醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定

朱劍鋒

（西山煤電有限責(zé)任公司古交礦區(qū)總醫(yī)院鎮(zhèn)城底分院，山西 太原 030203）

醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定

朱劍鋒

（西山煤電有限責(zé)任公司古交礦區(qū)總醫(yī)院鎮(zhèn)城底分院，山西 太原 030203）

目的 研究測(cè)定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑相關(guān)物質(zhì)的方法。方法 應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定，色譜柱為Venusil ASBC18，流動(dòng)相A是甲醇-0.077醋酸銨溶液（20∶80，v/v，PH值調(diào)節(jié)到4.5），相B是甲醇-乙腈（40∶60，v/v），梯度洗脫的流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)是225 nm，溫度為35℃，進(jìn)樣量是10 μl。結(jié)果 硝酸益康唑與其他雜志分離度較好，在0.2～100.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)硝酸益康唑的峰面積和濃度間有良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。結(jié)論 應(yīng)用HPLC測(cè)定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關(guān)物質(zhì)，簡(jiǎn)單有效，應(yīng)用價(jià)值顯著。

硝酸益康唑；HPLC；醋酸曲安奈德益康唑乳膏；應(yīng)用效果

醋酸曲安奈德益康唑乳膏是臨床廣泛治療真菌所致皮膚病的一種藥物，具有止癢、抗過(guò)敏、抗炎和抗真菌的效果，該藥物的主要物質(zhì)有硝酸益康唑、曲安西龍和其他3個(gè)單個(gè)未知物質(zhì)。為了提高該藥物的治療，對(duì)醋酸曲安奈德益康唑乳膏中的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定非常重要。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

儀器：德國(guó)諾爾的高效液相色譜儀，型號(hào)為KNAUER S-2500；北京普析的紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，型號(hào)為TU-1810；分析天平，型號(hào)為Acculab ALC-110.4；鞏義市英峪予華儀器廠的水浴鍋；乙腈；甲醇；色譜柱。

試藥：武漢諾安藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的醋酸曲安奈德益康唑乳膏；自制的空白敷料樣品，不含有硝酸益康唑物質(zhì)，其他成分均與樣品一樣；江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司的醋酸曲安奈德益康唑乳膏；中國(guó)食品藥品檢定研究院所提供的硝酸益康唑?qū)φ掌罚挥蓺W洲藥典委員會(huì)提供的硝酸益康唑系統(tǒng)適用性的對(duì)照樣品；硝酸益康唑雜志的A、B、C對(duì)照品，乙腈、甲醇為色譜純，其他作為分析純。

1.2 方法

應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定，色譜柱為Venusil ASBC18，流動(dòng)相A是甲醇-0.077醋酸銨溶液（20∶80，v/v，PH值調(diào)節(jié)到4.5），相B是甲醇-乙腈（40∶60，v/v），梯度洗脫的流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)是225 nm，溫度為35℃，進(jìn)樣量是10 μl。

溶液制備：包含樣品溶液、對(duì)照品溶液、空白敷料對(duì)照溶液。樣品溶液制備，將2.5 g的醋酸曲安奈德益康唑乳膏置于燒杯中，并加入15 ml的甲醇，在80攝氏度水浴中進(jìn)行2 min加熱，然后將其移入25 ml量瓶中，充分搖勻，冷卻后進(jìn)行過(guò)濾，將續(xù)綠葉放置至常溫備用；對(duì)照品溶液制備，將10 mg硝酸益康唑置入100 ml量瓶中，加入甲醛讓其稀釋、搖勻后作為對(duì)照品儲(chǔ)備液待用；將適量硝酸益康唑系統(tǒng)適用性對(duì)照品用甲醛稀釋為濃度1 mg/ml；分別取10 mgA、B、C對(duì)照品用甲醛稀釋為濃度為10 ug/ml，作為對(duì)照品溶液。

完成溶液制備后進(jìn)行專屬性考察和破壞試驗(yàn)，破壞試驗(yàn)又包含酸破壞試驗(yàn)、堿破壞試驗(yàn)、光破壞試驗(yàn)、熱破壞試驗(yàn)以及氧化破壞試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、樣品溶液穩(wěn)定型試驗(yàn)、定量限以及檢測(cè)限研究、重復(fù)性試驗(yàn)和線性關(guān)系試驗(yàn)。

2 結(jié) 果

硝酸益康唑與其他雜志分離度較好，在0.2～100.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)硝酸益康唑的峰面積和濃度間有良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。

3 討 論

在測(cè)定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關(guān)物質(zhì)成本中應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：（1）檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇，由于醋酸曲安奈德和硝酸益康唑在最大吸收波長(zhǎng)方面存在差異，為了更精準(zhǔn)的測(cè)定雜質(zhì)種類與控制雜質(zhì)限度，應(yīng)根據(jù)原料藥項(xiàng)下的相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。硝酸益康唑原料藥的檢測(cè)波長(zhǎng)為225 nm，并將2250 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)；（2）雜質(zhì)相對(duì)保留時(shí)間，用硝酸益康唑系統(tǒng)適用性對(duì)照品溶液以及A、B、C雜質(zhì)對(duì)照品溶液根據(jù)色譜條件，分別進(jìn)樣2針，結(jié)果雜質(zhì)A的相對(duì)保留時(shí)間為0.3，雜質(zhì)B的相對(duì)保留時(shí)間為0.7，雜質(zhì)C的相對(duì)保留時(shí)間為0.9；（3）雜質(zhì)限度，對(duì)比中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)與歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn)中硝酸益康唑原料藥的檢測(cè)方法，在雜質(zhì)限度控制方面歐洲藥典更佳嚴(yán)格，對(duì)雜質(zhì)A、雜質(zhì)B和雜質(zhì)C分別制定了限度。除此之外，歐洲藥典與中國(guó)藥典相比較，對(duì)未知的單雜質(zhì)和總雜質(zhì)的限度標(biāo)準(zhǔn)更加嚴(yán)格。此次研究，通過(guò)專屬性考察和破壞試驗(yàn)，破壞試驗(yàn)又包含酸破壞試驗(yàn)、堿破壞試驗(yàn)、光破壞試驗(yàn)、熱破壞試驗(yàn)以及氧化破壞試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、樣品溶液穩(wěn)定型試驗(yàn)、定量限以及檢測(cè)限研究、重復(fù)性試驗(yàn)和線性關(guān)系試驗(yàn)等，最終得出硝酸益康唑與其他雜志分離度較好，在0.2～100.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)硝酸益康唑的峰面積和濃度間有良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=15.6295x+4.5920（r=0.99997）。

綜上所述，應(yīng)用HPLC測(cè)定醋酸曲安奈德益康唑乳膏中硝酸益康唑有關(guān)物質(zhì)，簡(jiǎn)單有效，應(yīng)用價(jià)值顯著。

[1]齊憲榮,劉海燕,劉明輝,等.RP-HPLC測(cè)定硝酸益康唑脂質(zhì)體凝膠中硝酸益康唑的含量[J].中國(guó)新藥雜志,2001,10(5):360-362.

[2]楊曉莉,席志芳,繩金房,等.反相離子對(duì)高效液相色譜梯度洗脫測(cè)定復(fù)方硝酸益康唑乳膏含量[J].中國(guó)抗生素雜志,2004,29(7):403-405.

R927.2

B

ISSN.2095-6681.2017.26.149.01

本文編輯：吳宏艷