聯合檢測血漿及支氣管肺泡灌洗液（1—3）β—D—葡聚糖對侵襲性肺部真菌感染的臨床診治價值*

黃耀光　李偉杰　蘇偉強　林輝斌　陳虹　溫瓊娜

【摘要】 目的：探討聯合檢測血漿及支氣管肺泡灌洗液（BALF）（1-3）β-D-葡聚糖對侵襲性肺部真菌感染的臨床診治價值。方法：選取2014年6月-2016年5月期間本院確診治療的侵襲性肺部感染患者100例作為感染組，依據病原菌性質分為真菌組42例和細菌組58例，同期選取體檢中心健康人員30例作為健康組。采用乳膠增強免疫比濁法檢測（1-3）β-D-葡聚糖水平（G試驗），ROC曲線分析血漿及BALF的G試驗對侵襲性肺部真菌感染的診斷價值，統計分析所有研究對象血漿、BALF的G試驗情況。結果：真菌組患者血漿、BALF的G試驗水平明顯高于健康組和細菌組，比較差異均有統計學意義（P<0.05）。ROC曲線分析顯示，BALF的G試驗以10 ng/L為臨界值時，診斷侵襲性肺部真菌感染的敏感度、特異度、準確度分別為76.83%、89.73%、84.59%；血漿G試驗以20 ng/L為臨界值時，其診斷敏感度、特異度、準確度分別為78.47%、91.68%、84.43%；兩者聯合時，其診斷敏感度、特異度、準確度分別為85.92%、96.41%、93.28%。在診斷敏感度、特異度、準確度方面比較，BALF的G試驗<血漿G試驗<兩者聯合，比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論：血漿及BALF的G試驗水平變化與侵襲性肺部真菌感染有關，聯合檢測其水平對侵襲性肺部真菌感染具有更為良好的敏感性、特異性和準確性，值得臨床作進一步推廣。

【關鍵詞】 血漿； 支氣管肺泡灌洗液； （1-3）β-D-葡聚糖； 侵襲性肺部真菌感染； 診斷

Clinical Diagnosis and Treatment Value of Joint Detection of Plasma and Bronchoalveolar Lavage Fluid （1-3）β-D-glucan in Invasive Pulmonary Fungal Infection/HUANG Yao-guang，LI Wei-jie，SU Wei-qiang，et al.//Medical Innovation of China，2016，13（31）：010-013

【Abstract】 Objective：To discuss the clinical diagnosis and treatment value of joint detection of plasma and bronchoalveolar lavage fluid （BALF） （1-3） β-D-glucan in invasive pulmonary fungal infection.Method：100 patients with invasive pulmonary infection were selected from June 2014 to May 2016 in our hospital as infection group.According to the nature of pathogen，all patients were divided into fungal group of 42 cases and bacteria group of 58 cases，at the same time 30 cases with healthy physical examination center were chosen as health group.The latex enhanced immune turbidimetric method was used to detect （1-3） β-D-glucan level（G test），ROC curve analysis was used to analyze blood plasma and BALF G test value to the diagnosis of invasive pulmonary fungal infection，all the research objects of blood plasma and BALF G test were analysed.Result：Fungal group G test levels of plasma and BALF were obviously higher than that of healthy group and bacteria group，the differences were statistically significant（P<0.05）.ROC curve analysis showed that，the BALF G test with 10 ng/L as the critical value of invasive pulmonary fungal infection，the diagnostic，sensitivity and accuracy of the specific degree were 76.83%，89.73% and 76.83% respectively；the plasma G test with 20 ng/L as the critical value，the diagnostic，sensitivity and accuracy of the specific degree were 78.47%，91.68% and 84.43% respectively；the two joint as the critical value，diagnostic，sensitivity and accuracy of the specific degree were 85.92%，96.41% and 93.28% respectively.In the diagnosis of sensitivity， accuracy and specific degree，BALF G experiment

【Key words】 Plasma； Bronchoalveolar lavage fluid； （1-3） β-D-glucan； Invasive pulmonary fungal infection； Diagnosis

First-authors address：Central Peoples Hospital of Zhanjiang，Zhanjiang 524000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.31.003

侵襲性肺部感染是臨床上常見的感染性疾病之一，依據感染病原體的性質，可分為細菌性、真菌性等侵襲性肺部感染，其中早期真菌性感染無臨床癥狀，待有發熱、畏寒、頭痛、流涕等癥狀時，其病情已較為嚴重，從而增加治療難度和費用[1]。目前，侵襲性肺部真菌感染的演變迅速，病死率高，其治療關鍵在于采取綜合性防治措施，故如何準確、快速鑒別診斷該疾病對患者的臨床治療具有重要的價值[2]。對此，本研究通過檢測患者血漿、BALF的G試驗情況，探討其聯合檢測對侵襲性肺部真菌感染的診治價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月-2016年5月期間本院確診治療的侵襲性肺部感染患者100例作為感染組，男64例，女36例；年齡19～48歲，平均（34.76±12.47）歲。依據病原菌性質將其分為真菌組42例和細菌組58例，真菌組：男24例，女18例；年齡19～47歲，平均（35.01±12.11）歲；細菌組：男40例，女18例；年齡20～49歲，平均（35.99±13.16）歲。同期選取體檢中心健康人員30例作為健康組，男20例，女10例；年齡19～49歲，平均（35.63±12.88）歲。本次研究已經本院倫理委員會審批且通過，所有患者的性別、年齡等一般資料比較差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入與排除標準 （1）納入標準：①感染組患者經臨床癥狀、CT或超聲檢查、實驗室檢查等證實為侵襲性肺部感染[3]；②治療前1個月內無抗生素、抗感染等藥物治療史；③患者或其家屬簽署知情同意書。（2）排除標準：①伴有心、肝、腎等重要器官嚴重性疾病；②血液系統嚴重性疾病者；③有精神病病史者。

1.3 方法 所有研究對象均于晚8時后禁食，次晨7時空腹處理，抽取左上臂靜脈血3 mL，常規棉簽止血后置入無菌抗凝試管中，在纖維支氣管鏡輔助下于病變肺亞段支氣管緩慢灌注生理鹽水25 mL，持續緩慢吸出灌洗液至無菌收集杯內，將樣本分成A、B兩等份。A份通過全自動離心分離機進行10 min血清分離，3000 r/min，取適量上清液并采用乳膠增強免疫比濁法進行檢測，試劑盒由浙江夸克生物有限公司提供，通過羅氏全自動生化分析儀進行定量測定。同時B份送往實驗室進行真菌、細菌培養等微生物學檢查，統計分析所有研究對象血漿、BALF的G試驗情況，其中BALF的G試驗水平以0～10 ng/L為正常范圍值，血漿G試驗水平以0～20 ng/L為正常范圍值[4-5]。

1.4 統計學處理 使用SPSS 20.0統計軟件進行處理，計量資料采用（x±s）表示，比較采用t檢驗，計數資料采用 字2檢驗，多組資料比較采用F檢驗，血漿、BALF的G試驗對侵襲性肺部真菌感染的診斷價值采用ROC曲線分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血漿、BALF的G試驗水平比較 真菌組患者血漿、BALF的G試驗水平明顯高于健康組和細菌組，比較差異均有統計學意義（P<0.05）。但健康組和細菌組血漿、BALF的G試驗水平基本相同，比較差異均無統計學意義（t=1.299、1.388，P>0.05），見表1。

2.2 不同方法診斷侵襲性肺部真菌感染的ROC曲線分析 ROC曲線分析顯示，BALF的G試驗以10 ng/L為臨界值時，診斷侵襲性肺部真菌感染的敏感度、特異度、準確度分別為76.83%、89.73%、84.59%；血漿G試驗以20 ng/L為臨界值時，其診斷敏感度、特異度、準確度分別為78.47%、91.68%、84.43%；兩者聯合時，其診斷敏感度、特異度、準確度分別為85.92%、96.41%、93.28%，見圖1。在診斷敏感度、特異度、準確度方面，BALF的G試驗<血漿G試驗<兩者聯合，比較差異均有統計學意義（ 字2=11.736、12.671、15.749，P<0.05）

3 討論

侵襲性肺部真菌感染是臨床上呼吸內科常見的疾病之一，由真菌對氣管支氣管和肺部的侵犯引起氣道黏膜炎癥和肺部炎癥肉芽腫所致，由于其早期臨床表現常無特異性，常規的血生化、胸部X線片等檢查常難以發現，易導致誤診、漏診，而延誤治療[6-7]。近年來，隨著人們生活環境及廣譜抗生素頻繁使用等因素影響，侵襲性肺部真菌感染的發生呈現出逐年上升的趨勢，其臨床診治也逐漸受到人們的關注，且由于組織病理學診斷需要侵入性創傷性操作，故如何準確、低創鑒別診斷該疾病具有重要的臨床意義。

有研究顯示，（1-3）β-D-葡聚糖是一種由糖苷鍵的鍵結所形成的多糖，為真菌細胞壁的特異性組成成分，在真菌感染患者中呈現出高表達，提示其與真菌感染的關系[8-9]。而封凱旋等[10-11]研究表明，通過G試驗檢測（1-3）β-D-葡聚糖水平可有效對侵襲性肺部真菌感染進行早期鑒別診斷，且具有良好的敏感性和特異性。對此，本研究通過檢測患者血漿、BALF的G試驗情況，發現真菌組血漿、BALF的G試驗水平明顯高于健康組，ROC曲線顯示BALF的G試驗以10 ng/L、血漿G試驗以20 ng/L為臨界值時，在診斷敏感度、特異度、準確度方面，BALF的G試驗<血漿G試驗<兩者聯合，表明兩者G試驗水平與侵襲性肺部真菌感染有關，聯合檢測其水平對侵襲性肺部真菌感染具有更為良好的診斷價值。本研究結果提示在侵襲性肺部真菌感染診斷過程中，實驗室培養是常用的檢查方法，可有效準確鑒別該疾病的發生，但由于其操作較為復雜，且培養時間較長，易延誤患者的治療，同時胸部高分辨率CT檢查雖能早期發現肺部病灶，但病變表現無特征性，易造成誤診等情況發生，錯過了早期治療的時機，進而增加治療難度和費用[12-15]。而患者在發生真菌感染時，可引起機體一系列的免疫反應，進而激活巨噬細胞、噬中性細胞等，使巨噬細胞辨別和破壞真菌細胞壁，使真菌細胞壁分解成多種碎片，其中以β方式連接的（1-3）β-D-葡聚糖可能被大量釋放至患者的體液中，引起其在機體血液或肺泡液中的濃度上升，但由于部分真菌被氣道分泌物包繞，使（1-3）β-D-葡聚糖在釋放過程中較少地進入血液，導致單獨檢測BALF的G試驗水平出現假陰性診斷。也可能由于部分患者肺部真菌未被氣道分泌物包繞，可較為徹底地釋放至血液中，導致單獨檢測血漿G試驗水平敏感性降低[16-18]。因此，兩者聯合檢測可有效彌補兩者之間存在的不足，進而增加對侵襲性肺部真菌感染診斷的敏感性、特異性和準確性，有利于醫師更準確、快速鑒別診斷該疾病的發生，以作出相應的早期干預措施[19-20]。endprint

綜上所述，血漿及BALF的G試驗水平變化與侵襲性肺部真菌感染有關，聯合檢測其水平對侵襲性肺部真菌感染具有更為良好的敏感性、特異性和準確性，值得臨床作進一步推廣。

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（收稿日期：2016-07-04） （本文編輯：周亞杰）endprint