用低溫高速離心法處理高脂標本消除生化檢測干擾的探討

摘要：目的 利用低溫高速離心法處理高脂標本消除高乳糜微粒對生化項目檢測的干擾 。方法 經(jīng)常規(guī)低速離心10 min后，將體檢收集到的標本分為血清外觀澄清、無溶血、無黃膽正常組和血清混濁高脂標本組（甘油三酯>12.0 mmol/L），分離血清用1.5 ml微量管分裝，再經(jīng)低溫高速離心30 min，棄去乳白色上清液，混勻下清液，分別測定兩種離心方法的生化項目，進行兩種不同方法處理后的結(jié)果比對。結(jié)果 血清外觀正常組經(jīng)低溫高速離心前后生化項目結(jié)果無差異，高脂標本組低溫高速離心后，消除乳糜微粒的影響，生化結(jié)果明顯改善。結(jié)論 利用低溫高速離心法處理高脂標本可以消除高乳糜微粒對生化檢測項目的干擾。

關(guān)鍵詞：脂血；乳糜微粒；低溫高速離心；生化測定；干擾

體檢工作中常遇到的脂血標本，如不處理，生化項目的測定會受到嚴重干擾，無法反映真實生化結(jié)果，尤其是高乳糜微粒血清，血清中含大量的甘油三酯和極低密度脂蛋白，標本看起來像奶油樣，由于大量的高乳糜微粒對入射光產(chǎn)生散射，嚴重影響生化結(jié)果可靠性。我們采用低溫高速離心法除消高乳糜微粒的干擾，取得良好的效果。

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1標本來源 來我中心健康體檢人群。

1.1.2儀器與試劑 美國雅培CI16200SR生免一體機，德國eppendorf5424R小型臺式低溫高速離心機，中佳KDC-1044低速離心機，鈣、鎂測定試劑：上海德賽生物公司；總膽汁酸、磷測定試劑：北京利德曼公司；其它項目試劑均是雅培原裝進口試劑。

1.2方法

1.2.1常規(guī)離心法 將收集的標本在2 h內(nèi)以3500 rpm/min，離心力2352 g，離心10 min分離血清測定。

1.2.2低溫高速離心法 將常規(guī)離心法分離血清，用1.5 ml微量管分裝至少600 UL血清加蓋密封，經(jīng)15000 rpm/min，離心力21130 g，離心溫度4℃，離心30 min后，用移液器吸棄上層乳糜微粒層，混勻下清液測定。

2 結(jié)果

取外觀澄清、無溶血、無黃膽、無明顯脂血標本20例，分成兩組，一組用常規(guī)離心法分離血清，另一組將常規(guī)離心后的血清進行低溫高速離心法分離，進行檢測，結(jié)果表明兩種離心法生化檢測結(jié)果基本一致。另外取20例高脂標本（甘油三酯>12.0 mmol/L），分成兩組，一組用常規(guī)離心法分離血清，另一組將常規(guī)離心后的血清進行低溫高速離心法分離，進行檢測，見表1。

3 討論

對于外觀澄清、無溶血、無黃膽的標本進行常規(guī)離心和超低溫離心法處理后血清進行檢測，兩種處理方法結(jié)果基本一致，可以分析出是低溫高速離心法分離血清對除血脂外其它項目結(jié)果無影響。全自動生化分析儀目前多采用雙試劑、雙波長技術(shù)，結(jié)合凹面光柵進行后分光，分光后的各波長由8～16個固定檢測器同時接收，對其中的兩個波長的信息用兩具前置放大器放大并進行對數(shù)放大，求出其吸光度差，來避免或減少來自試劑空白和樣品空白對測定光吸收的干擾，提高測定結(jié)果的精密度和準確度。當標本甘油三酯>12.0 mmol/L時，血脂渾濁度增高，大量的乳糜微粒對入射光產(chǎn)生散射使得一些生化項目如ALT、TP、GGT、BilT、LDH、HBDH等產(chǎn)生影響，甚至出現(xiàn)負值。從表中可見，通過低溫高速離心法可以消除脂血對生化結(jié)果的干擾。

乳糜微粒中含TG含量最多，達95%，膽固醇近4%，所以低溫高速離心法必然會導(dǎo)致甘油三酯、膽固醇降低，因此脂類項目不適合用此法測定，可采用稀釋法測定[1-3]。

近年來，由于糖尿病引起血脂代謝紊亂、家簇性高脂血癥及高脂蛋白的攝入等體檢者不斷增多，血清呈乳糜狀，報告單上只能備注“標本嚴重混濁，結(jié)果僅供參考”，為了解決此問題，許多作者提出不同的方法，朱征等采用聚己二醇-4000法操作繁瑣，血清中加入附加成分，改變原有的反應(yīng)體系，不易做常規(guī)方法開展，而且沉淀后上清液只能測試部分生化項目；乙醚、磷鎢酸—鎂沉淀都會遇到相同的問題，本試驗顯示高脂血癥標本采用低溫高速離心法可以削除脂血的干擾。

參考文獻：

[1]朱征，丁顯平，楊敏，等.高脂血對臨床生化測定影響及處理方法的臨床研究.國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33（20）：2533-3560.

[2]劉萬彬，隆維東.聚乙二醇4000處理脂血后對生化結(jié)果的影響.國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33（4）：504-506.

[3]彭華，戴盛明.高脂血標本對臨床檢驗項目的干擾及消除.國際檢驗醫(yī)學雜志，2010，31（10）：1140-1142. 編輯/肖慧