不育抗體檢測結果分析

楊麗　李尚為　楊業洲

摘要：目的 了解抗精子抗體（Anti-sperm antibody， ASAb）、抗子宮內膜抗體（Anti-endomertrial antibody， EMAb）、抗心磷脂抗體（Anti -cardiolioin antibody， ACAb）在不孕不育患者中的陽性率。方法 將11984例樣本用酶聯免疫吸附實驗（enzyme-linked immunosorbent assay ， ELISA）法進行檢測。結果 男性ASAb陽性率11.13%，女性ASAb陽性率10.97%，EMAb陽性率6.47%，ACAb陽性率7.22%，三種抗體中的任意兩種抗體陽性率4.36%，三種抗體陽性率3.49%。結論 ASAb、EMAb、ACAb在不孕不育患者中的陽性率高，可能是導致患者不孕不育的重要因素之一。

關鍵詞：不孕不育，抗精子抗體，內膜抗體，心磷脂抗體

不孕不育患者越來越多，其中不明原因的不孕不育約占50%，而不明原因中以免疫因素為主[1]。現代免疫學認為抗精子抗體、抗子宮內膜抗體、抗心磷脂抗體與不孕不育關系密切。現就本中心2015年全年檢測的不育抗體結果進行分析，以了解不育抗體在不孕不育患者中的發病率及為臨床的診療提供一定的理論依據。

1資料與方法

1.1一般資料 將2015年1月～2015年12月在本中心檢測的不育抗體結果進行分析，共11984例。其中男性3558例，年齡20～60歲，平均年齡32.4歲；女性8426例，年齡18～54歲，平均年齡34.6歲。

1.2儀器與試劑

1.2.1儀器 低速離心機、恒溫水浴箱、全自動洗板機、酶標儀。

1.2.2試劑 抗精子抗體檢測試劑盒、抗內膜抗體試劑盒、抗心磷脂抗體試劑盒（均為南京欣迪有限公司提供）。

1.3檢測方法

1.3.1標本采集 檢測者靜坐5 min后，抽取2 ml靜脈血于紅頭管內（女性受檢者避開月經期），靜置30 min后，3000rpm離心5 min，吸出血清放置-20℃冰箱保存（1 w內進行檢測）。男性僅檢測抗精子抗體，女性進行抗精子抗體、內膜抗體和心磷脂抗體的檢測。

1.3.2實驗方法 三種抗體的檢測均采用ELISA法，96孔板每板均設置空白、陽性對照、陰性對照、實驗室陽性及實驗室陰性對照。各孔加100 μl樣本稀釋液，5 μl樣本充分混勻后37℃孵育40 min，洗板4次，1min/次；拍干后分別加入二抗，37℃孵育30 min，洗板4次，1min/次，拍干后進行顯色各加入顯色液A一滴，B一滴，終止液一滴，避光顯色10 min后在450 nm波長處讀取吸光值；根據公式計算結果，所有實驗質控都在控。

2結果

2015年全年不育抗體檢測結果，男性3558例，抗精子抗體陽性396例，陽性率11.13%。女性8426例，抗精子抗體陽性924例，陽性率10.97%；內膜抗體陽性545例，陽性率6.47%；心磷脂抗體陽性609例，陽性率7.22%；其中三種抗體中的任意兩項為陽性者367例，占女性受檢者的4.36%；三項均為陽性者294例，占女性受檢者的3.49%。

3討論

近年來不孕不育成為研究的熱點，免疫因素引起的不明原因的不育受到大家的重視。抗精子抗體是免疫因素的一個重要方面，它可存在于血液和淋巴系統或者局部的分泌物中，如精液、宮頸粘液等。正常情況下，精子不會引起自身免疫反應，不會有抗精子抗體的產生，當男性的血睪屏障被破壞如生殖道梗阻、手術、外傷、炎癥等可使機體產生抗體[2]。女性產生抗精子抗體的途徑包括生殖道粘膜損傷、生殖道感染等。有研究表明ASAb的產生會影響男性精液的質量，ASAb陽性率越高精子的密度、活力越低[3]。ASAb還可影響精子穿透卵子的透明帶，從而影響受精率，導致不孕不育[4]。ASAb對IVF的成功率也有一定的影響，有報道表明ASAb對IVF的受精率、優胚率及移植率均有影響[5]。可見ASAb不僅會降低男性精子的密度和活力，同時女性體內的ASAb可影響精子和卵子的結合，阻礙受精卵的形成，導致不孕不育的發生。

EMAb是一種自身抗體，是針對子宮內膜腺上皮細胞中的孕激素依賴蛋白產生的抗體，正常位置的子宮內膜對機體無抗原性，但異常位置的子宮內膜可以作為抗原激活機體的免疫系統，產生抗體，激活補體，使局部發生病理變化，甚至直接影響子宮內膜的功能。有研究表明子宮內膜異位癥（EMS）的EMAb陽性率明顯高于正常對照組，在不孕婦女和流產婦女中也有較高的陽性率[6]。EMAb陽性提示子宮內膜功能可能受損，這會影響受精卵的著床，甚至導致已著床發育的胚胎沒有很好的支持條件而流產。EMAb在對EMS中也是高表達，對EMS的診斷有很好的提示作用。

ACAb是一種可以與多種富含磷脂結構的抗原物質發生反應的自身免疫性抗體。有報道[7]表明ACAb與自然流產、復發性流產、宮內死胎、宮內發育遲緩、不孕等疾病相關。ACAb可能是通過與卵巢、精子、子宮內膜的磷脂成分結合，從而干擾了卵子的形成和排除，影響精子的活力，影響受精卵的著床，導致不孕不育的發生[8]。ACAb作用于滋養層細胞表面依賴性抗原，影響絨毛膜粘附、分化和細胞滋養層的浸潤，從而影響受精卵的著床。ACAb可影響精子的活力、卵子的成熟、受精卵的著床，還與流產有關，是影響不孕、流產和胎停的重要因素，目前我院產科已將ACAb檢測作為產科建卡的常規檢測指標。ACAb還與血栓的形成、結締組織病、缺血性中風、腎臟病等有關[9]。

目前各文獻所報道的不育抗體陽性率差別很大，主要是各檢測實驗室所采用的方法和試劑盒不一所致，暫時還沒有檢測的金標準。不育抗體越來越受到臨床的重視，但由于檢測方法和試劑所包被的抗原不一致，所以各實驗室的結果不一致，影響臨床醫師的判斷和對疾病的診斷，所以對于不育抗體檢測的方法急需標準化。

本中心2015年男性ASAb陽性率11.13%，女性ASAb陽性率10.97%，EMAb陽性率6.47%，ACAb陽性率7.22%，任意兩種抗體陽性4.36%，三種抗體陽性率3.49%。各類抗體的陽性率還是比較高，對于孕前檢查、不孕不育、子宮內膜異位癥、IVF術前檢查等都應給予重視，陽性患者應給以治療后再進行下一步的診療，可提高疾病治愈成功率。

參考文獻：

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[3]姜天華.探討男性不育癥精液檢驗和血清中抗精子抗體的相關性[J].臨床醫學專集，2015：1563-1563.17（5）128-128.

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[5]Zini A，Lefebvre J，Kornitzer G，et al.Anti-sperm antibody levels are not related to fertilization or pregnancy rates after IVF or IVFICSI[J]. Journal of Reproductive Immunology，2011，88（1）：80-84.

[6]劉桂蘭，石晶，王芳芳，等.抗子宮內膜抗體與 CA125對于子宮內膜異位癥的診斷價值[J].航空航天醫學雜志，2014，25（2）：129-131.

[7] 黃越，王昕.中西醫治療抗心磷脂抗體陽性復發性流產概況[J].實用中醫內科雜志，2016，30（8）：108-109.

[8]李鳳中，陳波，黃永建.抗心磷脂抗體檢測在孕婦不良妊娠結局中的臨床意義[J].實驗與檢驗醫學，2014，32（1）：68-70.

[9]陳芯儀，陳月紅，孫瑞雪，等.694例抗心磷脂抗體陽性病例病因構成和臨床特點分析[J].血栓與止血學，2015，21（2）：65-69.

編輯/李樺