急性冠脈綜合征患者血漿miR-122和miR-3149表達的臨床意義

吳霞，王學法，金鑫

(1 新礦集團萊蕪中心醫院，山東萊蕪 271103；2 濟寧醫學院附屬醫院)

急性冠脈綜合征患者血漿miR-122和miR-3149表達的臨床意義

吳霞1，王學法1，金鑫2

(1 新礦集團萊蕪中心醫院，山東萊蕪 271103；2 濟寧醫學院附屬醫院)

目的 探討急性冠脈綜合征(ACS)患者血漿miR-122和miR-3149的表達變化及意義。方法 隨機選取急性心肌梗死(AMI)患者46例，不穩定心絞痛(UA)患者45例作為ACS組，并隨機選取冠脈造影陰性者40例作為對照組，采用實時熒光定量技術檢測各組血漿中miR-122和miR-3149，繪制受試者工作特征(ROC)曲線，分析血漿miR-122對ACS的診斷價值。結果 與對照組比較，ACS組血漿miR-122水平明顯升高，且AMI患者明顯高于UA患者(P均<0.05)；血漿miR-3149水平ACS組與對照組、AMI患者與UA患者比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。ROC曲線下面積為0.81(95%CI：0.725～0.888，P<0.01)。相關性分析顯示AMI患者miR-122和miR-3149表達水平與cTnI水平均無相關性(P均>0.05)。結論 miR-122在急性冠脈綜合征患者血漿中表達上升，對ACS的診斷具有一定的價值。

miR-122；miR-3149；急性冠脈綜合征；血管內皮細胞，增殖，遷移

急性冠狀動脈綜合征(ACS)是世界范圍內導致心血管疾病患者死亡的主要疾病之一[1]。如果患者在急性心梗發病后的3 h內接受到及時救治，病死率可大幅度降低[2]。研究發現，MicroRNAs(微小RNA，miRNAs)在血管生成和心血管疾病的發生中發揮重要作用，在RNA酶存在的情況下，其在心血管疾病患者體液中可穩定存在而不被降解[3,4]，提示外周血miRNAs有可能成為心血管系統疾病早期診斷和判斷預后的潛在標志物。研究發現，在豬心肌梗死動物模型中結扎冠脈阻斷血流后，動脈模型血漿中miR-122和miR-3149快速升高[5]，推測miR-122和miR-3149與冠心病有著一定的關系。本研究探討miR-122和miR-3149在ACS患者血漿中表達的變化及意義。

1 資料與方法

1.1 基本資料 收集2012年10月～2014年9月于濟寧醫學院附屬醫院和新礦集團萊蕪中心醫院就診并確診為ACS的91例患者作為ACS組，男46例、女45例，年齡34～82(55.4±5.9)歲；AMI患者46例，不穩定心絞痛(UA)患者45例；均符合美國心臟協會(AHA)/美國心臟病學會(ACC)2009心血管診療指南[6]制定的ACS制定標準。伴高血壓15例、糖尿病8例、高血壓合并糖尿病4例、高血脂11例，吸煙(每日>20支，時間>10年)15例；血清肌鈣蛋白Ⅰ(cTnI)為(6.98±2.91)ng/mL。收集同期表現為非心源性胸痛或者胸悶入院后冠脈造影陰性者40例作為對照組，男19例、女21例，年齡36～80(56.6±2.4)歲；伴高血壓6例、糖尿病3例、高血壓合并糖尿病1例，高血脂5例，吸煙6例；血清cTnI為(0.01±0.01)ng/mL。兩組年齡、性別比例、伴發疾病及吸煙等差異無統計學意義(P均>0.05)。ACS組血清cTnI水平明顯高于對照組(P<0.05)，ACS組AMI患者血清cTnI水平明顯高于UA患者(P<0.05)。本研究經本院倫理委員會批準，兩組研究內容均知情并簽署知情同意書。

1.2.1 血漿miR-122和miR-3149 mRNA水平 兩組均取肘靜脈血5 mL[觀察組于胸痛發作后(5.5±1.6)h采血)]，放入含檸檬酸鈉抗凝的采血管，采血2 h內離心(3 000 r/min， 15 min)分離血漿和細胞組分，血漿成分置于-80 ℃冰箱保存。采用SYBR Green定量PCR法 檢測miR-122和miR-3149 mRNA表達，2-ΔΔCt法計算miRNA相對表達量，實驗重復3次，取平均值。結果顯示，ACS組血漿miR-122水平明顯高于對照組，AMI患者明顯高于UA患者(P均<0.05)；血漿miR-3149水平ACS組與對照組、AMI與UA患者比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。見表1。

表1 兩組血漿miR-122和miR-3149相對表達量比較

注：與對照組比較，*P<0.01；與UA比較，#P<0.01。

1.2.2 AMI患者血漿miR-122和miR-3149表達與血清cTnI水平的相關性 采用Pearson線性相關分析法分析。結果顯示，AMI患者血漿miR-122和miR-3149表達與cTnI水平均無相關性，r分別為-0.121和0.078，P均>0.05。

1.2.3 血漿miRNA-122對ACS的診斷價值評估 繪制受試者工作特征(ROC)曲線，計算曲線下面積，分析miRNA-122對ACS的診斷價值。結果顯示，ROC曲線曲線下面積為0.81，95%CI：0.725～0.888，P<0.01。見圖1。

圖1 血漿miR-122表達對ACS的診斷價值

2 討論

血清cTnI是診斷AMI的特異和靈敏標志物之一，但AMI患者cTnI水平在心肌梗死4～8 h后才開始升高，早期診斷靈敏度不高[7]，且其對AMI與UA的鑒別無參考價值。目前已有研究報道miR-1、miR-195、miR-30a、miR-499等miRNAs具有優于肌鈣蛋白成為AMI標志物的潛在可能[8～12]，但目前其研究主要集中在AMI方面，在ACS范圍內的研究相對較少。

近期Li等[5]在豬心肌梗死模型的研究中發現，冠狀動脈結扎后血漿中miR-122含量在180～240 min內持續升高，miR-3149表達水平亦在30～240 min升高；截止到240 min檢查結束，血漿中cTnI水平仍未明顯升高。本研究結果顯示，ACS組血漿miR-122水平明顯高于對照組，且AMI患者明顯高于UA患者；提示miR-122在冠心病的發生、發展中起一定作用，對ACS與非冠心病、AMI與UA的鑒別有一定價值。miR-122是在肝臟特異高表達的一種miRNAs[13],在脂類代謝中起著重要的作用[14]。Gao等研究中發現高脂血癥患者血漿miR-122水平明顯升高，并且與冠心病的嚴重程度密切相關[15]。動物實驗研究表明，miR-122在心臟中表達無表達或者低表達，在大鼠梗死心肌組織中表達明顯升高[16]。但miR-122在冠心病的發生、發展中作用的具體機制尚不明確，有待于進一步的實驗證實。本研究ROC曲線分析結果顯示，miR-122對ACS有較高的診斷價值。以往研究報道，AMI患者血漿中某些miRNAs與cTnI水平相關[17]。本研究發現，AMI患者血漿中miR-122和miR-3149水平與cTnI水平均無相關性。但本研究尚存在一些局限性，從生物標志物研究看，樣本量偏小，且為橫斷面研究，有必要開展大樣本、多中心、隨機對照研究進一步研究證實。

綜上所述，miR-122在急性冠脈綜合征患者血漿中的表達水平明顯升高，對ACS的診斷具有一定的價值。

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