山海螺的化學成分初步研究

馬秉智 ，王景雁 ，，赫 軍 ，李 棟 ，蘭 頤 ，張迅杰 ，邱 玥 ，陸 進 ?，吳 清

（1.中日友好醫院 藥學部，北京 100029；2.北京中醫藥大學 中藥學院，北京 100102；3.山東達因海洋生物制藥股份有限公司，威海 264300）

技術與方法

山海螺的化學成分初步研究

馬秉智1，王景雁1，2，赫 軍1，李 棟1，蘭 頤3，張迅杰2，邱 玥2，陸 進1?，吳 清2

（1.中日友好醫院 藥學部，北京 100029；2.北京中醫藥大學 中藥學院，北京 100102；3.山東達因海洋生物制藥股份有限公司，威海 264300）

山海螺為桔梗科植物羊乳的根，原植物為Condonopsis lanceolata （Sieb.et Zucc.）Tratv.[Campanumoea lanceolata Sieb.et Zucc.]，味甘、辛，性平，歸脾、肺經，具有益氣養陰、解毒消腫、排膿、通乳之功效。主治神疲乏力、頭暈頭痛、肺癰、乳癰、腸癰、瘡癤腫毒、喉蛾、瘰疬、產后乳少、白帶，毒蛇咬傷[1]。現代藥理學研究表明，山海螺具有抗氧化、改善記憶；鎮靜、鎮痛、抗驚厥作用；保肝、醒酒作用；抗炎，降低血脂、膽固醇，抗癌、抗突變；抗血小板凝集、抗血栓；降低血糖、調節免疫等藥理作用[2]。研究發現，山海螺50%乙醇大孔樹脂洗脫部位含有大量烯炔類化合物，又以黨參炔苷含量最高。另外，烯炔類化合物具有抗癌、抗氧化等作用[3]。通過進行系統的分離純化，共得到：（1）5-羥甲基-2-呋喃甲醛、（2）codonopilodiynoside A、（3）lobetyol、（4）（+）-isolariciresinol、（5）黨參炔苷。其中化合物2～5為烯炔類化合物，1～4為我們首次從該植物中分得，現將結果報告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器

INOVA-500MHz型核磁共振儀（Varian公司，美國），溶劑峰為內標；Agilent1260 series型高效液相色譜儀（Agilent公司，美國）；Aglient Eclipse plus C18 色譜柱（4.6mm×100mm，3.5μm）（Agilent公司，美國）；LC-6AD 型高效液相制備色譜儀（島津公司，日本），YMC-Pack ODS-A色譜柱（20mm×250mm，10μm）（YMC 公司，美國）。

1.2 材料

山海螺供試品由中日友好醫院中藥庫提供（購自北京市鶴延齡藥業發展有限公司，產地：河北，批號：140941），經我院藥學部中藥庫唐永和藥師鑒定為桔梗科黨參屬植物羊乳的根；Sephadex LH-20（GE Healthcare Bio-Sciences AB公司，瑞典）；HP-20型大孔吸附樹脂（三菱株式會社，日本）；甲醇、乙腈為色譜純（美國Fisher公司），其他化學試劑均為分析純，水為高純水。

2 提取與分離

干燥山海螺25kg，用水煎煮3次，加水量分別為15、12、12 倍量，提取時間分別為 2h、1h、1h，提取液濃縮至約30kg后，加95%乙醇至含醇量為60%，放置過夜，分離上清液，減壓濃縮至約3kg，再采用HP-20大孔樹脂柱對濃縮液進行分離純化。上樣后分別用2倍柱體積水、10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇、95%乙醇進行洗脫，得到50%乙醇部位180g。將此部分反復用Sephadex LH-20柱色譜和制備高效液相色譜儀進行分離純化，得到化合物1（10mg）、2（8mg）、3（10mg）、4（20mg）、5（100mg）。

3 結構鑒定

化合物 1：淺黃色油狀物，1H-NMR （DMSO-d6，400 MHz）、13C-NMR （DMSO-d6，100MHz）數據（由于是已知化合物，故略）與文獻[4]報道的5-羥甲基-2-呋喃甲醛數據基本一致。

化合物 2：白色粉末，1H-NMR （DMSO-d6，400MHz）、13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）數據（由于是已知化合物，故略）與文獻[6]報道的codonopilodiynoside A數據基本一致。

化合物 3：淺黃色油狀物，1H-NMR （DMSO-d6，500 MHz）、13C-NMR （DMSO-d6，125MHz）數據（由于是已知化合物，故略）與文獻[7]報道的lobetyol數據基本一致。

化合物 4：淡紅色粉末，ESI-MS（m/z）、1H-NMR（DMSO-d6，400MHz）、13C-NMR（DMSO-d6，100MHz）數據（由于是已知化合物，故略）與文獻[5]報道的（+）-isolariciresinol數據基本一致。

化合物 5：淺黃色油狀物，1H-NMR （DMSO-d6，500 MHz）、13C-NMR （DMSO-d6，125MHz）數據（由于是已知化合物，故略）與文獻[8]報道的黨參炔苷數據基本一致。

4 討論

從前期對山海螺的化學成分和藥理作用研究進展概述[2]可知，山海螺主要含有三萜皂苷類、生物堿類、苯丙醇苷類等化學成分，在這幾類化學成分中，烯炔類化合物紫外光譜特征性最強，呈鋸齒狀，而且在50%乙醇洗脫部位數量最多，其次是30%乙醇洗脫部位，再加上文獻[3]報道過天然炔類化合物具有抗癌、抗炎、抗氧化等生物活性，故筆者課題組先對山海螺50%乙醇洗脫部位進行了分離純化，由于這些烯炔類化合物結構相似、含量極低（黨參炔苷除外），這給分離帶來了很大的難度，因此，這部分僅得到了5個化合物。

目前，山海螺的化學成分和藥效物質基礎還在不斷地探索和研究中，而且這也是值得深入探索的方向，因此，筆者課題組后續將對山海螺30%乙醇、10%乙醇及水洗脫部位進行分離純化，以期在化學成分研究方面取得新的進展，從而為闡明其藥效物質基礎打下一定的基礎。

（致謝：中國醫學科學院北京協和醫學院藥物研究所植化室張培成教授、楊椏楠副教授、分析師王映紅副教授協助完成NMR測定）。

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國家自然科學基金項目（81473365）；北京中醫藥大學自主選題項目（2016-JXS-SX095）。

1* 本文通訊作者。

2017-04-21

2017-06-22