狼毒大戟中二萜成分的研究

馬玉坤 白麗明 郭麗娜 王 健

(1.齊齊哈爾大學 化學與化工學院，黑龍江 齊齊哈爾 161006；2.齊齊哈爾醫學院 藥學院，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

狼毒大戟(EuphorbiaFischerianaSteud. ), 為大戟科大戟屬植物, 在我國主要生長于內蒙古、東北及河北等地區。其根入藥為中藥狼毒，是一種傳統的中藥材[1]。狼毒始載于《神農本草經》，列為下品，其味苦、辛，性平，有毒，具有泄水逐飲，破積殺蟲的功效，主治水腫腹脹，痰食蟲積，心腹疼痛，結核，疥癬等[2]。為進一步開發研究狼毒大戟的藥用價值，開發植物資源的綜合利用，本文對干燥的狼毒大戟根部無水乙醇浸泡液石油醚萃取物化學成分進行了研究。從中分離得到4種單體化合物，并對其結構進行了鑒定，分別為巖大戟內酯A、巖大戟內酯B、17-羥基巖大戟內酯A和17-羥基巖大戟內酯B。

1材料與儀器

BrukerAM-600 型核磁共振波譜儀(TMS 為內標)；美國Waters公司高效液相色譜儀；柱色譜用硅膠為青島海洋化工廠產品(200目～300目)；薄層色譜硅膠板為青島海洋化工廠生產；索氏動態提取濃縮機組和多功能萃取罐由砥石機械生產；北京賽百奧科技有限公司生產的多功能暗箱紫外分析儀；所有分析純試劑均為天津市富宇精細化工有限公司生產；色譜純試劑為阿拉丁試劑廠生產。

實驗所用狼毒大戟于 2013 年采自內蒙古自治區，將根部剪粹后室內陰干，經齊齊哈爾醫學院中藥教研室郭麗娜教授教授鑒定為為EuphorbiaFischerianaSteud.，標本收藏于齊齊哈爾醫學院醫藥科學研究院藥用植物成分研究室。

2提取與分離

將干燥狼毒大戟根部28.92 kg，用無水乙醇浸泡提取5次，過濾合并提取液，減壓濃縮得深棕色粗浸膏。用水將該粗浸膏制成懸浮液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，減壓蒸餾至恒重，分別得到石油醚萃取物1.08 kg、乙酸乙酯萃取物0.7 kg和正丁醇萃取物0.2 kg。

取石油醚層萃取物1.08 kg，用硅膠柱色譜、HPLC、重結晶等方法分離純化得到化合物1(2.01 g)，化合物2(1.04 g)，化合物3(1.36 g)，化合物4(1.77 g)。

3結果與討論

3.1 結構鑒定

化合物1：無色雪花狀晶體(石油醚)，

1H-NMR (600MHz,CDCl3), δ:0.72(3H,s),0.85(3H,s),0.94(3H,s),2.05(3H,s),2.63(1H,d,J=5.4Hz),3.70(1H,s),5.45(1H,d,J=5.4Hz)。

13C-NMR(600MHz,CDC13),δ:8.68(C-17),15.02(C-20),18.46(C-2),20.89(C-6),21.93(C-19),33.51(C-18),33.54(C-4),34.17(C-7),39.90(C-3),41.45(C-10),41.54(C-1),51.87(C-9),53.53(C-5),54.51(C-14),61.21(C-8),104.12(C-11),125.23(C-15),145.04(C-13),147.50(C-12),170.65(C-16)。以上數據與文獻報道基本一致[3]，故鑒定化合物1 為jolkinolide A。

化合物2：無色針狀晶體(甲醇)。

1H-NMR (600 MHz, CDCl3), δ:0.83(3H,s),0.85(3H,s),0.94(3H,s),2.08(3H,s),2.29(1H,s),3.68(1H,s),4.04(1H,s,)。

13C-NMR(600MHz,CDCl3)δ:8.58(C-17),15.27(C-20),18.27(C-2),20.37(C-6),21.72(C-19),33.32(C-18),33.37(C-4),35.47(C-7),39.00(C-1),39.07(C-10),41.13(C-3),47.85(C-9),53.34(C-5),55.19(C-14),60.79(C-8),65.91(C-11),85.05(C-12),130.13(C-15),148.44(C-13),169.45(C-16)。以上數據與文獻報道基本一致[4]，故鑒定化合物2為jolkinolideB。

化合物3：無色針狀晶體(乙酸乙酯)。

1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 0.74(3H, s); 0.86(3H, s), 0.95(3H, s), 2.66(1H, d, J=5.4 Hz), 4.04(1H,d,J=5.4Hz), 4.65(2H, s),5.58 (1H, d, J=5.4 Hz)。

13C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 15.13(C-20),18.46(C-2), 20.85(C-6), 21.93(C-19), 33.50(C-18), 33.56(C-4), 34.00(C-7), 39.94(C-1), 41.52(C-10), 41.53(C-3), 51.81(C-9),53.55(C-5),54.46(C-14), 56.37(C-17), 61.33(C-8), 106.55(C-11),127.43(C-15),146.65(C-13), 147.35(C-12),169.24(C-16)。

以上數據與文獻報道基本一致[5]，故鑒定化合物3為17-hydroxyjolkinolideA。

化合物4：無色針狀晶體(乙酸乙酯)。

1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 0.80(3H,s), 0.80(3H,s), 0.88(3H, s), 2.30(1H, s),3.24(1H,s),4.02(1H,s),4.14(1H,s)。

13C-NMR(600 MHz, CDCl3)δ: 15.47(C-20),18.42(C-2),20.82(C-6),21.88(C-19),33.45(C-18),33.53(C-4),35.55(C-7),39.06(C-1),39.24(C-10),41.28(C-3),47.89(C-9),53.54(C-5),55.29(C-14),56.51(C-17),61.57(C-11),66.84(C-8),85.41(C-12),133.51(C-15),150.80(C-13),168.19(C-16)。

以上數據與文獻報道基本一致[6]，故鑒定化合物4為17-hydroxyjolkinolide B。

3.2 討論

干燥的狼毒大戟根部28.92 kg，粉碎后利用無水乙醇30 ℃恒溫浸泡提取，合并浸提液濃縮至小體積，加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到石油醚萃取物(1.08 kg),乙酸乙酯萃取物(0.7 kg),正丁醇萃取物(0.2 kg)。三種萃取物占狼毒大戟根部的質量分數分別為：3.7%、2.4%和0.7%。從石油醚萃取物中分離得到4個化合物，通過理化性質和波譜數據分析鑒定化合物的結構。分別鑒定為：巖大戟內酯A、巖大戟內酯B和17-羥基巖大戟內酯A、17-羥基巖大戟內酯B。

[1] 俞媚華,侯愛君.狼毒大戟抗乙肝病毒活性成分的研究[J].中國中藥雜志,2010,35(22):3 002～3 005.

[2] 南京中醫藥大學.中藥大辭典.下冊[M].上海科學技術出版社,2006:2 549.

[3] 馬良,王歡,王金蘭,等. 狼毒大戟地上部分化學成分研究 [J]. 齊齊哈爾大學學報, 2012,28(6): 27～29.

[4] 劉桂芳, 付玉琴, 楊志強,等.狼毒大戟抗癌活性成分二萜內酯的分離鑒定[J] .中藥通報,1988, 13:291～292.

[5] 劉文粢, 馬晴高, 秦國偉, 等.狼毒大戟的化學成分研究[Ⅱ] [J] .中草藥, 2004,35(3):260.

[6] 潘勤,施敏峰,閔知大.狼毒大戟中4 中Jolkinolide型二萜的二維核磁共振研究[ J] .中國藥科大學學報,2004, 35:16～19.