綿羊瘤胃細菌、原蟲蛋白質分解代謝相關酶活力及谷氨酸脫氫酶體系的米氏常數值

熊文秀 翟衛爽 屯妮薩·麥提賽伊迪 吳 欣 楊開倫

(新疆農業大學，新疆肉乳用草食動物營養重點實驗室，烏魯木齊830052)

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綿羊瘤胃細菌、原蟲蛋白質分解代謝相關酶活力及谷氨酸脫氫酶體系的米氏常數值

熊文秀 翟衛爽 屯妮薩·麥提賽伊迪 吳 欣 楊開倫*

(新疆農業大學，新疆肉乳用草食動物營養重點實驗室，烏魯木齊830052)

本試驗旨在研究綿羊瘤胃細菌、原蟲蛋白質分解代謝相關酶活力及谷氨酸脫氫酶體系的米氏常數(Km)值，為解釋綿羊瘤胃細菌、原蟲蛋白質分解代謝特征提供酶學依據。選用6只1歲左右安裝永久性瘤胃瘺管的中國美利奴(新疆型)綿羊[平均體重為(32.00±1.36) kg]，飼喂精粗比為30∶70的飼糧，依次采集飼喂前(0 h)和飼喂后1.5、3.0、6.0、9.0、12.0 h 6個時間點的瘤胃液，重復采集3次。分離和制備細菌、原蟲破碎液，分別測定相關酶活力及谷氨酸脫氫酶體系的Km值。結果顯示：1)綿羊瘤胃細菌、原蟲破碎液中蛋白酶、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶和谷氨酸脫氫酶的活力隨飼喂時間的延長均呈現先升高后降低的動態變化規律，總體在飼喂后1.5 h達到峰值；谷氨酸和氨含量也呈現相似的變化規律。原蟲破碎液中參與蛋白質分解代謝的這4種酶的活力在各時間點均極顯著高于細菌(P<0.01)。2)原蟲破碎液谷氨酸含量極顯著高于細菌(P<0.01)；原蟲破碎液氨含量在1.5、6.0、9.0和12.0 h顯著或極顯著高于細菌(P<0.05或P<0.01)。3)綿羊瘤胃細菌、原蟲谷氨酸脫氫酶對煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的Km值分別為2.60×10-7、1.48×10-7mol/L；細菌、原蟲谷氨酸脫氫酶對谷氨酸的Km值分別為8.41×10-6、4.91×10-6mol/L；細菌、原蟲谷氨酸脫氫酶對還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的Km值分別為3.80×10-8、2.70×10-8mol/L；細菌、原蟲谷氨酸脫氫酶對α-酮戊二酸的Km值分別為1.16×10-6、2.07×10-6mol/L；細菌、原蟲谷氨酸脫氫酶對氨的Km值分別為2.97×10-5、1.40×10-5mol/L。結果提示，總體上，綿羊瘤胃細菌、原蟲中蛋白酶、谷氨酸脫氫酶、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶的活力在飼喂后1.5 h達到峰值，之后逐漸降低；綿羊瘤胃原蟲中蛋白酶、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶和谷氨酸脫氫酶的活力均極顯著高于細菌，原蟲中蛋白質分解代謝更旺盛；瘤胃原蟲中不僅存在谷氨酸轉氨機制，還可能存在利用氨重新合成氨基酸的機制。

瘤胃；細菌；原蟲；蛋白質分解代謝；酶活力；Km值

1 材料與方法

1.1 試驗動物

本試驗選用平均體重為(32.00±1.36) kg、1歲左右的中國美利奴(新疆型)細毛公羊6只，在試驗前安裝永久性瘤胃瘺管。飼喂精粗比為30∶70的飼糧。每天09:00、21:00各飼喂1次，精料與粗料(玉米秸稈)分2次等量飼喂，將精料與粗料混合后飼喂。……