血清標本保存溫度對乙型肝炎病毒五項指標定量測定的影響

韓來紅 韓 敏 焦 湃 鐘奇峰

（內蒙古呼倫貝爾市人民醫院檢驗科，內蒙古 呼倫貝爾 021008）

血清標本保存溫度對乙型肝炎病毒五項指標定量測定的影響

韓來紅 韓 敏 焦 湃 鐘奇峰

（內蒙古呼倫貝爾市人民醫院檢驗科，內蒙古 呼倫貝爾 021008）

目的分析不同溫度保存下的血清標本對乙型肝炎病毒五項指標半定量測定的影響。方法采集院內進行乙型肝炎病毒五項指標檢查的40例患者的血清標本，一式兩份，分別保存在4 ℃和-20 ℃，于不同時間段，采用羅氏E601型號化學發光儀定量測定乙型肝炎五項指標，并行組內比較。結果在4 ℃環境，14 d，乙型肝炎病毒e抗原和核心抗體結果發生變化，差異有統計學意義（P＜0.05）；而-20 ℃連續保存6月均未見明顯統計學差異（P＞0.05）。結論不同保存溫度對乙型肝炎兩對半定量測定結果可產生較大影響，相對而言，低溫保存（-20 ℃）環境下，結果影響較小。

乙型肝炎病毒；血清；保存溫度

乙型肝炎是由于乙型肝炎病毒（HBV）引起的慢性傳染疾病[1]，其易演變為乙型肝炎肝硬化，最終發展為肝癌，對患者及其家庭帶來嚴重影響。早預防、早診斷、早治療是控制本病的關鍵，乙型肝炎病毒血清學標志物包括：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒表面抗體（抗-HBs）、乙型肝炎病毒e抗體（抗-HBe）、乙型肝炎病毒核心抗體（抗-HBc）五項，是乙型肝炎病毒感染常用檢測項目[2]，在臨床檢測過程，兩對半血清樣品常存儲于冰箱中集中檢測，不同溫度下存儲時間對樣品是否會產生干擾，保存多久后檢測結果會出現較大差異，是臨床檢測人員常需關注的問題。本文由此出發，考察不同溫度下，血清乙型肝炎病毒五項樣品的穩定性，結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2015年2月至2016年4月來我院就診的患者HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc分別陽性的血清樣本40例，排除嚴重溶血、高脂濁、高黃疸樣本。

1.2 方法：檢測人員均空腹采集靜脈血5 mL，采用羅氏化學發光免疫分析儀檢測乙型肝炎五項指標，剩余血液（＞4 mL）分離血清后均分到A、B組，每組血清樣品再次均分為4份，A組樣品保存于（4±2）℃環境，分別于1 d、7 d、14 d、30 d測定乙型肝炎五項指標；B組樣品保存于（-20±2）℃環境，分別于1 d、30 d、90 d、180 d測定乙型肝炎五項指標。所有標本均加塞防止水分蒸發，所有操作均由同一組人員按照標準操作完成。

為排除樣品取出后檢測過程溫度變化的影響，A組實驗前，在室溫平衡半小時后檢測，而B組則放置恒溫（37 ℃）水浴箱待血清融化后再行檢測。

1.3 陽性判斷標準[3]。陽性判斷標準：HBsAg≥0.05 IU/mL為陽性，抗-HBs≥l0 mIU/mL為陽性，其余3項指標均由S/CO值表示（S為標本的吸光度值，CO為cut off值），抗-HBe以S/CO≤1為陽性，其余兩項則以S/CO≥1為陽性。

1.3 統計學處理：應用SPSS20.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均值±標準差（x-±s）的形式表示，不同時間段樣品含量比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用t檢驗，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 A組保存時間對結果影響：A組HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc組內比較，均經F檢驗，結果顯示，HBeAg，抗-HBc不同時間段，差異有統計學意義（P＜0.05），與第1天結果比較顯示，兩組指標均在14 d后出現明顯變化（P＜0.05），而HBsAg，抗-HBs，抗-HBe指標14 d未見明顯變化（P＞0.05），結果見表1。

2.2 B組保存時間對結果影響：B組HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc組內比較，均經F檢驗，第1～120天未見明顯變化（P＞0.05），結果見表2。

3 討 論

HBV為球形雙股環狀DNA病毒，由HBsAg、HBcAg和HBeAg共同組成，當其侵入人體時，HBsAg最先出現于血液中，故當HBsAg陽性即可提示HBV感染，而HBcAg包裹于病毒外膜，不易檢出，但可通過抗-HBc加以分析。目前乙型肝炎五項半定量檢測常用來動態檢測患者療效及病情而被廣泛用于臨床，但在血清樣本檢測過程由于沒有統一規定，多數樣本是保存在冰箱（2～8 ℃）集中檢測，隨著醫患問題加劇，血清樣品常需長期保存以方便復查，故此，血清樣本保存時間、保存溫度成為檢驗人員關注的重點之一。本組研究結果顯示，保存在4 ℃環境下，與第1天比較，血清抗-HBc和HBeAg第14天均發生明顯變化（P＜0.05），其具體改變機制目前尚不可知，推測是因保存過程中一些細菌分泌的蛋白對抗原、抗體有一定分解作用引起；而在-20 ℃環境下，乙型肝炎五項指標放置180 d均未見明顯變化（P＞0.05），這一結果與朱廣君[4]研究基本一致。

由以上結果我們可知，乙型肝炎五項結果血清若存放普通冰箱，建議在1周內完成集中檢測，若時間超出，建議存放-20 ℃冰箱以備檢測，而對于存放-20 ℃中的復檢樣品，為防止物資浪費建議6個月內完成檢測，若需更長時間，建議選擇更低溫度下（如-80 ℃）保存。

[1] 王碧玉,黃燕妮.乙肝兩對半定量,乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原聯合檢測的臨床意義[J].海南醫學,2016,27(7):55.

[2] 魏炘.淺談乙肝二對半定量檢測的臨床意義[J].大家健康,2014,9(17):162.

[3] 胡建慧,殷網虎.血清標本的保存溫度和時間對乙型肝炎兩對半定量測定的影響[J].檢驗醫學與臨床,2007,4(9):810-811.

[4] 朱廣君.不同條件的血清標本對乙肝病毒五項指標定量結果的影響[J].醫藥前沿,2012,2(17):47-48.

R512.6+2 文獻標識碼：B 文章編號：1671-8194（2017）30-0065-02