抗菌的能力，清熱解毒、鎮靜消炎作用明顯，臨床上主要用于病毒性肺炎、扁桃體炎、病毒性上呼吸道感染、急性細菌性痢疾等癥狀的抗病毒治療[1]。雜質的存在給藥物的實際療效和穩定性帶來了影響，甚至危害人體健康，造成藥物的不良反應。筆者通過高效液相色譜法（HPLC）對該藥品中的有關物質進行檢查，對注射用炎琥寧的產品質量進行有效的控制。現做如下報道：

1.儀器與試藥

1.1 儀器

安捷倫1260 Infinity液相色譜系統（自動進樣器，并具有動態載樣和清洗功能），安裝了安捷倫實驗室顧問軟件，配套全新光學設計的UV檢測器、ODS HYPERSIL-C18色譜柱；

1.2 試劑與藥品

注射用炎琥寧（哈爾濱珍寶制藥有限公司；樣品批號：20160107、20160108、20160109）及其對照品（批號1503208，純度為99.5%）；試驗用水為超純水，甲醇為色譜純，其余所用分析試劑均為分析純。

2.實驗方法與結果

2.1色譜條件[2]

CAPCELL PAK UG80-C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm），以1.0mL/min的穩定速度作為流動相0.05%的磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調節pH值在2.50±0.05范圍內）-甲醇（330∶650）的流速，甲醇（深圳市科天化玻儀器有限公司，色譜純）；25℃柱溫下，以20μL作為每批進樣量，在251nm波長下進行檢測。

2.2儲備液的制備

2.2.1制備供試品儲備液

精密稱取100mg注射用炎琥寧放至500mL容量瓶中，用流動相0.05%的磷酸二氫鉀溶液-甲醇（330∶650）將其全部溶解并稀釋至對應刻度定容，搖勻后得到1mL溶液中含0.20mg注射用炎琥寧的溶液作為供試品儲備溶液。

2.2.2制備對照品溶液

精密量取供試品溶液5mL，至500mL容量瓶中，加入上述流動相稀釋至對應刻度，搖勻后作為對照品溶液。

2.3線性關系及精密度試驗[3]

將對照品減壓干燥12h，獲得脫水的穿心蓮內酯琥珀酸半酯對照品，精密稱定適量該對照品，按2.2.1方法進行稀釋，分別制成濃度為20、40、80、100、200、300mg/L的對照品溶液品，將以上不同濃度的對照品溶液在“2.1”條件下分別抽取20μL進樣，將濃度與其對應的峰面積進行線性回歸計算，得出方程：A=0.0874X+0.4034（r=0.99999，n=9），20～300μg/mL范圍內穿心蓮內酯琥珀酸半酯濃度與對應的峰面積線性關系良好。精密量取在“線性關系”內同一濃度的對照品溶液，在上述色譜條件下連續進樣6次，每次進樣20μL，記錄峰面積，RSD為0.19%，表明精密度良好，詳見表1。

2.4樣品有關含量測定及限度[4]

在3批供試品儲備液中各選取3支共9個樣品，稀釋為80mg/L的供試品溶液，同樣在“2.1”的指定條件下進樣20μL，根據對應的峰面積，帶入線性回歸方程得出分析結果，詳見表2。

2.5重復性試驗

取單批次（批號20160108）注射用炎琥寧供試品儲儲備液，按以上方法，單獨測定6份，每份注射用炎琥寧含量（%）分別為98.07、98.18、97.04、98.15、97.26、97.23，平均97.66mg/g，RSD為0.58%，有良好的重復性。

2.6穩定性試驗[5]

取線性關系下的注射用炎琥寧供試品溶液，用流動相稀釋成高、中、低（100，10，1.0mg/L）3個濃度，陰涼條件下保存，在0～8h內，每隔2h液相色譜儀進樣分析，以峰面積變化考察樣品穩定性，RSD為0.45%。說明本品在8h內穩定較好。

3.討論

有關文獻提供線索指出以醋酸鹽-乙腈系統、乙腈-0.01mol/L磷酸鹽系統為流動相時，檢測所得峰會受到其他雜峰干擾，分離效果不盡如人意，根據不斷的實驗調整，選取0.05%的磷酸二氫鉀溶液（pH 2.50±0.05）-甲醇（330∶650）為流動相，峰形有良好的對稱性且與其他峰形明顯分開[6-8]。

本次檢測結果顯示，高效液相色譜法在測定注射用炎琥寧含量的領域很有可行性，通過多次比較試驗，優化了部分檢測方法，提高其質量檢驗的準確度，通過對實驗數據的分析，該方法在控制藥品質量方面很有幫助，且對樣品檢測條件無特殊要求要求，儀器及操作條件很容易滿足，操作方便，且有良好的重現性和專屬性[9-10]。本實驗方法研究可作為注射用炎琥寧含量的檢驗的參考，并期待隨著技力量平和科技水平的不斷發展，該方法能有進一步的突破，為人類創造更好的經濟、社會效益。

參考文獻

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