人非小細胞肺癌腫瘤組織中叉頭框蛋白Q1的表達水平

鐘惠鈴

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人非小細胞肺癌腫瘤組織中叉頭框蛋白Q1的表達水平

鐘惠鈴

目的 探討叉頭框蛋白Q1(FOXQ1)在人非小細胞肺癌腫瘤組織中的表達水平。方法 選取2011年1月至2012年1月我院病理科取得的非小細胞肺癌腫瘤組織，檢測FOXQ1在腫瘤組織中的表達，分析影響FOXQ1表達因素，以及探討FOXQ1表達的臨床意義。結果 FOXQ1表達陽性率為90%，FOXQ1蛋白的表達與非小細胞肺癌患者的年齡、性別無關(P>0.05)，與癌細胞的分化程度、病理類型、有無淋巴轉移以及腫瘤分期有密切關系(P<0.05)。結論 FOXQ1的表達水平與患者的預后狀況呈負相關性。

FOXQ1；非小細胞肺癌；病理

肺癌的發病率呈逐年上升趨勢，其病死率也非常高，其中非小細胞肺癌占到80%的比例，有研究表明，僅有16%的肺癌患者能有5年的生存率，其中大概有45%的非小細胞肺癌患者會在5年內死亡[1]。腫瘤的發生發展與轉錄因子的表達異常有著密不可分的聯系，叉頭框蛋白Q1(fork head box protein Q1,FOXQ1)[FOXQ1]作為叉頭框蛋白家族的一員，參與了細胞的周期調控，在腫瘤的發生、侵襲及遠處轉移中起到了重要作用[2-3]，本文對80例非小細胞肺癌患者的腫瘤組織通過SP染色以及對患者進行隨訪等方式觀察FOXQ1在患者組織中的表達水平，探討分析FOXQ1與非小細胞肺癌患者臨床特征及預后之間的影響關系。

資料與方法

一、一般資料

選取我院2011年1月-2012年1月在我院收治的明確診斷為非小細胞肺癌患者80例，其中男性52例、女性28例，年齡32-71歲，平均年齡(52.7±11.3)歲，其中60歲以上的患者49例，小于60歲的患者31例；分化程度：中高分化54例、低分化26例；病理類型：鱗癌20例、腺癌42例、其他類型18例；淋巴轉移情況：已發生淋巴轉移62例、無淋巴轉移18例；腫瘤分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期31例、Ⅲ期25例、Ⅳ期4例。所有患者除淋巴轉移外，均無廣泛轉移，為達到臨床治愈效果，所有患者均接受手術治療，均在我院手術治療取得所有患者腫瘤組織，其中，對所有手術標本均用10%甲醛固定。以上患者均通過門診復查及電話隨訪，隨訪截止時間為2015年12月，所有患者的臨床病歷資料均保存完好。

二、試驗方法

1 SP染色方法及結果判定： 對所取得的腫瘤組織采用免疫組織化學SP染色法，常規拷片脫蠟包埋，乙醇脫水。用濃度為3%H2O2、溫度為37℃溫育10min以滅活阻斷內源性過氧化物酶，通過PBS沖洗后修復抗原；37℃山羊血清溫育10min，加入濃度為1:500的FOXQ1抗體50uL，放入恒溫4℃的冰箱過夜，PBS沖洗3遍，每次沖洗5min。加入生物素標記二抗，37℃溫育30min再PBS沖洗3遍，每次5min。加入鏈霉素卵白素工作液，37℃溫育30min再PBS沖洗3遍，每次5min；DAB顯色。生理鹽水沖洗徹底，復染、脫水待干燥后封片，用PBS替代一抗做陰性對照。細胞質內或者細胞核出現棕褐色或棕黃色的顆粒提示FOXQ1蛋白呈陽性表達，根據染色強度分為4級：無著色0分、輕度染色(黃色)得1分、中度染色(棕黃色)得2分、重度染色(棕褐色)得3分；根據陽性細胞占總細胞數值的百分比可分為5級：低于10%為0分、大于10%而低于25%為1分、大于25%低于50%為2分、大于50%低于75%為3分、大于75%為4分；最后將染色強度得分乘以陽性細胞百分比：低于3分為表達陰性、高于3分為表達陽性。

三、統計學方法

結 果

一、FOXQ1表達陽性情況

80例腫瘤組織標本中，FOXQ1表達陽性大部分出現在細胞質，細胞核內也有部分表達陽性，大于3分即FOXQ1表達陽性72例，低于3分即FOXQ1表達陰性8例，表達陽性率90%。FOXQ1蛋白的表達與非小細胞肺癌患者的年齡、性別無關(P>0.05)，與癌細胞的分化程度、病理類型、有無淋巴轉移以及腫瘤分期有密切關系，P<0.05，(見表1)。

表1 FOXQ1蛋白在非小細胞肺癌腫瘤組織中的表達情況

二、 FOXQ1的表達與非小細胞肺癌患者預后的關系

80例患者的平均生存時間為18個月，其中FOXQ1表達陽性的患者平均生存時間為13個月，FOXQ1表達陰性的患者平均生存時間為21.5個月(P<0.05)。

討 論

研究表明，在世界范圍內肺癌的發病率及病死率已居所有惡性腫瘤的首位，非小細胞肺癌屬于肺癌的一種，其患者細胞呈無序性增值狀態，機體內某些重要細胞因子在調節細胞周期進程、分化增殖以及凋亡衰老等方面出現表達紊亂[4]。叉頭框蛋白是一類有翼狀螺旋結構的轉錄因子蛋白質，參與機體多種生理生化過程，涉及到細胞周期調控、免疫調節等，目前已被證實的叉頭框蛋白家族成員多達100多個，包括FOXA-S共19個亞家族，他們對維持細胞生命活動起到關鍵性的調控作用[5-6]。研究表明，在胚胎發育的每一步都有FOX基因的特征性表達，因此細胞的代謝與分化都有FOX蛋白家族的參與[7]，他們可以調控細胞周期、衰老和死亡，對腫瘤細胞的無序增殖有抑制作用，通過與靶細胞啟動子區域的GC盒等元件相結合控制基因轉錄，從而發揮生物功效，他們的異常及突變與腫瘤的發生發展以及腫瘤細胞的轉移密切相關。

FOXQ1屬于FOXQ亞家族，是Fox機組基因中新發現的逆轉錄因子，它位于6號染色體短臂的25.3區，含403個氨基酸，全長2319bq，僅一個外顯子[8]，能夠從正方向調控基因調控，對腫瘤組織的血管以及組織生長發揮重要作用。在非小細胞肺癌發生過程中，FOXQ1發揮著重要作用，主要機制是FOXQ1能夠調控E-cadherin(E-人鈣黏附蛋白)，E-cadherin是一種鈣依賴型粘糖蛋白和上皮標志物，介導組織細胞黏附反應，對腫瘤發生進展具有抑制作用，FOXQ1與E-cadherin蛋白的核心啟動區域結合，介導抑制E-cadherin的表達，E-cadherin表達降低后導致β-catenin在腫瘤組織細胞的細胞質內聚集，導致WNT信號通路阻礙，組織細胞黏附力下降，組織細胞容易發生游離而向組織外浸潤生長，當獲得轉移的條件時，則會脫離原發灶而發生浸潤與轉移，導致肺上皮細胞發生EMT(上調能促進-間質轉化，epithelial-mesenchymal transition)化[9-10]，即腫瘤的發生、發展與轉移。本文研究結果顯示，在80例非小細胞肺癌患者中，處于中高度分化和癌癥中晚期與病理類型差且已發生淋巴轉移的患者，其腫瘤組織中的FOXQ1蛋白表達水平升高，表明FOXQ1蛋白表達水平與腫瘤的發展過程、腫瘤細胞的分化程度及淋巴轉移進程呈正相關性。在隨訪過程中，FOXQ1表達陽性的患者生存時間明顯少于FOXQ1表達陰性的患者，說明FOXQ1的表達與患者的預后有著密切聯系。

綜上所述，FOXQ1的陽性表達與非小細胞肺癌患者的不良預后有明顯的相關性，但其具體機制還有待深入研究，本文結果為探索FOXQ1與非小細胞肺癌的發生發展起到了重要作用，下一步我們將深入探討非小細胞肺癌的生物學機制以及能否下調FOXQ1基因的表達，為治療非小細胞肺癌提供新的思路及更多可能。

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Expression level of fork head box protein Q1 in human non small cell lung cancer tumor tissue

ZHONGHui-ling

theCentralHospitalofPanyuDistrict,Guangzhou,Guangzhou511400,China

Objective To discuss the expression level of fork head box protein Q1 (FOXQ1) in human non small cell lung cancer tumor tissue. Methods The non small cell lung cancer tumor tissue were collected from January 2011 to January 2012 in our hospital, and the expression of Q1 in tumor tissues was detected. The expression factor of influencing fork head box protein Q1 was analyzed, and the clinical significance of the expression of fork head box protein Q1 was discussed. Results The positive rate of Q1 expression was 90%, and the expression of FOXQ1 protein had no relation with their age and sex (P>0.05), but it was closely related with the degree of differentiation, pathological type, lymph node metastasis and tumor stage (P<0.05). Conclusion The expression level of Q1 is negatively correlated with the prognosis of patients.

FOXQ1; non small cell lung cancer; pathology

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.039

511400 廣東 廣州，廣州市番禺區中心醫院

2016-05-06]