孵化場(chǎng)實(shí)現(xiàn)無沙門氏菌污染的重要步驟

譯自International Hatchery Practice，Vol. 29（2015），№5：12～13

邵建忠 校 韓浩月 制圖表

中圖分類號(hào)：S851 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C 文章編號(hào)：1001-0769（2017）01-0007-04

家禽感染沙門氏菌是一個(gè)反復(fù)發(fā)生的世界性問題，它不僅威脅著動(dòng)物健康，同時(shí)也威脅著公共健康。有效地防治沙門氏菌需要了解其生物學(xué)特性：沙門氏菌屬分為兩種類型：

● 非運(yùn)動(dòng)型沙門氏菌屬，它由雞傷寒沙門氏菌和雞白痢沙門氏菌（Salmonella Gallinarum and Pullorum，SGP）組成。有些國(guó)家并不對(duì)這兩種血清型進(jìn)行區(qū)分。這一組的沙門氏菌屬于D血清型，且對(duì)家禽有宿主特異性。雖然雞也是其天然宿主，但它們也可以感染其他動(dòng)物物種，且對(duì)感染的敏感性多變。

SGP能夠引起雞傷寒和雞白痢，分別表現(xiàn)為成年雞的慢性病和雛雞及雛火雞急性傳染。這一組的沙門氏菌可以通過管理、檢測(cè)和淘汰等手段進(jìn)行凈化，如美國(guó)、加拿大或者歐洲的許多國(guó)家都已凈化。然而，世界其他地方仍遭受由其造成的經(jīng)濟(jì)損失。

● 運(yùn)動(dòng)型沙門氏菌屬，有時(shí)也稱為甲型副傷寒沙門氏菌（Paratyphoid Salmonellae，PTS），此類沙門氏菌具有非宿主特異性，人通過食用被污染的家禽產(chǎn)品會(huì)引發(fā)食源性疾病。

人沙門氏菌病的高發(fā)病率與人大量食用禽肉和家禽沙門氏菌高流行率密切相關(guān)。

1 第一步：鑒別潛在致病源

顯而易見，這一步在雞群沙門氏菌的凈化中非常重要。傳染的源頭來自多種渠道，并且它們的相對(duì)重要性在很大的程度上取決于當(dāng)?shù)氐牧餍胁W(xué)背景：農(nóng)場(chǎng)的數(shù)量、是否存在庭院式養(yǎng)雞、野生家禽的數(shù)量、國(guó)內(nèi)沙門氏菌的流行率、該國(guó)現(xiàn)有的控制方案，等等。

首要考慮的傳染源就是種蛋。沙門氏菌可以通過種蛋進(jìn)行垂直傳播，但是在產(chǎn)蛋的同時(shí)和種蛋隨后冷卻過程中會(huì)污染殼膜。最主要的后果是幾枚受到污染的種蛋在出雛期間能將這種污染傳至整個(gè)孵化器和整個(gè)出雛室。因此，要種蛋供應(yīng)商保證種雞群處于良好的沙門氏菌狀況。

孵化場(chǎng)的用水也是一個(gè)常見的感染源。無論是使用井水還是使用當(dāng)?shù)毓补┧W(wǎng)絡(luò)的自來水，污染的糞便通過下水道排到水源里是發(fā)生污染的主要途徑。受污染的設(shè)備（雞蛋托盤、鞋、車輪，等等）也能很容易機(jī)械傳播該細(xì)菌。

多種脊椎動(dòng)物（老鼠和野鳥）的腸道能夠攜帶沙門氏菌且不表現(xiàn)出臨床癥狀，或能夠機(jī)械傳播此細(xì)菌。同樣地，蒼蠅、甲蟲或紅螨等無脊椎動(dòng)物可能成為沙門氏菌傳播的潛在風(fēng)險(xiǎn)源。

人類同樣也可以看作是一種感染的源頭。孵化場(chǎng)的工作人員就存在此種風(fēng)險(xiǎn)，尤其是那些在自己家里飼養(yǎng)家禽和豬的人，或者那些近期發(fā)生食物中毒而沒有采取正確醫(yī)療救助的人。美國(guó)疾病控制中心估算每報(bào)道一例人類沙門氏菌感染病例，就有29.3例沒被報(bào)道出來。

當(dāng)前一批污染沒有經(jīng)過適當(dāng)?shù)奶幚頃r(shí)，孵化場(chǎng)本身就可能會(huì)成為感染的源頭，即使是種蛋來自于沙門氏菌凈化的種雞群，孵化期間污染仍會(huì)發(fā)生。

2 第二步：對(duì)潛在感染源采取具體的措施

在大多數(shù)的情況下，雞群無沙門氏菌感染的狀態(tài)可以通過適當(dāng)?shù)墓芾淼玫骄S持。請(qǐng)讓我們來回顧一下解決上述每一種潛在感染源的主要方法。

孵蛋：大多數(shù)的措施顯然針對(duì)供體的種雞，部分措施圍繞孵化場(chǎng)進(jìn)行。以下是一些要點(diǎn)。

2.1 農(nóng)場(chǎng)水平的措施

● 確保日齡雞來自無沙門氏菌污染的雞群。

● 種雞生產(chǎn)采取全進(jìn)/全出制，避免不同日齡的雞群飼養(yǎng)在同一雞舍內(nèi)。

● 執(zhí)行嚴(yán)格的有害生物（野生家禽、老鼠、蒼蠅和螨，等）控制措施。

● 使用去污染的飼料，可用熱處理或酸化處理。即使制粒不能作為飼料的凈化措施，但顆粒飼料仍然比糊狀或碎屑狀飼料更安全。飼料原料的狀態(tài)至關(guān)重要。動(dòng)物源性的蛋白質(zhì)也是一個(gè)很重要的風(fēng)險(xiǎn)因素。

● 實(shí)施嚴(yán)格的員工進(jìn)出和更衣制度：每棟雞舍應(yīng)有專用的鞋、工作服和頭套。

● 墊料管理：變質(zhì)的墊料最有利于沙門氏菌的生長(zhǎng)。

● 國(guó)家的政策允許對(duì)家禽進(jìn)行免疫接種，這可以降低家禽對(duì)感染的敏感性。活疫苗和滅活疫苗都有供應(yīng)，它們的使用目的不同。沙門氏菌的免疫力分體液免疫和細(xì)胞免疫。文獻(xiàn)資料顯示，最有效的免疫應(yīng)答可以通過首免接種活疫苗，數(shù)周后接種滅活疫苗來獲得。雖然細(xì)胞介導(dǎo)的免疫會(huì)減少腸道內(nèi)的沙門氏菌群數(shù)量，但高抗體水平能夠顯著減少細(xì)菌在器官中的定植以及沙門氏菌通過種蛋進(jìn)行傳播。

● 養(yǎng)雞場(chǎng)采取正確的種蛋管理措施：經(jīng)常性集蛋，采取有效的消毒措施——最流行的方法是在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境條件（溫度 24 ℃/相對(duì)濕度85%，接觸20 min）用以甲醛為主要成分的產(chǎn)品進(jìn)行熏蒸消毒。

2.2 在孵化場(chǎng)

● 盡量減少同一個(gè)孵化室內(nèi)孵化器的數(shù)量以避免交叉污染。

● 實(shí)施嚴(yán)格的員工進(jìn)出和更衣制度：每棟孵化樓采用專用的鞋、工作服以及頭套。

● 種蛋在無沙門氏菌污染的環(huán)境下孵化。

● 通過使用完整的或特異性的菌群實(shí)施競(jìng)爭(zhēng)性排除措施，以便抑制沙門氏菌感染免疫力尚未形成的出殼雛雞。

● 水：在飲水管道進(jìn)入孵化場(chǎng)的入口處進(jìn)行消毒。沙門氏菌對(duì)氯氣敏感，但是氯氣消毒法只有在特定的條件下才有效：pH低于7，低水平的鐵的有機(jī)體。當(dāng)飲水的化學(xué)條件不相稱時(shí)，二氧化氯更適用。酸化處理也有助于水的凈化，因?yàn)樯抽T氏菌偏好堿性環(huán)境。

● 有害生物的防控：捕鼠器和滅鼠藥應(yīng)該放置孵化場(chǎng)的多個(gè)重要通道上，蒼蠅幼蟲在熱的和潮濕的糞便中更容易滋生。每當(dāng)進(jìn)行清潔和消毒時(shí)，應(yīng)對(duì)墻體下方部位和墊料噴灑殺蟲劑以殺滅甲蟲和面粉蟲的成蟲和幼蟲。

● 人：雞場(chǎng)中有關(guān)人的生物安全管理措施同樣適用于孵化場(chǎng)。確保員工不私自飼養(yǎng)家禽或其他農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物，以此降低風(fēng)險(xiǎn)，同樣要定期檢查人員的帶菌狀態(tài)。

3 第三步：監(jiān)測(cè)所采取措施的有效性

任何一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)降低策略如果不配套監(jiān)控和記錄其效率，措施都是無用的。監(jiān)測(cè)策略是成功消除沙門氏菌的關(guān)鍵要素：在正確的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行正確的采樣，并用正確的方法進(jìn)行檢測(cè)和分析。沙門氏菌檢測(cè)通常有三種方法：細(xì)菌培養(yǎng)、血清學(xué)鑒定和聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）。

3.1 樣本的類型和方法

沙門氏菌的檢測(cè)可以是家禽樣本（肝、盲腸），也可以是環(huán)境樣本（拭子）。如果采用SGP方法，檢測(cè)材料最好只用家禽樣本，因?yàn)榄h(huán)境樣本可能會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。盲腸和盲腸扁桃體樣本是最可靠的檢測(cè)樣本。在雞場(chǎng)水平上，除足部拭子采集墊料樣本以外，產(chǎn)蛋箱、雞蛋傳送帶、飼料槽、墻壁或者家禽生活區(qū)的其他多塵區(qū)域的樣本對(duì)PTS法高度敏感。

在孵化場(chǎng)水平，建議用棉拭對(duì)孵化器內(nèi)壁或者雛雞傳送帶采樣。沙門氏菌可以從所有潛在的污染源分離到，如飼料、水、原料和有害生物。

細(xì)菌培養(yǎng)方法在許多官方文件（比如OIE、US NPIP、ISO 6579 v.2007）上都有介紹，讀者應(yīng)參考以獲取更多的技術(shù)信息。

與家禽沙門氏菌感染有關(guān)的主要抗體應(yīng)答可以使用血清學(xué)方法來檢測(cè)。除了酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）方法外，快速凝集反應(yīng)得到廣泛應(yīng)用。蛋黃抗體也能容易地檢測(cè)。然而，僅使用血清學(xué)檢測(cè)法會(huì)有一定的局限性。陽性結(jié)果未必能說明感染正在發(fā)生。另外，感染時(shí)和出現(xiàn)可檢測(cè)抗體的時(shí)間之間存在時(shí)間差。亞臨床感染或低水平感染有時(shí)似乎無法用血清學(xué)方法檢測(cè)出，而細(xì)菌培養(yǎng)卻呈陽性。最后，血清學(xué)方法并不適用于免疫家禽的檢測(cè)，因?yàn)樗鼰o法區(qū)別感染的野毒株和疫苗株。

3.2 采樣頻率

應(yīng)精心制定采樣時(shí)間表，并考慮相關(guān)的法律法規(guī)是否有當(dāng)?shù)亓餍胁W(xué)規(guī)定。表1列出了農(nóng)場(chǎng)水平的采樣方案。在現(xiàn)有的時(shí)間表中，每次出雛時(shí)通過擦拭采樣來檢測(cè)每一臺(tái)出雛器，是控制并追蹤因種蛋來源雞群造成的孵化場(chǎng)沙門氏菌感染的一種簡(jiǎn)單有效的方法。孵化場(chǎng)的飲水每年應(yīng)檢測(cè)兩次。SGP血清學(xué)檢測(cè)數(shù)為60羽雞，這可以在95%的置信度水平上檢測(cè)出5%的流行率。

4 第四步：做好最壞的打算

在對(duì)孵化場(chǎng)進(jìn)行沙門氏菌檢測(cè)時(shí)，必須制定好應(yīng)急計(jì)劃。沙門氏菌通常對(duì)大多數(shù)的化學(xué)試劑敏感，但是應(yīng)該注意按說明使用推薦劑量，因?yàn)閯┝坎蛔阋仔纬煽顾幮浴３Ｒ?guī)的方法再配合肥皂清潔劑，對(duì)所有物體的表面噴灑，隨后用氣霧消毒劑進(jìn)行熏蒸消毒：銨/戊二醛和甲醛是一類高效并被廣泛使用的消毒劑，聯(lián)苯酚也是不錯(cuò)的選擇。

抗菌素治療備受爭(zhēng)議，因?yàn)榧?xì)菌很可能會(huì)對(duì)其產(chǎn)生抗藥性，且極易遺傳，因此不建議使用。此外，抗菌素治療的效率并不一致：在雛雞出生的頭幾天由于微生物群落的根除使得實(shí)際保護(hù)演變成沙門氏菌嚴(yán)重感染。

該計(jì)劃應(yīng)該包括對(duì)感染的潛在原因進(jìn)行調(diào)查，以預(yù)防出現(xiàn)感染。

政府的相關(guān)部門已經(jīng)要求家禽生產(chǎn)商對(duì)沙門氏菌進(jìn)行控制和監(jiān)測(cè)。因此，控制方案必須根據(jù)國(guó)內(nèi)的情況進(jìn)行精心制定，以便于降低雞群（尤其是肉雞和火雞）和人沙門氏菌的感染水平。

此類政策的二個(gè)實(shí)例可參見歐洲（200-2010 EU肉雞飼養(yǎng)準(zhǔn)則）或北美（美國(guó)國(guó)家家禽改善方案）。此外，現(xiàn)代家禽貿(mào)易全球化為沙門氏菌傳播創(chuàng)造了新的流行病學(xué)條件，禽產(chǎn)品出口國(guó)必須遵守進(jìn)口國(guó)有關(guān)沙門氏菌感染狀況的特定規(guī)定。

鑒于沙門氏菌普遍存在于世界各地以及其既可以水平傳播又可以垂直傳播的天然特性，任何旨在降低其流行率的措施必須包含于家禽生產(chǎn)的所有環(huán)節(jié)中。

本文的重點(diǎn)是可以在孵化場(chǎng)執(zhí)行以確保其處于無沙門氏菌污染的措施。

5 結(jié)論

孵化場(chǎng)要實(shí)現(xiàn)無沙門氏菌污染需要考慮各個(gè)環(huán)節(jié)。精心制定可以獲得且更重要的是保持無沙門氏菌污染的預(yù)防策略取決于其在任何孵化場(chǎng)、任何品種上品種都能夠保持完全相同的一系列法規(guī)。

正如圖1所示，360度全方位的方法可以在能夠平衡該策略的五個(gè)方面之間實(shí)現(xiàn)均衡，從而全面創(chuàng)建無沙門氏菌孵化場(chǎng)。無論攻破任何一個(gè)角，孵化場(chǎng)仍將保持不敗。□□

原題名：Taking steps tpwards a salmonella free hatchery（英文）

原作者：Olivier Leon博士