GDF3聯合檢測血清PSA與MUC1蛋白水平對乳腺癌診斷的臨床意義①

邱小蘭，韓學東，施建華，任 毅

(南京醫科大學附屬淮安第一醫院甲乳外科，江蘇 南京 223399)

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GDF3聯合檢測血清PSA與MUC1蛋白水平對乳腺癌診斷的臨床意義①

邱小蘭，韓學東，施建華，任 毅

(南京醫科大學附屬淮安第一醫院甲乳外科，江蘇 南京 223399)

目的：探討GDF3聯合檢測血清PSA與MUC1蛋白水平對乳腺癌診斷的臨床意義。方法：選取2013年3月至2014年12月于甲乳外科已確診為乳腺癌的患者50例作為乳腺癌組；同期選取在我院住院的乳腺良性疾病患者50例作為乳腺良性疾病組；同期選取在我院體檢中心體檢的健康女性50例作為正常組。通過檢測兩組血清GDF3、PSA、MUC1和腫瘤標志物的表達水平，對比分析其敏感度、特異度和準確度。結果：乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1表達水平均高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均具有統計學意義(P<0.05)，CA15-3、CA125、CEA表達水平均高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均具有統計學意義(P<0.05)；PSA+MUC1兩兩檢測的敏感度、特異度、準確度均高于其他兩組(P<0.05)；血清GDF3、PSA、MUC1三者聯合其敏感度、特異度、準確度高于1單項檢測以及兩兩檢測，差異均具有統計學意義(P<0.05)。結論：GDF3聯合檢測PSA和MUC1對乳腺癌的早期診斷更有確診意義。

乳腺癌； GDF3； PSA； MUC1； 腫瘤標志物

據世界衛生組織國際癌癥研究中心發布數據統計，2008年全球女性乳腺癌新診斷病例約138.4萬例，死亡45.9萬例，且近年來其發病率呈年輕化及升高趨勢[1]。人生長分化因子3(growth differentiation factor 3，GDF3)是轉化生長因子-β(TGF-β)中的重要成員，研究發現其與脂肪生成、早期胚胎發育有重要關系，還在在乳腺癌的發生發展中起到重要的作用[2]。目前尚未見到GDF3聯合檢測血清PSA與MUC1蛋白水平診斷乳腺癌，因此，本研究通過聯合檢測上述指標，為乳腺癌的早期診斷尋求一種更好的方法。

1 資料與方法

1.1 臨床資料:收集本院甲乳外科2013年08月至2014年12月確診為乳腺癌的患者50例，乳腺良性疾病50例，同時隨機選取在我院體檢健康的50例正常人。研究對象均為女性，年齡45～70歲。乳腺癌組年齡45～69歲，平均58.24±6.46歲，二期29例，三期21例。乳腺良性疾病組年齡46～70歲，平均57.93±6.85歲，乳腺增生11例，乳腺纖維瘤26例，乳腺囊腫13例。正常人組年齡45～70歲，平均年齡57.84±6.79歲，為正常體檢患者。納入標準：①診斷標準依據我國《中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2011版)》[3]。②乳腺癌患者自發病以來未進行系統的化療、放療等治療；③患者及家屬志已簽署知情同意書。排除標準：①合并嚴重的心、肝、腎功能不全；②合并心肌梗死、心力衰竭者；③合并白血病等嚴重的原發疾??；④患有精神疾病，無法配合實驗的患者。

1.2 研究方法:所有研究對象均在清晨空腹采集4mL肘靜脈血，若有研究對象需進行乳腺手術，則在術前采集靜脈血。將靜脈血裝入未加抗凝劑的采血管中，靜置于室溫下20min，將采血管按3000r/min離心10min，待離心結束后將上層血清用Ependorff管裝入EP管中，每管0.5～1mL，分別編碼，放入-80℃冰箱中保存備用。

1.3 觀察指標及檢測方法

1.3.1 GDF3、PSA與MUC1采用雙抗體夾心法檢測患者血清GDF3、PSA與MUC1濃度水平。分次將GDF3、PSA與MUC1加入相應抗體免疫實驗微孔板，使其與HRP標記的相應抗體結合進而形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，加底物TMB顯色，并不斷實現顏色的變化。采用全自動酶標儀測定標本血清中的GDF3、PSA、MUC1濃度的吸光度(OD值)，最終通過繪制標準曲線精確計算標品中的GDF3、PSA、MUC1濃度。

1.3.2 PCA15-3、CA125與CEA:本研究采用電化學發光法檢測所有研究對象血清中PCA15-3、CA125與CEA的濃度。采用有分離膠的真空管收集患者血清，將樣本、定標液和質控品在室溫(20℃左右)下平衡后并放置于ROCHE E601電化學分析儀的試劑盤內在2h內完成檢測。

1.3.3 敏感度、特異度與準確度的計算方法[4]:敏感度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%；特異度=真陰性/(真陰性十假陽性)×100%；準確度=(真陽性+真陰性)/(真陽性+真陰性+假陽性+假陰性)×100%

2 結 果

2.1 三組血清GDF3、PSA、MUC1水平比較:本研究顯示，乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1表達水平均高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均有統計學意義(P<0.05)；良性乳腺疾病組和正常組血清GDF3、PSA、MUC1表達水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 三組患者血清GDF3、PSA、MUC1表達水平比較

注：*P<0.05，與乳腺癌組比較 compared with breast cancer group；#P>0.05，與正常組比較 compared with control group

2.2 三組血清腫瘤標志物水平比較:本研究中，乳腺癌組血清CA15-3、CA125、CEA水平高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均有統計學意義(P<0.05)；良性乳腺疾病組和正常組血清CA15-3、CA125、CEA水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 三組血清腫瘤標志物單項檢測比較

注：*P<0.05，與乳腺癌組比較 compared with breast cancer group

2.3 乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1表達水平的敏感度、特異度、準確度情況:本研究顯示，乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1單項檢測，其敏感度依次為：PSA>MUC1>GDF3，特異度依次為：MUC1>PSA>GDF3，準確度依次為：PSA>MUC1>GDF3。見表3。

2.4 血清GDF3、PSA、MUC1表達水平聯合檢測其敏感度、特異度、準確度情況:本研究顯示，血清GDF3、PSA、MUC1兩兩聯合檢測，PSA+MUC1的敏感度、特異度、準確度均高于其他兩組，差異有統計學意義(P<0.05)；血清GDF3、PSA、MUC1三者聯合其敏感度、特異度、準確度高于單項檢測以及兩兩檢測，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表3 血清GDF3 PSA MUC1表達水平的敏感度特異度準確度情況n(%)

表4 血清GDF3、PSA、MUC1聯合檢測其敏感度、特異度、準確度情況n(%)

注：*P<0.05，與GDF3+PSA、MUC1+GDF3比較 Compared with GDF3+PSA and MUC1+GDF3;#P<0.05，與與GDF3+PSA、PSA+MUC1及MUC1+GDF3比較 Compared with GDF3+PSA ,PSA+MUC1 and MUC1+GDF3

3 討 論

本研究通過對乳腺癌患者、乳腺良性疾病患者以及正常人群血清GDF3、PSA、MUC1表達水平的聯合檢測，以判斷其對乳腺癌的早期診斷的特異性和靈敏度，為乳腺癌的早期診斷尋求一種更好的方法。

研究結果發現，乳腺癌組PSA表達水平明顯高于其他兩組，可見PSA水平的升高與乳腺組織的惡變有重要關系，乳腺良性疾病患者血清PSA表達雖然高于對照組，但差異無統計學意義。有學者研究發現，PSA水平隨乳腺癌的臨床分期加重，其水平也顯著降低，在本實驗中并未進行此方面研究。

上述表3可以看出，GDF3、PSA、MUC1兩兩檢測其敏感度、特異度和準確度明顯優于單項檢測，其中PSA+MUC1聯合檢測的敏感度、特異度、準確度均高于其他兩組，提示PSA和MUC1的高度表達與乳腺癌相關性較大。表4提示，GDF3、PSA、MUC1三者聯合檢測其敏感度、特異度和準確度達到最高。因此GDF3、PSA、MUC1三項聯合檢測診斷乳腺癌效果最佳，故在臨床中聯合使用GDF3、PSA、MUC1診斷乳腺癌，避免漏診。

本研究通過對50例原發性乳腺癌患者的血清GDF3、PSA、MUC1表達水平單項檢測和聯合檢測，證實GDF3聯合檢測PSA和MUC1對乳腺癌的早期診斷更有確診意義。后續研究我們將對乳腺癌患者的血清GDF3、PSA、MUC1之間的影響機制以及其與腫瘤標志物之間的聯合檢測是否更有意義進行更深入的研究。

[1] 黃哲宙,陳萬青,吳春曉.中國女性乳腺癌的發病和死亡現況-全國32個腫瘤登記點2003年至2007年資料分析報告[J].腫瘤,2012,32(6):435～439.

[2] 陳梁,李建華,李建輝,等.GDF3聯合CA125,CA153,CEA等血清指標在乳腺癌診斷中的價值[J].環球中醫藥,2013(S2):178～179.

[3] 中國抗癌協會乳腺癌專業委員會.中國抗癌協會乳腺癌診治指南與規范(2011版)[J].中國癌癥雜志,2011,21(5):367～417.

[4] Moore R G，MacLaughlan S，Bast R C.Current state of biomarkerdevelopment for clinical application in epithelial ovarian cancer[J].Gy-necol Oncol，2010，116(2)：240～245.

① 【基金項目】江蘇省科技發展基金，(編號：BKY2004003)；南京醫科大學科技發展基金面上項目，(編號:2012NJMU148)

1006-6233(2016)12-2026-03

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2016.12.036