狗獾油安全性評(píng)價(jià)

代長(zhǎng)林 孫紅瑜 劉朝陽(yáng) 代依脈

（1.黑龍江省脈動(dòng)獾子食品技術(shù)開發(fā)有限公司，哈爾濱150001；2.黑龍江省野生動(dòng)物研究所，哈爾濱150081）

狗獾油安全性評(píng)價(jià)

代長(zhǎng)林1孫紅瑜2劉朝陽(yáng)1代依脈1

（1.黑龍江省脈動(dòng)獾子食品技術(shù)開發(fā)有限公司，哈爾濱150001；2.黑龍江省野生動(dòng)物研究所，哈爾濱150081）

對(duì)饒河脈動(dòng)珍稀動(dòng)物繁育有限公司提供的狗獾油進(jìn)行急性毒性和長(zhǎng)期毒理試驗(yàn)驗(yàn)證,狗獾油原液對(duì)小鼠和大鼠的體重、進(jìn)食量、臟器系數(shù)以及血液學(xué)指標(biāo)均無(wú)明顯影響，說明狗獾油安全無(wú)毒性。

狗獾油；毒理；安全性

狗獾油[1]是食肉目鼬科動(dòng)物狗獾(Meles meles)的脂肪經(jīng)熬制而成，也稱獾子油。獾子油含有人體必需的多種脂肪酸和不飽和脂肪酸[2]，滲透性好，具有清熱解毒、消腫止痛、潤(rùn)燥生肌之功效，主治[3]燒燙傷、痔瘡、禿瘡、中氣不足、胃潰瘍等癥，同時(shí)也是一種極佳的營(yíng)養(yǎng)保健品。本研究以小鼠和大鼠為試驗(yàn)對(duì)象，通過急性毒性和長(zhǎng)期毒性[4]試驗(yàn)對(duì)獾子油的安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，以期為獾子油開發(fā)為保健食品提供科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

昆明系健康小鼠60只，體重18～22 g，雌雄各半；健康Wistar大鼠40只，雌雄各半，5周齡，體重105～110 g，均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。機(jī)制鼠塊料購(gòu)于哈爾濱漢方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)。

狗獾油由黑龍江省饒河脈動(dòng)珍稀動(dòng)物繁育有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 急性毒性試驗(yàn)

將40只小鼠（雌雄各半）進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)觀察5天，試驗(yàn)前小鼠禁食12 h，不禁水，實(shí)驗(yàn)室溫度20～25℃。將小鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。各組給藥（獾子油原液）劑量分別為：40 mL/kg體重、4 mL/kg體重、0.4 mL/kg體重、0.04 mL/kg體重，采用一次性灌胃給藥的方法進(jìn)行灌胃，找出0%和100%死亡的劑量范圍，或100%死亡劑量，然后進(jìn)行正式試驗(yàn)。如果在最大給藥濃度及最大灌胃體積（40 mL/kg體重）下無(wú)法找出小鼠100%死亡的劑量或0%和100%死亡的劑量范圍時(shí)，則進(jìn)行一日內(nèi)最大耐受量測(cè)定。

一日內(nèi)最大耐受量測(cè)定：取健康小鼠20只，采用與臨床一致的給藥途徑，以小鼠能耐受的最大濃度（40 mL/kg體重）連續(xù)給藥3次/日，中間間隔時(shí)間為5 h，計(jì)算一日內(nèi)總給藥量與人臨床用量的倍數(shù)，連續(xù)觀察7天。

1.2.2 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)

將40只大鼠進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)5天后，開始正式試驗(yàn)。根據(jù)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果將大鼠隨機(jī)分為4組：狗獾油高劑量組（40 mL/kg）、中劑量組（4 mL/kg）、低劑量組（0.4 mL/kg）和空白對(duì)照組，每組10只大鼠，雌雄各半，每日進(jìn)行灌胃給藥；空白對(duì)照組每日按10 mL/kg體重的容積給予灌胃生理鹽水1次，連續(xù)給藥12周。每周稱量1次體重并記錄攝食量。

試驗(yàn)期間觀察大鼠的一般狀態(tài)，如外觀體征、行為、活動(dòng)、飲食、分泌物、糞便等。

最后一次給藥后，對(duì)試驗(yàn)大鼠采血，做血常規(guī)檢查，分離血清做血液生化檢查。之后處死大鼠，取其心、肝、脾、肺、腎、胸腺等主要臟器，稱其濕重，計(jì)算臟器系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 急性毒性試驗(yàn)

急性毒性試驗(yàn)中，以最大濃度及最大灌胃體積進(jìn)行灌胃試驗(yàn)后小鼠全部成活，未能找出100%死亡劑量，故因未能測(cè)出LD50，因此進(jìn)行一日內(nèi)最大耐受量測(cè)定。

24h內(nèi)以小鼠能耐受的最大濃度連續(xù)3次灌胃后觀察，小鼠自發(fā)活動(dòng)稍有減少，對(duì)外界反應(yīng)稍見冷漠，但30 min內(nèi)便陸續(xù)恢復(fù)正常，個(gè)別小鼠肛門周圍有稀便。7天內(nèi)動(dòng)物在自發(fā)活動(dòng)、外觀、對(duì)外界反應(yīng)、膚色、分泌物、眼、呼吸、食欲、肌肉運(yùn)動(dòng)等方面均未觀察到異常變化，且無(wú)小鼠死亡，僅有個(gè)別小鼠肛門周圍有稀便殘留。經(jīng)計(jì)算，在24 h內(nèi)小鼠累計(jì)給藥量為120 mL/kg(40 mL/kg×3)，以人（60 kg體重）每日臨床合理服用量為40 mL推算，小鼠的服用量相當(dāng)于人用量的180倍，即倍數(shù)＝（120 mL/kg）/（40 mL/60 kg）=180倍

2.2 長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)

2.2.1 一般形態(tài)

在試驗(yàn)期間，各劑量組大鼠的全身狀況良好，活動(dòng)正常，無(wú)口鼻出血情況和其他異常行為，生長(zhǎng)發(fā)育良好。而且被毛平順，眼睛有神，反應(yīng)正常，呼吸平穩(wěn)，進(jìn)食飲水正常，大、小便無(wú)異常改變。表明獾子油對(duì)各試驗(yàn)組大鼠的一般形態(tài)無(wú)明顯影響。

2.2.2 對(duì)體重和進(jìn)食量的影響

各劑量組和空白對(duì)照組大鼠體重均隨試驗(yàn)期間周齡的增加而增加，生長(zhǎng)發(fā)育情況良好，各劑量組進(jìn)食量無(wú)明顯變化。

2.2.3 對(duì)臟器系數(shù)的影響

獾子油連續(xù)灌胃給藥12周后，各劑量組大鼠的臟器指數(shù)與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異（P＞0.05）（表1）。

表1 給藥12周后大鼠臟器指數(shù)

2.2.4 對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響

用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血液學(xué)檢測(cè)，檢測(cè)項(xiàng)目有：白細(xì)胞（WBC）、淋巴細(xì)胞數(shù)（LYM）、單核細(xì)胞（MON）、中性粒細(xì)胞數(shù)目（GRAN）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、平均血紅蛋白量（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板數(shù)（PLT）、血小板平均體積（MPV），檢測(cè)結(jié)果（表2）表明，連續(xù)灌胃給藥12周，各劑量組大鼠的血液學(xué)指標(biāo)與對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性變化。

表2 獾子油給藥12周對(duì)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響

3 結(jié)論

本試驗(yàn)利用狗獾油原液進(jìn)行了急性毒性和長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，其中急性毒性試驗(yàn)未能測(cè)出獾子油的半致死量LD50，當(dāng)小鼠一日內(nèi)灌胃量達(dá)120 mL/kg時(shí)，相當(dāng)于人用量的180倍，7天內(nèi)小鼠無(wú)死亡，形態(tài)未見異常變化。各劑量組給藥12周后，大鼠一般形態(tài)、體重和進(jìn)食量、臟器系數(shù)以及血液學(xué)指標(biāo)無(wú)明顯變化，證明其安全無(wú)毒性。

［1］高耀亭等.中國(guó)動(dòng)物志獸綱［M］.北京：科學(xué)出版社，1987.

［2］施銀，陳若晞.冬眠期狗獾油脂肪酸組成分析及安全性動(dòng)物試驗(yàn)［J］.中國(guó)油脂，2015，40(5):95-40.

［3］朱琳等.獾子油的化學(xué)成分研究［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(22):108-110.

［4］徐叔云等.藥理實(shí)驗(yàn)方法［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002.

第1作者簡(jiǎn)介：代長(zhǎng)林（1974-），男，工程師，狗獾飼養(yǎng)及產(chǎn)品開發(fā)。

（責(zé)任編輯：王岳）

R 931.3

A

1001-9499（2017）01-0045-02

2016-11-16