雙光子顯微鏡在小動物活體光學成像中的研究進展①

張文豪，李建軍，楊德剛，楊明亮，杜良杰，高峰，劉長彬，李大鵬，胡安明，蔡暢

雙光子顯微鏡在小動物活體光學成像中的研究進展①

張文豪1,2a,3,4，李建軍1,2a,3,4，楊德剛1,2a,3,4，楊明亮1,2a,3,4，杜良杰1,2a,3,4，高峰1,2a,3,4，劉長彬1,2a,3,4，李大鵬1,2a,3,4，胡安明1,2b，蔡暢1,2a,3,4

雙光子顯微鏡結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發技術。雙光子熒光顯微鏡具有光損傷小、漂白區域小、穿透能力強、高分辨率、熒光收集率高、圖像對比度高、可實現暗場成像、適合多標記復合測量等多種特點，可應用于小動物活體光學成像，在腫瘤免疫治療、基因治療、干細胞研究、藥物篩選與評價、活體脊髓損傷成像等領域研究中有廣泛應用。

雙光子顯微鏡；活體光學成像；小動物；綜述

[本文著錄格式] 張文豪，李建軍，楊德剛，等.雙光子顯微鏡在小動物活體光學成像中的研究進展[J].中國康復理論與實踐, 2017,23(1):37-41.

CITED AS:Zhang WH,Li JJ,Yang DG,et al.Research progress of two-photon microscopy in small animals in vivo imaging(review)[J].Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian,2017,23(1):37-41.

1931年，Maria G?ppert-Mayer在博士論文中第一次提出原子或分子雙光子激發的理論假設。20世紀60年代初，Kaiser、Garret以及Abella等利用當時剛發明的激光技術，在晶體中觀察到雙光子吸收現象。1976年，Berns第一次報道活細胞中的雙光子效應。1990年Denk等將雙光子激發現象應用到激光共聚焦掃描顯微鏡中，制造出雙光子激光共聚焦顯微鏡[1]。相對于其他成像技術，如超聲(ultrasound)、計算機斷層(computed tomography,CT)、磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、正電子衍射斷層(positron-emission tomography, PET)、單光子衍射計算機斷層(single-photon-emission computed tomography,SPECT)等技術，活體光學成像具有許多獨特的優點：操作簡便、結果直觀、測量快速、靈敏度高以及費用低廉等[2]，尤其是可在活體內實現對分子事件的動態、實時、連續監測，并且能夠揭示生物分子相互作用過程的時間、空間關系[3-11]。……