枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液的配伍穩定性考察

洪振賢，林淑瑜，陳志民，王佳坤，甘惠貞

枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液的配伍穩定性考察

洪振賢，林淑瑜，陳志民，王佳坤，甘惠貞*

目的 考察枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中的穩定性。方法 采用高效液相色譜法測定枸櫞酸芬太尼注射液、咪達唑侖注射液與0.9%氯化鈉注射液配伍后的含量變化，同時觀察配伍溶液的外觀、pH值變化。結果 枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液配伍溶液在室溫條件下24 h內外觀、pH值未見明顯變化，芬太尼注射液和咪達唑侖含量均>98%。結論 枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中配伍后于室溫放置24 h內性質基本穩定。

枸櫞酸芬太尼；咪達唑侖；配伍穩定性；HPLC

0 引言

1 儀器和試藥

Ultimate3000高效液相色譜儀(戴安中國有限公司)；JA2003電子分析天平(上海方瑞儀器有限公司)；PHS-3C型實驗室pH計(上海誠寧環保科技有限公司)；注射器；移液槍；枸櫞酸芬太尼標準品(中國藥品生物制品檢定所，批號：171268-201001，HPLC純度≥98%)；咪達唑侖標準品(中國藥品生物制品檢定所，批號：171270-201402，HPLC純度≥98%)；枸櫞酸芬太尼注射液(湖北宜昌人福藥業有限公司，規格：10 mL∶0.5 mg，批號分別為1141006、2130109、1140704)；咪達唑侖注射液(江蘇恩華藥業有限公司，規格：2 mL∶10 mg，批號分別為20150112、20150401、20150719)；0.9%氯化鈉注射液(四川太平洋藥業有限公司，規格：100 mL，批號：B1511024 2)；乙腈(美國進口Fisher，色譜醇)、磷酸二氫鉀(美國進口MREDA，色譜醇)、磷酸(美國進口MREDA，色譜醇)、三乙胺(美國進口MREDA，色譜醇)；水為超純化水(本院消毒供應室提供)。

2 方法與結果

2.1 溶液的配制 ①對照品溶液的制備：取4 mg枸櫞酸芬太尼標準品，60 mg咪達唑侖標準品，分別置于10 mL容量瓶，加流動相稀釋至刻度，避光、室溫下保存。②配伍溶液的制備：模擬臨床ICU機械通氣患者鎮靜給藥方案，取1支枸櫞酸芬太尼注射液，5支咪達唑侖注射液，共同置于50 mL容量瓶，加0.9%氯化鈉注射液稀釋至刻度，避光、室溫下保存。③稀釋溶液的制備：取10 mL配伍溶液，置于50 mL容量瓶，加流動相稀釋至刻度，避光、室溫下保存。

2.2 色譜條件和系統適應性試驗 色譜柱：Acclaim C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：0.033 mol/L磷酸二氫鉀溶液(三乙胺調pH值至3.50)-乙腈(60∶40)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：205 nm；進樣量：10 μL。在此色譜條件下，芬太尼與咪達唑侖完全分離，色譜峰峰形良好，保留時間分別約為5.780、6.910 min，陰性對照品溶液對測定無干擾，見圖1。

圖1 芬太尼與咪達唑侖的高效液相色譜圖

2.3 標準曲線的制備 精密量取上述枸櫞酸芬太尼對照品溶液1 mL，置10 mL容量瓶，加流動相稀釋至刻度。再分別精密吸取一定量，稀釋制成濃度分別為40、30、20、10、5、2.5 μg/mL的溶液。在“2.2”項色譜條件下，分別進樣10 μL。以濃度(C)為橫坐標、峰面積(A)為縱坐標，進行線性回歸，得標準曲線方程A=0.665 6 C-0.219 2，r=0.999 9。結果表明，芬太尼在2.5～40 μg/mL濃度范圍內與其峰面積有良好的線性關系；精密量取咪達唑侖對照品溶液1 mL，置10 mL容量瓶，加流動相稀釋至刻度。再分別精密吸取一定量，稀釋制成濃度分別為600、400、200、100、50、20、10 μg/mL的溶液。在“2.2”項色譜條件下，分別進樣10 μL。以濃度(C)為橫坐標、峰面積(A)為縱坐標，進行線性回歸，得標準曲線方程A= 0.839 3 C-6.394 6，r=0.999 6。結果表明，咪達唑侖在10～600 μg/mL濃度范圍內與其峰面積有良好的線性關系。

2.4 重復性試驗 取同一批樣品，按“2.1”項配伍溶液配制方法平行制備6份，分別稀釋成高、中、低3種不同濃度，進樣，計算峰面積，得芬太尼的重復性RSD分別為0.30%、0.15%、0.34%；咪達唑侖的重復性RSD分別為0.20%、0.15%、0.26%，結果表明重復性良好。

2.5 精密度試驗 分別制備高、中、低3種不同濃度的枸櫞酸芬太尼對照品溶液(30、20、5 μg/mL)和咪達唑侖對照品溶液(300、200、20 μg/mL)各6份，同日測定并連續測定6 d，計算峰面積，得芬太尼的日內精密度RSD分別為0.05%、0.05%、0.15%，日間精密度RSD分別為0.16%、0.12%、0.16%；咪達唑侖的日內精密度RSD分別為0.09%、0.15%、0.28%，日間精密度RSD分別為0.19%、0.20%、0.45%。結果表明精密度良好。

2.6 加樣回收率試驗 精密量取已知含量的配伍溶液9份各1 mL，置于5 mL的容量瓶中，分別加入已知濃度的枸櫞酸芬太尼對照品溶液和咪達唑侖對照品溶液0.8、1、1.2 mL，每個濃度平行3份，加流動相稀釋至刻度，搖勻，取10 μL進樣，計算回收率和RSD，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果(n=9)

注：F.芬太尼;M.咪達唑侖

2.7 穩定性試驗 精密量取一定量的高、中、低3種不同濃度的枸櫞酸芬太尼對照品溶液(30、20、5 μg/mL)和咪達唑侖對照品溶液(300、200、20 μg/mL)，分別在0、4、8、12、16、24 h進樣分析，以0 h的含量為100.00%，換算百分含量，得枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液的百分含量均在99.82%～100.18%范圍內。結果表明，對照品溶液室溫條件下放置24 h穩定性良好。

2.8 配伍穩定性試驗

2.8.1 外觀與pH值變化 精密量取一定量的“2.1”項配伍溶液，分別在0、4、8、12、16、24 h采用0.9%氯化鈉注射液作對照，觀察是否有顏色變化、氣體、沉淀、渾濁產生，并采用pH計測定配伍溶液pH值變化，結果見表2。

表2 枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液配伍液穩定性結果(n=6)

注：“—”表示無色澄清、無氣體沉淀產生、無明顯變化

2.8.2 相對百分含量變化 精密量取一定量的“2.1”項配伍溶液，分別在0、4、8、12、16、24 h進樣分析，以0 h的含量為100.00%，換算百分含量，得各個時間點相對百分含量，結果見表2。

3 討論

3.1 咪達唑侖與芬太尼同時測定的方法學探索

3.1.1 檢測波長的選擇 參考有關文獻[8-9]，分別選擇195、200、205、210、220 nm作為檢測波長，對芬太尼和咪達唑侖進行HPLC圖譜的直觀比較。結果表明，195、210 nm檢測波長下，所得圖譜特征峰分離度差，含量低，磷酸鹽緩沖溶液在210 nm附近也有較強吸收，形成一定的干擾峰，使得本底值提高，靈敏度降低，影響測定；芬太尼的最大吸收波長為200、205 nm，咪達唑侖的最大吸收波長為220 nm，由于臨床配伍用藥中芬太尼的用量(10 μg/mL)明顯低于咪達唑侖的用量(1 mg/mL)，同時在200、205 nm檢測波長下，咪達唑侖也可獲得較大吸收，但在200 nm檢測波長下基線不易平穩，故選擇205 nm作為檢測波長，能兼顧兩種物質的檢測靈敏度，達到良好分離檢測的目的。

3.1.2 流動相的選擇 2015年版《中國藥典》(二部)枸櫞酸芬太尼注射液的含量測定采用高效液相色譜法[10]，該法所選用的流動相為含0.1%無水硫酸鈉與0.2%醋酸銨的溶液-甲醇-乙腈(4∶3∶1)(用冰醋酸調節pH值至6.3±0.1)；咪達唑侖注射液的含量測定項下流動相為磷酸鹽緩沖溶液(取同體積0.1 mol/L磷酸溶液與0.03 mol/L三乙胺溶液混合，用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液調節混合液的pH值至3.5)-甲醇(35∶65)，配制均較為復雜。結合參考有關文獻[10-13]，本實驗采用0.033 mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈為流動相，通過調整比例為(60∶40)，得到分離度良好、出峰時間適宜的色譜圖。

3.2 配伍穩定性試驗結果分析 參考臨床ICU機械通氣患者鎮靜給藥方案[16-17]，“2.1”項配伍溶液體積為50 mL；兩藥品說明書標注的通用溶媒為0.9%氯化鈉注射液。2015年版《中國藥典》(二部)附錄規定[10]，對標示裝量100 mL或100 mL以上的靜脈用注射液進行微粒控制，而對標示裝量100 mL以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料藥未做要求。結合參考文獻[18]，本實驗不探討不溶性微粒變化。

配伍穩定性試驗結果顯示，枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中配伍后，于室溫放置24 h內，配伍溶液外觀澄清，溶液顏色無明顯變化，無氣體、沉淀、渾濁產生，pH值無明顯變化，說明兩藥配伍后，未發生明顯物理化學變化。同時經高效液相色譜法測定，色譜圖未見其他吸收峰，最大吸收峰位均未移動，枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液的含量均>98%，均符合2015年版《中國藥典》(二部)相關規定。

綜上所述，枸櫞酸芬太尼注射液和咪達唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中配伍后于室溫放置24 h內性質基本穩定，表明臨床上可將兩藥配伍使用。

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Compatible stability of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection

HONG Zhen-xian,LIN Shu-yu,CHEN Zhi-min,WANG Jia-kun,GAN Hui-zhen*

(Department of Pharmacy,180th Hospital of PLA,Quanzhou 362000,China)

Objective To study the compatible stability of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection.Methods The changes in the contents of fentanyl citrate injection and midazolam injection were determined simultaneously by HPLC,and the changes in appearance and pH value were observed at the same time.Results No significant difference was found in terms of the appearance and pH value of the mixture solution within 24 h,the content of fentanyl and midazolam were both more than 98%.Conclusion The mixture of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection is stable within 24 h after mixing.

Fentanyl citrate;Midazolam;Compatible stability;HPLC

2016-05-31

解放軍第180醫院藥學科，福建 泉州 362000

解放軍第180醫院科研項目(2014D3011)

10.14053/j.cnki.ppcr.201612022

*通信作者