調節B淋巴細胞在類風濕關節炎的作用

曹艷玲 楊書彥

（內蒙古自治區人民醫院，內蒙古呼和浩特 010017）

為探究其在類風濕關節炎中的參與作用，選取本院類風濕關節炎患者與正常者進行對照研究，結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

病例來源于2015年3月—2017年3月本院收治的50例類風濕關節炎患者，作為觀察組，男22例，女28例，年齡27～64歲，平均年齡（48.5±6.6）歲，該組患者符合類風濕關節炎的臨床診斷標準[1]。對照組為在我院健康體檢的30名正常者，其中男12例，女18例，年齡25～69歲，平均年齡（48.9±6.3）歲。醫學倫理會批準此次研究，納入病例均自愿參與研究，并簽署知情同意書。排除標準：（1）存在重要臟器疾病者及伴隨心、肝、腎功能疾病者；（2）意識模糊及精神紊亂者；（3）合并嚴重器質性病變者；（4）合并感染、腫瘤及其他結締組織疾病者。兩組患者一般資料經過統計學分析，差異不存在統計學意義。

1.2 方法

于清晨空腹狀態下取患者外周靜脈血2 mL保存于EDTA抗凝管中流式送檢，從中抽取100 μL放入另一試管，分別加入 20 μL抗CD19-PE-CY5、20 μL抗 CD24-PE以及5 μL抗CD38-APC，充分搖勻，避光狀態下放置室內，以15 min為宜。在其中加入2 mL紅細胞裂解液，避光10 min，給予2 000 r/min低溫離心處理，時間為5 min，去除上清液，采用2 mL磷酸鹽緩沖液洗滌2次，在其中加入0.5 mL PBS重懸，給予上流式細胞儀檢測，測定淋巴細胞表面熒光素熒光強度，給予Cellquest軟件分析，對陽性細胞百分率予以記錄。CD19+B淋巴細胞采用CD19單抗及SSC參數標記。

1.3 統計學方法

所有的計數資料均用%表示，進行χ2檢驗，計量資料選擇標準差（x±s）表示，采取t檢驗，數據計算在統計學軟件SPPSS18.0上進行處理，數據之間的差異有統計學意義表示為P＜0.05。

2 結果

2.1 類風濕關節炎患者外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs在CD19+B中的占比分析

CD24hi、CD38hi在CD19+B淋 巴 細 胞 的 百 分 率 為6.47%±4.83%，略低于對照組的7.24%±3.42%，但差異無統計學意義（P＞0.05），見圖1。

圖1 兩組外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs

2.2 類風濕關節炎患者外周血CD19+、CD24hi、CD38hiBregs與各項臨床指標相關性

類風濕關節炎患者CD19+、CD24hi、CD38hiBregs比例與年齡、抗CCP抗體滴度水平呈現為明顯負相關，與晨僵時間正相關（P＜0.05）。見圖2-4。

3 討論與結論

動物實驗研究顯示通過負向調節免疫反應，能夠有效緩解因外周血等引起的自身免疫疾病[2]。本研究探究了調節B淋巴細胞在類風濕關節炎中的參與機制，結果顯示類風濕關節炎患者CD19+、CD24hi、CD38hiBregs比例與年齡、抗CCP抗體滴度水平呈現為明顯負相關，與晨僵時間正相關（P＜0.05），研究結果能夠為臨床治療類風濕關節炎提供參考。綜上所述，類風濕關節炎發病機制與調節B淋巴細胞相關，能夠為類風濕關節炎治療提供新思路。

圖2 與年齡的相關性分析

圖3 與抗CCP抗體滴度的相關性

圖4 與晨僵時間的相關性分析

[1] 薛麗佳，黃巧容，林輝，等.B淋巴細胞微粒在類風濕關節炎患者外周血和關節液中的表達及臨床意義[J].西部醫學，2016，28（11）：1502-1505.

[2] 張智賢，何秋瑩，方偉禎，等.CD19、CD27和 CD38標記的B淋巴細胞亞群在類風濕關節炎患者外周血中的變化及意義[J].中華微生物學和免疫學雜志，2015（5）：382-386.