保腎片中蒼術揮發油最佳包合工藝研究

王穎

摘要：目的：保腎片中蒼術揮發油的最佳包合工藝及其包合物的穩定性考察。方法：采用正交設計，以揮發油包合率為考察指標優選包合工藝。以蒼術素為考察指標，對包合物進行強光照射、高溫和高濕等穩定性考察。結果：蒼術揮發油的最佳包合工藝為：研磨時間30 min，包合溫度30℃，蒼術揮發油：β-環糊精為1：8，β-環糊精：純化水為1：2；在強光、高熱、高濕等因素影響下，包合物中蒼術素含量沒有明顯變化。結論：該包合工藝穩定，包合物質量可控。

Abstract： Objective：To optimize the inclusion technology of β-cyclodextrin （β-CD） with volatile oil from Atractylodes lancea in Baoshen Tablets. And to observe the stability of the inclusion compounds. Methods：The orthogonal design was used to optimize the inclusion technology and the inclusion ratio of volatile oil was used as the criteria. The stability test was observed under the condition of intense light， high temperature and humidity with atractylodin as the index. Results：The optimum inclusion conditions were established as follows∶ the inclusion temperature was 30℃ and time was 30min， the ratio of volatile oil to β-CD was 1∶8， and the ratio of β-CD to water was 1∶2. The stability test showed the content of atractylodin has no significant difference. Conclusion：The optimized conclusion technology is stable and the quality of compounds can be controled.

關鍵詞：蒼術素；β-CD；包合物；穩定性

Key words： atractylodin；β-cyclodextrin；inclusion compounds；stability

中圖分類號：TQ461 文獻標識碼：A 文章編號：1006-4311（2017）04-0112-03

0 引言

蒼術為菊科植物北蒼術的干燥根莖，具有燥濕健脾、祛風散寒、明目之功效，用于風寒感冒、風濕痹痛、水腫、夜盲、脘腹脹滿、泄瀉、腳氣痿痹等病癥的緩解與治療。[1]具有中樞神經抑制、抗病毒、抗胃潰瘍、抗缺氧等功效揮發油[2，3]是蒼術中一味重要的活性成分。但是這種成分在光、熱作用下易揮發，性能不穩定，放置時間越長越容易變質[4-6]。β-環糊精包合中藥揮發油可以阻斷其與光熱的接觸，使其保持穩定性能，目前這種方法已在中藥制劑領域廣泛傳播[7-10]。本實驗采用正交設計刷選揮發油的最佳包合工藝，并首次對工藝的穩定性進行了研究。

1 實驗材料

實驗所用儀器、試藥詳見表1。

2 方法與結果

2.1 蒼術揮發油的提取

用蒸汽從適量蒼術（制）飲片中提取揮發油[9]，密封存放在棕色試劑瓶中備用。

2.2 蒼術揮發油β-CD包合工藝

2.2.1 制備包合物

按照配比要求稱量出一定量電費β-CD，與純化水混合加熱至成為混懸液，然后添加蒼術揮發油拌制均勻，再通過膠體磨按1500r/min的轉速研磨一段時間后將物料取出，靜置24h后抽濾，50℃干燥，用無水乙醇洗滌3次，晾干后得到疏松狀白色包合物粉劑。

2.2.2 揮發油包合率、空白回收率和包合物收率的測定[11] 精密稱取包合物10g，至圓底燒瓶中，加純化水適量，按2015版《中國藥典》附錄XD揮發油測定法測定，即得。

空白回收率的測定：精密量取蒼術揮發油10ml，置圓底燒瓶中，加純化水適量，按2015版《中國藥典》附錄XD 揮發油測定法測定，即得。

空白回收率（%）=收集揮發油量（ml）/加入揮發油投量（ml）×100%

包合率（%）=[包合物中揮發油量/（加入的揮發油量×空白回收率）]×100%

包合物收率=β-CD包合物質量（g）/[β-CD質量（g）+揮發油加入量（g）]×100%

2.2.3 正交試驗設計 根據預實驗，采用L9（34）正交試驗表，以揮發油包合率為考察指標，考察研磨時間、包合溫度、揮發油與β-CD的比例及β-CD與水的比例等四個因素，并結合生產實際，每個因素設計3個水平，見表2。

結果表明，以揮發油包合率作為考察指標，研磨時間對揮發油包合率有顯著影響，從表3中可知：A2>A3>A1，B3>B2>B1，C2>C1>C3，D3>D2>D1，故最佳包合工藝應為A2B3C2D3，但從K值來看，B2B3數值較為接近，為了提高生產效率，確定A2B2C2D3為蒼術揮發油的最佳包合工藝，即最佳研磨時間為30min，包合溫度30℃，蒼術揮發油：β-CD=1：8，β-CD：純化水=1：2。

2.3 包合物樣品制備

稱取160gβ-CD，摻入純化水320g加熱混合攪拌到30℃，使之成為混懸液，再添加20ml蒼術揮發油拌制均勻，膠體磨研磨（轉速：1500r/min）30min，放出物料，靜置24h，抽濾，50℃干燥，無水乙醇洗滌3次，晾干，得白色疏松狀包合物粉末163g，包合物收率：90.5%。

2.4 包合物中蒼術素含量測定[12]

2.4.1 色譜條件

Agilent 6890氣相色譜儀；HP-5石英毛細管色譜柱（5% Phenyl Methyl Siloxane）（30m×0.32mm×0.25μm）；進樣口溫度：230℃；檢測器溫度（FID）：240℃；分流比：25∶1；程序升溫：初始溫度80℃，保持2min，以每分鐘20℃升至160℃，保持6min，測定；載氣：氮氣，流速：1.0ml/min；進樣：2μl。

2.4.2 線性關系考察

精密稱取蒼術素10mg，置100ml量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，作為對照品溶液；精密吸取正十五烷100mg，置100ml量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，作為內標溶液；精密吸取對照品溶液0.2，0.5，1.0，2.0，5.0ml置10ml量瓶中，并分別加入內標溶液1ml，最后加乙醇至刻度，混勻，進樣測定，以對照品峰面積和內標峰面積比值為縱坐標，對照品濃度與內標濃度比值為橫坐標，繪制標準曲線。結果：蒼術素濃度在2～50μg·m1-1范圍內線性關系良好，其回歸方程為Y=3.527X+1.316×10-3，r=0.9998。

2.4.3 蒼術揮發油中蒼術素的含量測定

精密稱取蒼術揮發油10mg，置于100ml容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度。搖勻，精密吸取2.0ml，置10ml容量瓶中，加入內標溶液1ml，加乙醇至刻度，混勻，進樣測定。結果蒼術揮發油中蒼術素的平均含量為20.5%。

2.4.4 包合物中蒼術素的含量測定

精密稱取包合物1.0g，置于100ml圓底燒瓶中，加入50ml無水乙醇，加熱回流1h，放冷，稱重，并用無水乙醇補足減失重量，搖勻，過濾；精密吸取2ml過濾液及內標溶液1ml置于10ml容量瓶中，補加乙醇至規定刻度，搖勻，進樣測定，計算得包合物中蒼術素的平均含量為2.21%，RSD1.2%（n=6）。

2.5 光、熱、濕對包合物中揮發油的穩定性的影響研究

2.5.1 抗光性實驗

稱取蒼術揮發油β-CD包合物（2.3項制備樣品）和按制備投料比直接混勻所制得的蒼術揮發油與β-CD的混合物（以下簡稱混合物）各若干份，照射10d（強度4000 lx），于0，1，3，6，10d時取樣，包合物與混合物外觀顏色及性狀均沒有變化，測定結果見表4。

2.5.2 熱穩定性實驗

按配比要求分別稱取若干份包合物和混合物，分別于靜置在40℃、60℃、80℃恒溫干燥箱內10d，然后在0，1，3，6，10d時取樣測驗，得到表5所示測驗結果。測驗結果表明，發現兩種物質的性狀和外觀顏色都比較穩定，沒有任何顯著性的變化。

2.5.3 濕穩定性實驗 按照配比要求分別稱取適量包合物和混合物，靜置在相對濕度為75%和92.5%的室溫環境下10d，分別在第0，1，3，6，10d時取樣，包合物與混合物外觀顏色及性狀均沒有變化，測定結果見表6。

表6結果表明蒼術揮發油包合物濕穩定性明顯優于蒼術揮發油混合物。

3 小結

如超聲波法、冷凍干燥法、飽和水溶液法等目前常用的蒼術揮發油包合方法大都屬于實驗室制取的范疇，而實驗室制取方法限制因素眾多，無法實現規?；a，這在一定程度上阻礙了其產業化發展路徑。

本文基于蒼術揮發油的特點所進行的制取方法的研究恰恰適用于產業化生產模式，主要是在確保保腎片產品功效的前提下，用膠體磨法制取蒼術揮發油β-CD包合物，同時針對保腎片產品特點科學的采用正交實驗法，最終形成了一套適用于規模化生產要求的包合工藝：研磨時間30min，包合溫度30℃，蒼術揮發油：β-CD=1：8，β-CD：純化水=1：2。該包合法快速、簡便明顯優于其他相關文獻[13-15]，而以蒼術素含量為指標計算的包合率高達85.86%，亦表明該法簡便、高效，能夠順利實現產業化生產。穩定性實驗結果表明，白色包合物對光、熱、濕氣具有一定的低于作用，能夠有效保持蒼術揮發油的穩定功效。

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