45， X/46， XY 染色體嵌合型伴AZFb c區域缺失無精子癥1例*

劉 鵬 李 靜 孫建明 練 鋒

1. 上海市第七人民醫院男性病科（上海 200137）；

2. 上海市第七人民醫院檢驗科； 3. 上海市第七人民醫院超聲診斷科

·臨床經驗·

45， X/46， XY 染色體嵌合型伴AZFb c區域缺失無精子癥1例*

劉 鵬1李 靜2孫建明1練 鋒3

1. 上海市第七人民醫院男性病科（上海 200137）；

2. 上海市第七人民醫院檢驗科； 3. 上海市第七人民醫院超聲診斷科

染色體核型異常和相關基因的缺失、突變是引起男性不育的重要原因，患者多表現為無精子癥、少精子癥、性分化異常等。近些年來有關Y染色體微缺失檢測的分子生物學分析越來越深入［1］。本文報道一例子代新生突變引起的Y染色體嵌合體核型合并Y染色體AZFbc區缺失無精子癥，報道如下。

資料與方法

患者，男，28歲，2015年5月因婚后兩年不育來本院門診就診，婚后未采取避孕措施且性生活正常，無吸煙史，不酗酒，第二性征正常，身高167cm，體質量56kg，生殖系統無器質性病變、無外傷，精液細菌培養陰性，支原體、衣原體檢查陰性，血清抗精子總抗體陰性，體檢未發現有明顯睪丸、附睪及輸精管異常，前列腺、精索靜脈超聲檢查均未見異常。采用奧林巴斯CX31型顯微鏡及清華同方彩色精子自動分析系統，按參考文獻［2］分析精液3次均未見精子（擇日復查2次），精液離心后沉渣涂片Diff-Quik染色鏡檢未見精子、生精細胞及白細胞。血清性激素檢測結果均正常，精漿果糖、酸性磷酸酶、α-葡糖苷酶和鋅定量檢測均正常。其配偶年齡27歲，身高160cm，體重50kg，血清性激素、支原體衣原體檢測均正常，血清抗精子總抗體陰性、封閉抗體正常，染色體檢查符合46， XX核型，經婦科檢查未發現輸卵管異常，卵泡監測等均正常。其父母非近親結婚，其父經染色體核型分析結果為46， XY， Y染色體微缺失檢測正常。患者有一長兄，已婚已育，染色體核型分析及Y染色體微缺失檢測均正常。

結 果

一、精液分析

患者3次精液分析結果均未見精子，精液離心后沉渣涂片Diff-Quik染色鏡檢亦均未見精子、生精細胞及白細胞，確診為無精子癥。行精漿生化指標檢測，結果顯示：果糖（FRU）23.12mmol/L，酸性磷酸酶（ACP）1672U/mL，α-葡糖苷酶（α-GLUC）410.5 mmol/L，鋅（Zn）2.67 mmol/L，各項指標均正常（正常參考值：FRU 11.01～43.07mmol/L，ACP 258～2092U/mL，α-GLUC 109.6～570.8 mmol/L，Zn 1.09～4.86 mmol/L）。

二、血清性激素檢測

患者血清睪酮（T） 8.62nmol/L，催乳素（PRL）136.14mIU/L，促黃體生成激素（LH）5.54 mIU/mL，雌二醇（E2）53.00pmol/L，促卵泡成熟激素（FSH）10.34 mIU/mL，孕酮（P）0.60 nmol/L，血清性激素各項均正常（正常參考值：T 4.94～32.01nmol/L，PRL 72.66～407.40mIU/L，LH 0.57～12.07 mIU/mL，E2 40.37～161.48pmol/L，FSH 0.95～11.95 mIU/mL，P 0.32～0.64 nmol/L）。

三、染色體核型分析

患者染色體核型顯示為性染色體嵌合型，45，X/46， XY， Yqh-，比例為5:25。共計數30個細胞，見5個細胞核型為45， X，缺失一條性染色體；25個細胞核型為46， XY， Yqh-，Y染色體長臂異染色質區減少。見圖1。

四、Y染色體微缺失分析

患者6個STS位點多重PCR檢測顯示：AZFa區域sY84和sY86位點存在，但AZFb和AZFc區域位點sYl27、sYl34、sY254、sY255均缺失。SRY基因存在，見圖2。

討 論

無精子癥和少精子癥患者在男性不育門診較常見，經常規檢查不明原因的無精子癥患者也很常見，相關文獻報道，由遺傳缺陷所引起的精子發生障礙約占男性不育因素30%［3，4］。染色體核型異常可由親代遺傳或子代新生突變而發生。具有兩種或兩種以上細胞系的個體稱為嵌合體［5］。Y染色體上有3個與生精功能相關的區域，分別為AZFa、AZFb、AZFc，任何一個區域或多個區域的位點缺失都會導致精子發生障礙。本文患者染色體核型顯示為性染色體嵌合型，45， X/46， XY， Yqh-，且合并AZFb和AZFc區域位點sYl27、sYl34、sY254、sY255缺失。患者存在部分Y染色體缺失和部分小Y染色體，小于21號染色體。雖然患者第二性征沒有明顯改變，但Y染色體異常已經直接影響到患者睪丸生精功能。而患者這些STS位點的缺失是導致無精子癥的最直接原因。此類染色體異常核型在臨床中不如克氏綜合征、Turner綜合征等常見，但在無精子癥患者中，我們仍需要高度重視。鑒于患者長兄已婚已育，染色體核型及Y染色體微缺失檢查均正常，本文患者出現染色體核型異常屬子代新生突變引起。相關文獻報道［6-8］，經ICSI治療后，父親有可能將AZF缺失遺傳給男性后代，尤其是AZFc區域位點的缺失，且該區域位點缺失比較常見，約占60%。另外，有文獻報道，AZFb區域位點缺失的患者約占Y染色體微缺失的3%～5%，表現為精子成熟障礙，不能行經皮睪丸精子抽吸術或顯微切割睪丸取精技術［9，10］。因此為避免將遺傳缺陷傳給下一代，建議此類患者配偶接受供精人工受精，減少或停止不必要的藥物治療。

圖1 患者染色體核型分析結果

圖2 多重PCR擴增產物電泳圖注： 1：正常男性A組位點（ZFX/ZFY、SRY、sY134、sY84、sY255）；2：患者A組位點（ZFX/ZFY、SRY、sY134、sY84、sY255）；M：Marker（分子量從上到下依次為2 000bp， 1 000bp，750bp， 500bp， 250bp， 100bp）；3：正常男性B組位點（ZFX/ZFY、SRY、sY254、sY127、sY86）；4：患者B組位點（ZFX/ZFY、SRY、sY254、sY127、sY86）；圖中1、2泳道條帶順序從上到下依次為ZFX/ZFY、SRY、sY134、sY84、sY255； 其中3、4泳道條帶順序從上到下依次為ZFX/ZFY、SRY、sY254、sY127、sY86

無精子癥； 染色體， 人， Y； 核型畸變

1 孫寶剛， 粱魯南， 曹井賀， 等. 嚴重少精子癥和無精子癥患者染色體核型與Y染色體微缺失檢測的應用. 中國男科學雜志 2013； 27（5）: 41-44

2 世界衛生組織. 人類精液檢查與處理實驗室手冊. 第5版. 北京: 人民衛生出版社， 2011: 10-20

3 Martin RH. Cytogenetic determinants of male fertility. Hum Reprod Update 2008； 14（4）: 379-390

4 蔡志明. Y染色體及其微缺失與男性不育: 過去、現在與將來. 中國男科學雜志 2010； 16（5）: 387-394

5 戴汝琳， 王瑞雪， 張志紅， 等. 兩例Y 染色體嵌合體核型合并Y 染色體微缺失病例分析. 中國實驗診斷學 2010；14（9）: 1393-1396

6 Kamischke A， Gromoll J， Simoni M， et al. Transmission of Y chromosome deletion involving the deleted in azoospermia（DAZ） and chromadomain protein 1 （CDYI）genes from father to son through ICSI. Hum Reprod 1999； 14（9）: 2320-2322.

7 Lee SH， Ahn SY， Lee KW， et al. Intracytoplasmic sperm injection may lead to vertical transimission，expansion，anddenovo occurrence of Y-chromosome microdeletions in male fetuses. Fertil Steril 2006； 85（5）: 1512-1515

8 Kleiman SE， Almog R， Yogev L， et a1. Screening for partial AZFa microdeletions in the Y chromosome of infertile men: is it of clinical relevance. Fertil Steril 2012；98（1）: 43-47

9 Soares AR， Costa P， Silva J， et a1. AZFb microdeletions and oligozoospermia-which mechanisms. Fertil Steril 2012； 97（4）: 858-863

10 韓瑞玲， 李艷， 童永清， 等. 無精癥及嚴重少精癥Y染色體微缺失和生殖激素水平研究. 現代檢驗醫學雜志2014； 29（1）: 42-43，47

（2015-06-30收稿）

資助： 上海市浦東新區傳統型臨床示范學科項目（PDZYXK-3-2013001）；上海市第七人民醫院人才培養計劃項目（XX2014-08）

10.3969/j.issn.1008-0848.2015.11.012

R 698.2