前體mRNA剪輯蛋白Tra2基因在神經組織中的表達特征發育調控策略研究

張彩霞

（山東中醫藥高等專科學校解剖生理教研室，山東 煙臺 264199）

前體mRNA剪輯蛋白Tra2基因在神經組織中的表達特征發育調控策略研究

張彩霞

（山東中醫藥高等專科學校解剖生理教研室，山東 煙臺 264199）

目的 分析前體mRNA剪輯蛋白Tra2基因在神經組織中的表達特征發育調控策略。方法 使用自制Tra2α1抗血清以及Tra2β蛋白的RA301血清，對不同時期的人類胚胎組織中Tra2蛋白加以檢測。分析相關結果。結果 從11-16周，Tra2β1蛋白在心臟和肺臟內表達量上升。在11周，Tra2α1在脊髓，延髓和小腦內有表達趨勢，腎臟和心臟亦有表達，其余組織無表達。16周，在11周，Tra2α1在神經組織內依然為高水平表達。心臟少量表達，其余組織無表達。結論 Tra2蛋白可經過多方式對某些特異性基因前體mRNA剪輯，對生長發育起到調控作用，心臟以及神經組織的發育依賴于Tra2α1蛋白的調節功能，在11周內，Tra2α1蛋白的剪輯調節功能對于腎臟的發育也存在一定作用。

前體mRNA；Tra2基因；神經組織；表達特征；發育調控

0 引言

Tra2基因具備了前體mRNA剪輯調節蛋白的特點。該物質在水平蛋白上的表達情況，有可能對發育中的一些功能造成影響，由此可見，對前體mRNA剪輯蛋白Tra2基因在神經組織中的表達特征發育調控策略進行研究，有著相當重要的現實意義。有文獻指出，Tra2蛋白在小鼠內以及生長過程中，體現出高水平表達[1]。證實其在神經發育中發揮出了一定作用，但發育情況在人類組織中，尚無系統報道。該項研究對于全面了解Tra2在人類生長發育調控功能有著相當重要的現實意義。

結合實際情況，本文使用自制Tra2α1抗血清和可以檢測Tra2β蛋白的RA301血清對于不同發育期間內人類胎各組織內Tra2蛋白進行檢測，以分析其在神經組織內表達特點，研究發育調控策略，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

使用自制Tra2α1抗血清以及抗全長型以及截短型Tra2β蛋白抗血清為實驗樣本，樣本收采自我院正常流產的11周以及16周胎兒。實驗通過我院醫學倫理委員會審查。

1.2 方法

使用Western blot分析法，將0.1g胚胎組織在0.2裂解液內勻漿處理，以13,000rpm的速度離心15min，選擇上清液于15%SDS-PAGE電泳處理，每種組織蛋白樣本擇取30μg，實施SDS一PAGE分離，后將其轉移至硝酸纖維素膜內，使用劑量為50g的脫脂奶粉L/PBS加以封閉。后以家兔Tra2蛋白抗體視為一抗，羊抗兔IgG一Ap進行二抗檢測，利用BCIp/NBT顯色。另使用βaetin抗體、用于檢測各個組織的β-aetin視為對照。

2 結果

2.1 Tra2α1蛋白于16周和11周人胚組織內表達詳情

在11周，Tra2α1在脊髓，延髓、達到和小腦內呈現出表達趨勢，表達量顯著比其余組織高。除卻神經組織外，腎臟和心臟也檢測出該物質有所表達。但較神經組織弱，剩余組織內未檢出Tra2α1蛋白。在16周，Tra2α1在脊髓，延髓、達到和小腦內呈現出表達趨勢，與11周時相比,心臟心臟組織中Tra2α1表達量下降，在其余組織中未呈現出表達趨勢。由此可見，在11和16周，Tra2α1蛋白分布特異性顯著。

2.2 Tra2β1蛋白于16周和11周人胚組織內表達詳情

在11周，Tra2β1在神經組織內表達數量顯著比非神經組織高。在16周，除卻神經組織內其呈現出較高表達之外，心、肺部組織的表達也顯著比肝臟和腎臟表達量高。

3 討論

假設前體mRNA剪輯蛋白Tra2基因對于生長發育有著一定調節作用，作為功能調節的一個分支，Tra2基因的各個亞型的表達情況收到生長發育各個階段以及組織類型差異性調節影響。有研究證實，Tra2蛋白具備前體mRNA調節特點，蛋白質表達量的多寡可能會對生長發育造成影響[2]。由此可見，探究人胎發育過程內各個組織內Tra2表達特點，有著一定現實意義。

在發育時間為11周以及16周的不同人胚胎組織內，Tra2β1蛋白呈現出了高度表達趨勢，證實在組織發育過程內，在一定程度上依賴于Tra2β1蛋白。其在人體神經組織內高表達，證實神經組織發育對Tra2β1功能需求量高。值得說明的是，在16周胚胎內，心肺組織內的Tra2α1型蛋白表達量上升[3]。證實在該階段內，上述兩種組織的生長對Tra2α1蛋白功能遠高于其余階段。該類型蛋白有著較強的組織特異性，其在神經組織內一直呈現為表達趨勢，其表達量顯著比其他組織高。而在非神經組織內，僅在11周心臟組織內檢測出，其余組織不存在該物質。由此可見，心臟組織和神經質的發育依賴于Tra2α1蛋白的調節功能，在11周內，Tra2α1蛋白的剪輯調節功能對于腎臟的發育也存在現實意義[4]。

當人體神經系統發育時，多種基因表達均會受到剪輯調節。其被選擇性剪輯mRNA轉變為各類和神經功能發育有關的功能蛋白。在此過程內，雖說RNA編輯的多起始翻譯位點以及選擇性多聚磷酸化的使用和翻譯之后的二次加工也提供了幫助，但選擇性前體mRNA剪輯內起到決定性作用的物質依舊為調控因子[5]。Tra2蛋白可經過多方式對某些特異性基因前體mRNA剪輯，進而對神經發育存在影響。在此過程中，Tra2蛋白在不同的組織內含量存在差異即為調節方式之一。值得說明的是，其還能夠利用其它方法，改變影響生長發育過程中前體mRNA剪輯。

[1] 陳獻華, 李舒婧, 李靜,等. Tra2的功能區域在GluR-B基因前體mRNA剪接調控中的作用[C].中國神經科學學會學術會議暨學會成立十周年慶祝大會. 2005.

[2] 杜俊英, 房軍帆, 陳宜恬,等. 電針抗大鼠骨癌痛的參數優選及其對阿片受體和前體mRNA表達的干預[J]. 中國針灸, 2015, 35(2)∶161-168.

[3] 陳獻華,李靜,林萬敏,吳琨,徐平. Tra2β1蛋白在神經特異性的基因剪接中的功能[J]. 實驗生物學報,2004,02∶109-117.

[4] 陳獻華,李靜,孫凱華,林萬敏,徐平. 前體mRNA剪接蛋白Tra2β1的抗體制備及鑒定[J]. 中國生物化學與分子生物學報,2003,02∶190-194.

[5] 李靜. 前體mRNA剪接蛋白ZNF265的表達、調控及功能研究[D].復旦大學,2006.

Study on the developmental characteristics of mRNA protein gene Tra2 in neural tissue and its developmental regulation

Zhang Cai-xia
(Department of anatomy and physiology, Shandong College of Traditional Chinese Medicine, Shandong, China; 264199)

Objective to analyze the developmental characteristics of the precursor mRNA clip protein Tra2 gene in neural tissues. Methods using self-made Tra2 alpha 1 antiserum and Tra2 beta protein RA301 to serum, the detection of Tra2 from human embryonic tissues in different periods in protein. Results were analyzed. Results from 11-16 weeks, Tra2 beta 1 expression in the heart and lungs were increased. In 11 weeks, Tra2 alpha 1 in spinal cord, expression trend have the medulla and cerebellum, heart and kidney is also expressed, no expression of.16 weeks of other organizations, in 11 weeks, Tra2 alpha 1 in neural tissue is still high expression level. The heart a little expression in other tissue expression. Conclusion Tra2 protein can be more For some specific gene precursor mRNA editing, regulation on growth and development, and the development of heart regulating function of nerve tissue dependent on Tra2 protein alpha 1, in 11 weeks, and there are a certain role in the development of the kidney Tra2 alpha 1 protein editing regulation.

Precursor mRNA; Tra2 gene; nerve tissue; expression characteristics; developmental regulation

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.03.03

張彩霞，女，碩士研究生，助教，研究方向：神經發育與神經退行性病變研究。