Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中的表達水平及臨床意義

秦 娟 晏 偉 王三喜 王海燕 唐曉梅 司婷婷

Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中的表達水平及臨床意義

秦 娟 晏 偉 王三喜 王海燕 唐曉梅 司婷婷

目的 探討Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中的表達水平及其臨床意義。方法 收取行病理學檢查的胃癌患者170例作為研究對象，對其胃癌組織及癌旁組織的石蠟切片進行ki67、p53及EGFR免疫組化染色。結果 胃癌組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為71.18%、55.88%及45.29%；癌旁組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為31.76%、12.94%及10.59%。胃癌組織陽性表達率均明顯高于癌旁組織，差異具有統計學意義(P<0.05)。3種指標均與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結轉移以及TNM分期密切相關，即隨著腫瘤進展而其陽性率增高(P<0.05)。Ki67與p53、EGFR均呈正相關(P<0.05)；p53與EGFR相關性不顯著(P>0.05)。結論 Ki67、p53及EGFR與胃癌的發展關系密切，均可作為判斷胃癌惡性程度及進展情況的可靠指標。

Ki67；p53；EGFR；胃癌；免疫組化

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:037～039)

胃癌是我國最為常見的消化道惡性腫瘤之一，是由內在因素、外在因素、胃部疾病以及吸煙等多因素共同致病，同時也與多種癌基因的激活和抑癌基因的失活有著密切的聯系[1]。有研究表明，Ki67、p53基因以及EGFR均與腫瘤的發生及進展有著重要的關系，然而其三者間在胃癌中的特征性表達相關研究尚不多見[2]。因此，本研究對我院近年來收治的胃癌患者Ki67、p53及EGFR表達情況以及與臨床特征的關系進行了考察分析，以期對3種指標檢測胃癌的臨床意義進行判斷，為臨床輔助診斷提供可靠依據，現進行如下報告。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收取2014年5月至2015年5月間于我科進行病理學檢查的胃癌患者170例作為研究對象，納入標準如下：①患者均經過病理組織學檢查確診為胃癌，且有胃癌組織及癌旁組織病理切片；②患者無其他腫瘤病史，亦不合并其他系統嚴重疾??；③標本采集前均未經其他治療(如放療、化療等)。符合標準的170例患者中包括男性95例，女性75例；年齡28～75歲，平均年齡(48.3±10.2)歲；腫瘤直徑≤50 mm 78例，>50 mm 92例；按照病理組織學分型，可分為腺癌93例，印戒細胞癌77例；腫瘤位于胃體及胃底部66例，胃竇部104例；腫瘤浸潤累及粘膜及粘膜下層者51例，肌層及漿膜層者119例；無淋巴結轉移者105例，有淋巴結轉移者65例；低度分化者112例，中度及高度分化者58例；TNM分期按照AJCC發布的標準，Ⅰ期+Ⅱ期患者共86例，Ⅲ期+Ⅳ期患者共84例。

1.2 試劑與方法

鼠抗人Ki67單克隆抗體、鼠抗人p53單克隆抗體以及鼠抗人EGFR單克隆抗體均購自福州邁新生物技術開發有限公司。所有組織經甲醛脫水固定后進行石蠟包埋，之后使用石蠟切片機將組織連續切片，片厚4 μm。采用免疫組化常規方法鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶法(SP法)進行染色。

1.3 判斷指標

Ki67及p53均定位于細胞核，陽性表達為棕色或黃色顆粒；EGFR定位于細胞質和細胞膜，陽性表達為棕黃色至深棕色。在高倍鏡(400)下進行觀察，取5個視野共計數細胞100個，按照染色強度及陽性細胞所占比例進行評分，具體標準如下：染色后細胞無著色為0分，呈淺黃色為1分，呈棕黃色為2分，呈棕褐色為3分；陽性細胞所占比例<10%為1分，11%～50%為2分，51%～80%為3分，>80%為4分。將染色強度及陽性細胞所占比例得分相乘即為最后陽性判斷結果：總分≥6分為免疫組化陽性。

1.4 統計學方法

應用SPSS 18.0統計學軟件進行分析處理，組間表達情況均為計數資料，以率的形式表示，檢驗方式選擇卡方檢驗。3種標記物表達相關性分析采用Spearman等級相關分析進行。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胃癌組織及癌旁組織中Ki67、p53及EGFR表達情況比較

胃癌組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為71.18%、55.88%及45.29%。癌旁組織中Ki67、p53及EGFR陽性表達率分別為31.76%、12.94%及10.59%。胃癌組織中其陽性表達率均明顯高于癌旁組織，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 胃癌組織及癌旁組織中Ki67、p53及EGFR表達情況比較(例，%)

2.2 Ki67、p53及EGFR表達與胃癌臨床病理特征的關系

對胃癌患者Ki67、p53及EGFR表達情況進行檢測，結果顯示，3種指標表達水平均與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結轉移以及TNM分期密切相關，即隨著腫瘤進展其表達陽性率增高(P<0.05)，在其他如性別、年齡等臨床特征中，3種指標表達差異不顯著(P>0.05)，見表2。

2.3 Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中表達的相關性分析

對3種指標進行Spearman相關性分析，結果顯示，Ki67與p53、EGFR表達均呈正相關(P<0.05)；p53與EGFR表達無顯著相關性(P>0.05)，見表3。

3 討論

作為具有高發病率及高死亡率的惡性腫瘤，胃癌發病往往是1個多基因改變、多因素參與及多階段發生的過程[3]。胃癌的發病可能經歷從胃炎到腸上皮化生及不典型增生等多階段，最終發展至胃癌[4]。這一過程可能伴隨多種分子事件的發生，例如蛋白質、酶等基因水平發生的多種改變[5]。

Ki67是1種核增殖抗原，廣泛存在于細胞有絲分裂的S期、G1期、G2期及M期，是全面反應細胞增殖活性的1項可靠指標[6]。有研究證實，Ki67與腫瘤的發生及發展又密切關系，并且可為腫瘤轉歸及預后提供指導[7]。人類P53基因定位于17號染色體短臂，長度20 kb左右，由11個外顯子和10個內含子組成，是一種被人們廣泛研究的抑癌基因[8]。按照基因型的不同又可將p53基因分為野生型(wtp53)以及突變型(mtp53)。其中野生型P53基因可通過對細胞生長和凋亡進行調控而發揮抑癌作用，而當其轉變成突變型p53后，由于空間構想發生變化，使得原先抑癌作用被改變，而發揮刺激血管內皮生長因子并且調控腫瘤血管生長等促癌作用，導致細胞增殖以及惡性轉化[9]。由于突變型p53蛋白具有不易水解的特性，因此目前采用SP法免疫組化檢測到的均為突變型p53。表皮生長因子受體(EGFR)屬于酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族成員之一，在胃癌中具有高表達。通過與EGFR配體相結合后發生二聚化，激活酪氨酸激酶使酪氨酸殘基發生磷酸化，從而暴露酪氨酸激酶靶蛋白結合位點，激活多條信號通路改變，最終影響細胞增殖與分化[10]。

表2 Ki67、p53及EGFR表達與胃癌臨床病理參數的關系(例，%)

表3 Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中表達的相關性分析

本研究對上述3種蛋白在胃癌腫瘤組織及癌旁組織中的表達情況及相關性進行了分析探討，結果顯示，3種蛋白在胃癌組織中均有高表達，且均與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結轉移以及TNM分期密切相關，證實3種蛋白均與胃癌的進展及惡化密不可分，與文獻報道相符[11]。而對3種蛋白表達情況的相關性進行考察的結果顯示，Ki67與p53、EGFR均呈正相關，提示Ki67與其他2種蛋白可能均有協同促進胃癌發展的作用。而本研究中p53與EGFR相關性不顯著，與文獻報道的不符[12]，這可能與腫瘤的個體差異、收取樣本的例數較少等因素有關，仍需要進行更大規模的分析研究。

綜上所述，Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中呈現高表達，且與腫瘤的發展關系密切，均可作為判斷胃癌惡性程度及進展情況的可靠指標。

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(編輯：吳小紅)

Expression of Ki67,p53 and EGFR in Gastric Cancer and Clinical Significance

QINJuan,YANWei,WANGSanxi,etal.

PathologyDepartment,BaojiPeople’sHospital,Baoji，721000

Objective To explore the expression of Ki67,p53 and EGFR in gastric cancer and clinical significance.Methods 170 patients with gastric cancer underwent pathological test in our department from May 2014 to May 2015 were selected to this study.The expression of Ki67,p53 and EGFR of tumor tissues and para-carcinoma tissues was detected by immunohistochemical method.Results Expression rate of Ki67,p53 and EGFR in gastric cancer tissues was respectively 71.18%,55.88% and 45.29%;in para-carcinoma tissues was respectively 31.76%,12.94% and 10.59%.Expression rate in gastric cancer tissues was obviously higher than para-carcinoma tissues with statistically significance(P<0.05).Positive expression was related to the depth of invasion,degree of differentiation,lymphatic metastasis and TNM stages(P<0.05).Ki67 expression was positively correlated with p53 and EGFR(P<0.05),but correlation between p53 and EGFR had no statistically significance(P>0.05).Conclusion Expression of Ki67,p53 and EGFR has close relation with gastric tumor,which can be used as reliable indexes in judgement of tumor malignancy and development.

Ki67;p53;EGFR;Gastric cancer;Immunohistochemeical

721000 寶雞市人民醫院(秦 娟，王三喜，王海燕，唐曉梅，司婷婷)；710032 解放軍第四軍醫大學西京醫院(晏 偉)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.01.012

R735.2

A

1001-5930(2017)01-0037-03

2016-03-08

2016-10-12)