超敏C反應蛋白聯合中性粒細胞堿性磷酸酶檢測在小兒支原體肺炎中的診斷意義

羅標+梁結玲+江躍武+陳健發+溫成波

摘 要 目的：探討超敏C反應蛋白（hs-CRP）聯合中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）檢測在小兒支原體肺炎中的診斷意義。方法：選取支原體肺炎患兒60例作為觀察組，同期選取體檢中心健康兒童30例作為對照組，采用免疫熒光法檢測hs-CRP、改良快速偶氮偶聯法檢測NAP、ROC曲線分析上述指標診斷小兒支原體肺炎的效能。結果：觀察組患兒急性期和恢復期血清hs-CRP、NAP水平明顯高于對照組，且急性期患兒上述指標水平明顯高于恢復期（P<0.05）。在診斷支原體肺炎效能方面，NAP

關鍵詞 超敏C反應蛋白 中性粒細胞堿性磷酸酶 小兒支原體肺炎 診斷

中圖分類號：R725.1 文獻標識碼：B 文章編號：1006-1533（2017）03-0044-03

Value of the determination of high sensitivity C-reactive protein and neutrophil alkaline phosphatase in diagnosis of children with mycoplasma pneumonia

LUO Biao1*， LIANG Jieling1， JIANG Yuewu2， CHEN Jianfa1， WEN Chengbo1

（1. Clinical Laboratory， Chashan Hospital， Dongguan City， Dongguan 523380， China； 2. Department of Pediatrics， Chashan Hospital， Dongguan City， Dongguan 523380， China）

ABSTRACT Objective： To discuss the value of the determination of high sensitivity C-reactive protein （hs-CRP） and neutrophil alkaline phosphatase （NAP） in diagnosis of children with mycoplasma pneumonia. Methods： Sixty cases of children with mycoplasma pneumonia were selected as an observation group and meanwhile 30 healthy children as a control group. NAP and hs-CRP were determined by a modified fast azo coupling method and an immunofluorescence method， respectively. The efficiency of above indexes in diagnosis of mycoplasma pneumonia was analyzed by ROC curve. Results： The levels of serum hsCRP and NAP were significantly higher in the observation group than in the control group， and the above indexes were higher in acute stage than in recovery period （P<0.05）. The diagnostic efficiency was as follows： NAP

KEy WORDS hs-CRP； NAP； children mycoplasma pneumonia； diagnosis

小兒支原體肺炎是臨床上常見的一種呼吸系統疾病，由支原體侵襲肺部引起炎性病變所致，可導致發熱、厭食、持續劇烈咳嗽、畏寒、頭痛等癥狀，嚴重影響患兒的身體健康和發育[1]。目前，小兒支原體肺炎的治療關鍵在于及早發現、及早干預，其常見的檢查方法有病原體培養等，但由于時間長、操作復雜等，對小兒支原體肺炎的早期鑒別診斷存在局限性，故如何快速、準確地診斷該疾病具有重要的臨床意義[2]。對此，本研究通過聯合檢測血清超敏C反應蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）、中性粒細胞堿性磷酸酶（neutrophil alkaline phosphatase，NAP）水平，探討其對小兒支原體肺炎早期鑒別診斷的效能，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 臨床資料

選取2013年6月—2015年12月期間我院確診治療的支原體肺炎患兒60例作為觀察組，男42例，女18例，年齡1～12歲，平均年齡（5.79±2.17）歲，病程3～10 d，平均病程（4.21±1.26）d，同期選取體檢中心健康兒童30例作為對照組，男20例，女10例，年齡1～13歲，平均年齡（5.88±2.24）歲，本次研究已經我院倫理委員會審批且通過，兩組患者在性別、年齡等資料上比較無顯著差異（P>0.05），一般資料具有可比性。

1.1.2 納入和排除標準

納入標準：①觀察組患兒經臨床癥狀、病史、血常規、經喉頭負壓吸痰病原體培養、CT或超聲檢查等證實為支原體肺炎[3]；②年齡在0～16歲范圍內；③患者或其家屬簽署知情同意書。

排除標準：①伴有心、肝、腎等重要器官嚴重性疾病；②肺炎支原體IgM抗體檢測呈陰性；③有血液系統嚴重性疾病；④拒絕或中途退出參與本次研究者。

2 方法

所有研究對象入院后均進行常規血或痰培養、支原體IgM抗體等檢測（檢測試劑盒由西安聯爾公司提供）等基本檢查，同時給予早晨空腹處理，抽取左上臂靜脈血2 ml置入無菌EDTA抗凝試管中，將血液樣本平均分為2份，1份通過韓國i-CHROMATM Reader型定量免疫分析儀及其配套試劑盒采用通過免疫熒光法進行hsCRP檢測，試劑盒由杭州中翰盛泰醫療器械有限公司提供；1份采用改良快速偶氮偶聯法檢測NAP，即常規推制血片，新鮮血片固定用新鮮配制的95%乙醇固定10 min，蒸餾水沖洗待干后，用底物液（3% β甘油磷酸鈉5 ml，2%巴比妥鈉5 ml，蒸餾水10 ml，2% CaCl2 10 ml，2% MgSO4 1 ml）37 ℃下作用30 min，蒸餾水流水沖洗待干，用蘇木素復染1～2 min，蒸餾水沖洗待干后顯微鏡油鏡鏡檢，試劑盒由珠海貝索生物技術有限公司提供，上述操作均嚴格依據說明書相關規定進行。

2.1 指標觀察[4]

統計分析所有研究對象血清hs-CRP、NAP水平及二者診斷效能情況，其中hs-CRP>10 mg/L者為陽性，其余為陰性，NAP水平根據胞質內紅色沉淀物進行評估，即鏡檢細胞胞質呈現紫黑色或棕紅色顆粒為陽性細胞，并計算100個中性粒細胞內陽性反應細胞數，占比（陽性細胞數/100×100%）>40%視為陽性。

2.2 統計學數據處理

采用SPSS 20.0統計軟件處理數據，對計數資料比較采用χ2檢驗，對計量資料采用t檢驗，采用ROC曲線分析血清hs-CRP、NAP診斷小兒支原體肺炎的效能，在P<0.05時，差異有統計學意義。

3 結果

3.1 所有研究對象血清hs-CRP、NAP水平比較

觀察組患兒急性期和恢復期血清hs-CRP、NAP水平明顯高于對照組，且急性期患兒上述指標水平明顯高于恢復期，有顯著性差異（P<0.05，表1）。

3.2 不同方法診斷支原體肺炎的ROC曲線分析

ROC曲線結果顯示，hs-CRP診斷小兒支原體肺炎的敏感性、特異性、準確性分別為96.55%、87.50%、93.33%，NAP診斷的敏感性、特異性、準確性分別為96.08%、71.79%、83.33%，二者聯合診斷的敏感性、特異性、準確性分別為96.72%、96.55%、96.67%（圖1）。

3.3 不同方法診斷支原體肺炎的敏感性、特異性、準確性比較

在診斷支原體肺炎的敏感性、準確性方面，NAP

4 討論

小兒支原體肺炎是兒童最常見的感染性疾病之一，占兒童社區獲得性肺炎的10%～40%，隨病情進展可可發生灶性肺不張、肺實變和肺氣腫，其治療關鍵在于及早發現，及早干預[5-6]。近年來，隨著人們生活、飲食等及環境發生變化，小兒支原體肺炎的發病呈現出逐漸增加的趨勢，其鑒別診斷也逐漸受到人們的關注，但傳統實驗室培養檢查由于檢查時間長（約3～5 d）或操作復雜等，不利于該疾病的早期診斷，故尋找一種快捷且高準確性的診斷方法對指導患兒的臨床治療具有重要的價值[7]。

小兒支原體肺炎是由支原體在黏膜表面與呼吸道黏膜上皮細胞膜上神經氨酸受體緊密結合并附著其上，吸取自身所需要的營養，釋放過氧化氫等有害物質造成黏膜上皮及纖毛細胞的破壞所致，且其釋放的有害物質可能會激活機體內的中性粒細胞，隨著大量的中性粒細胞被激活，可經釋放具細胞毒性的氧自由基及蛋白酶而損傷肺組織，同時引起機體的炎癥反應，促使機體合成和分泌大量的炎癥因子，進一步損傷肺組織[8-9]。此外，支原體與呼吸道黏膜上皮細胞膜上的神經氨酸受體緊密結合后還可逃避黏膜纖毛的清除作用及吞噬細胞的吞噬作用，使其可持續性對肺組織造成損傷，最終導致肺炎的發生[10-12]。有研究顯示，hs-CRP是一種常見的非特異性炎癥標志物，由臨床實驗室采用超敏感檢測技術進行檢測，其水平變化可有效反映機體的炎癥狀態，在心肌梗死、組織損傷、及各種感染等情況下，可急劇上升，已被廣泛應用于多種炎癥或感染性疾病的檢查中[13-15]。而章希文等[16]研究表明，NAP是中性粒細胞的一種標志酶，主要存在于成熟中性粒細胞內，可反映成熟粒細胞的成熟程度和功能，而中性粒細胞是參與機體炎癥反應的主要細胞之一，故NAP可作為機體炎癥反應的一種重要標志物。

因此，我們認為在小兒支原體肺炎的發生發展過程中，于急性期可能由于支原體引起機體的炎癥反應，進而使機體肝臟合成和分泌大量的hs-CRP，同時其激活體內大量的中性粒細胞，隨著細胞的成熟，NAP的活性也逐漸增強，故可引起患兒血清hs-CRP、NAP水平急劇上升；而于恢復期可能由于支原體不斷被滅殺、機體炎癥病灶不斷被修復，支原體不能大量激活中性粒細胞，使機體的炎癥反應緩解，故使患兒血清hs-CRP、NAP水平逐漸下降，同時可能由于患兒尚未完全康復，上述指標水平仍高于正常兒童。而本研究通過聯合檢測血清hs-CRP、NAP水平，發現觀察組患兒急性期和恢復期上述指標水平明顯高于對照組，且急性期患兒上述指標水平明顯高于恢復期，ROC曲線結果顯示，在診斷支原體肺炎的效能方面，NAP

綜上所述，血清hs-CRP、NAP水平變化與小兒支原體肺炎的發生發展有關，二者聯合檢測對早期診斷小兒支原體肺炎具有良好的敏感性、特異性、準確性，可作為一種有效診斷方法。

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