支氣管擴張癥合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表達水平及臨床意義

張海寧 張晴 張輝 林蘇杰 楊俊玲

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·呼吸病研究·

支氣管擴張癥合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表達水平及臨床意義

張海寧1，2張晴1張輝1林蘇杰1楊俊玲1

目的 檢測支氣管擴張癥合并哮喘患者外周血清白介素-4(IL-4)、γ干擾素(IFN-γ)的表達水平，并分析其臨床意義。方法 按照支氣管擴張及哮喘的診斷標準將41例支氣管擴張和哮喘患者分為A、B、C組，其中14例支氣管擴張患者為A組，12例哮喘患者為B組，15例支氣管擴張合并哮喘患者為C組，7例健康體檢者為D組。應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法測定上述各組研究對象血清中IL-4、IFN-γ的表達水平。結果 (1) 外周血清IL-4的表達水平：支擴合并哮喘組IL-4的表達水平317.02±53.53ng/L高于支擴組279.02±44.24ng/L，低于哮喘組367.60±45.10ng/L，差異有統計學意義(P<0.05)。(2) 外周血清IFN-γ的表達水平：支擴合并哮喘組患者血清中IFN-γ的表達水平241.68±50.33 ng/L低于支擴組295.65±77.10ng/L，高于哮喘組153.76±26.69 ng/L，差異有統計學意義(*P<0.05，△P<0.01)。結論 IL-4，IFN-γ在支氣管擴張癥合并哮喘的發病中可能起一定作用，檢測IL-4，IFN-γ對支氣管擴張癥合并哮喘的輔助診斷有重要參考價值。

IL-4 主要是通過TH2細胞介導釋放，可以引起IgE水平增高，嗜酸性粒細胞及炎性介質釋放增多，導致氣道平滑肌增生。IFN-γ則是由Th1細胞介導分泌，在增強 Th1細胞應答同時抑制 IL-4 產生，可以減輕氣道過敏性炎癥，并且能夠通過減少細菌的供鐵量及誘導內源性NO的產生直接抑制細胞內的細菌，還能增加單核巨噬細胞溶解細菌作用，通過以上途徑共同達到消滅細菌的作用。在呼吸系統疾病中，支氣管擴張和支氣管哮喘屬于呼吸內科的常見病及多發病，其發病機制及診治較為明確，但對于支氣管擴張癥合并哮喘的發病機制研究較少，且由于其診斷需結合高分辨胸部CT及支氣管舒張試驗，臨床上存在較高漏診率，因而本研究是通過對比支氣管擴張合并哮喘與單純支氣管擴張、單純哮喘患者血清中IL-4、IFN-γ的表達水平上的差異，從而提高對支氣管擴張合并哮喘的認識。

資料與方法

一、研究資料

選取2014年10月至2015年10月于吉林大學第二醫院呼吸內科明確診斷為支氣管擴張合并支氣管哮喘15例患者設為A組，單純支氣管擴張14例患者設為B組，單純支氣管哮喘12例患者設為C組，選取體檢科7例健康體檢者為D組。所有受試者均簽署知情同意書。

納入標準：支氣管擴張診斷標準參照2012年成人支氣管擴張癥[1]診治專家共識，支氣管哮喘診斷標準符合2008年中國哮喘防治指南[2]。

排除標準：所選病例需排除變應性支氣管肺曲霉菌病 (ABPA)，且行支氣管舒張試驗，檢查前3天內未使用支氣管舒張劑及抗炎藥，無高血壓、冠心病、心力衰竭等心血管病變。健康體檢者需排除呼吸、心血管、消化、神經、內分泌、泌尿及免疫系統疾病，從未應用過免疫抑制劑及糖皮質激素。

二、試劑與器材

人白細胞介素-4(IL-4)酶聯免疫分析試劑盒，人γ干擾素(IFN-γ)酶聯免疫分析試劑盒，低速臺式離心機，多功能酶標儀，熱恒溫水溫箱。

三、研究方法

1 標本收集及處理：支氣管擴張合并哮喘組、支氣管擴張組、哮喘組及正常對照組患者于晨起時采取空腹外周靜脈血5mL，將靜脈血置于我院呼吸內科實驗室的低速臺式離心機上，以3000r/min的速度離心10min，分離出血清后置于-80℃冰箱中保存。

2 血清IFN-γ及IL-4檢測水平

采用上海豐壽公司的人IL-4、IFN-γ酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測試劑盒，檢測血清IL-4、IFN-γ水平，操作步驟按照說明書進行，每個樣本做2個復孔檢測。采用多功能酶標儀檢測吸光度值。

3 統計分析

結 果

一、血清IL-4的表達水平

A組、B組、C組患者血清中IL-4的表達水平均高于D組，差異有統計學意義(P均<0.01)；C組患者血清中IL-4的表達水平高于A組，差異有統計學意義(P<0.05)；C組患者血清中IL-4的表達水平低于B組，差異有統計學意義，P<0.05，(見表1)。

二、血清IFN-γ的表達水平

A組、C組患者血清中IFN-γ的表達水平均高于D組，差異有統計學意義(△P<0.05,*P<0.01)；B組血清中IFN-γ的表達水平低于D組，差異有統計學意義(P<0.05)；C組患者血清中IFN-γ的表達水平低于A組，差異有統計學意義(P<0.05)；C組患者血清中IFN-γ的表達水平高于B組，差異有統計學意義，P<0.01，(見表1)。

表1 各組研究對象血清IL-4、IFN-γ表達水平比較(±s)

表1 各組研究對象血清IL-4、IFN-γ表達水平比較(±s)

分組nIL?4(ng/L)IFN?γ(ng/L)A組14279．02±44．24△?295．65±77．10??B組12367．60±45．10△?153．76±26．69△△C組15317．02±53．53△241．68±50．33#D組7215．33±46．33192．14±25．99

注：1.IL-4：與D組比較，△P<0.01 與C組比較，*P<0.05; 2. IFN-γ: 與D組比較，*P<0.05,△P<0.01;與C組比較，*P<0.05，△P<0.01

討 論

Van der Pouw 等[6]的研究表明哮喘患者中IL-4的表達水平明顯升高，IFN-γ的表達水平明顯降低，目前國內外研究認為IFN-γ /IL-4 失衡是哮喘發病的關鍵因素之一，且與哮喘的病情加重有關。早在20世紀之前國外學者已證實在支氣管擴張患者中IFN-γ的表達水平明顯升高[7-8]。但對于支氣管擴張合并哮喘，此類疾病中IL-4及IFN-γ的表達水平如何目前并沒有相關文獻考證，因而本研究通過ELISA方法測定IL-4及IFN-γ在支氣管擴張合并哮喘患者血清中的表達水平，為支氣管擴張合并哮喘疾病的診斷提供新的輔助方法。

本研究中哮喘組患者血清中IL-4表達水平高于正常對照組，IFN-γ低于對照組，支氣管擴張組IL-4表達水平低于對照組，IFN-γ高于對照組，差異均有統計學意義(P均<0.01)，此結論同Van der Pouw 等人的研究結論一致。支氣管擴張合并哮喘組IL-4及IFN-γ的表達水平均高于對照組。本研究同時將支氣管擴張合并哮喘組與支氣管擴張組、哮喘組患者血清中IL-4及IFN-γ的表達水平進行對比，發現支氣管擴張合并哮喘組患者血清中IL-4的表達水平高于支氣管擴張組，低于哮喘組，IFN-γ表達水平低于支氣管擴張組而高于哮喘組。

支氣管擴張合并哮喘是一種特殊類型的疾病，往往被臨床醫生所忽略，目前其發病機制仍然不明，是有特殊外界壞境刺激還是發病過程中必然會出現的并發癥，這個問題還需要更多的臨床研究去探討。本研究總結了支氣管擴張合并哮喘患者在血清IL-4、 IFN-γ表達水平上的特點，目的在于進一步提高臨床醫師對支氣管擴張合并哮喘這種疾病的認識和重視，同時由于其檢測方法簡便安全快捷，能夠起到輔助診斷的作用，可以考慮在臨床上推廣應用。

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[2] 中華醫學會呼吸病學分會哮喘學組,中華醫學會全科醫學分會.中國支氣管哮喘防治指南( 基層版)[J].中國實用內科雜志,2013, 33(8):615-622.

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[6] Van der Pouw L, Kraan TC, Van der Zee JS, et al. Department of Autoimmune Diseases, Central laboratory of the Netherl and Redcross Blood Transfusion service. Amsterdam[J]. Clin Exp Immunol,1998,111(1):129-135．

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[8] Gaga M, Bentley AM, Humber M,et al. Increases in CD4+ T lymphocytes, macrophages, neutrophils and interleukin 8 positive cells in the airways of patients with bronchiectasis[J]. Thorax,1998,53(8):685-691.

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.053

1. 130000 吉林 長春，吉林大學第二醫院呼吸內科 2. 257000 山東 東營，東營市人民醫院

楊俊玲，E-mail：junling@jlu.edu.cn

2016-08-05]