CD34+細(xì)胞與急性加重期慢性阻塞性肺疾病的關(guān)系

摘要：目的 檢測急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者（AECOPD）外周血中CD34+細(xì)胞的數(shù)量變化。方法 收集2015年1月～10月的急性加重期慢性阻塞性肺疾病住院病例50例，同時收集45例性別、年齡無差別的同期健康體檢者作為對照組，采取密度梯度離心法，取得外周血單個核細(xì)胞，應(yīng)用免疫磁珠分選方法，分離出CD34+細(xì)胞，一并計(jì)數(shù)，比較兩組試驗(yàn)者外周血CD34+數(shù)量的變化。結(jié)果 AECOPD患者組外周血CD34+數(shù)量明顯低于健康對照組，P<0.05。結(jié)論 急性加重期慢性阻塞性肺疾病（AECOPD）患者外周血CD34+細(xì)胞數(shù)量較健康人減少，CD34+細(xì)胞數(shù)量可作為評價COPD嚴(yán)重程度的指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：CD34+細(xì)胞；慢性阻塞性肺疾病（COPD）；急性加重期

急性加重期的慢性阻塞性肺疾病 （AECOPD）會導(dǎo)致患者住院率以及死亡率近年來不斷地增加，國外有學(xué)者通過對慢性阻塞性肺病急性加重期（AECOPD）患者的研究發(fā)現(xiàn)，中重度COPD患者外周血中CD34+細(xì)胞數(shù)量明顯減少，并且外周循環(huán)血中CD34+細(xì)胞數(shù)量的減少能顯著地加大心血管系統(tǒng)疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

對于慢性阻塞性肺疾病（COPD）的患者，其外周血CD34+細(xì)胞數(shù)目的變化情況，在國內(nèi)的研究報(bào)道相對比較少，本實(shí)驗(yàn)主要就觀察急性加重期慢性阻塞性肺疾病 （AECOPD） 患者外周血中CD34+細(xì)胞的數(shù)量是否有降低[1-5]。

1 資料與方法

1.1一般資料 2015年1月～10月在包頭醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院呼吸科住院的AECOPD患者，篩選50例，平均年齡（65±10）歲。同一時期收集醫(yī)院體檢科性別、年齡無差別的健康體檢者45例，作為對照組，平均年齡（60±5）歲。慢性阻塞性肺疾病急性加重是指患者咳嗽、咳痰、喘息癥狀在近期內(nèi)急劇加重，并且咳膿痰，痰量增多，可有發(fā)熱等炎癥反應(yīng)癥狀。入選的健康體檢者，肺功能、胸片、血常規(guī)檢查均無異常，無吸煙史，既往沒有呼吸系統(tǒng)疾病史，并且近1個月內(nèi)沒有患過疾病。

1.2方法

1.2.1采集標(biāo)本 所有參與試驗(yàn)者晨起空腹抽靜脈血15～20ml，分離CD34+細(xì)胞并計(jì)數(shù)。

1.2.2 CD34+細(xì)胞的分離及計(jì)數(shù)：①將靜脈血稀釋，用Ficoll梯度分離液分離出單個核細(xì)胞（MNC）；②將單核細(xì)胞懸浮于100μLPBS溶液中，并加入CD34+抗體混合物，在常溫下孵育15 min；③按照50μL磁珠/mL細(xì)胞懸液的比例加入磁珠，室溫下孵育10 min；④再用PBS緩沖液將細(xì)胞懸液的體積調(diào)整至2.5 mL，均勻混合后，磁極中插入試管，靜置5 min后，將試管中的上清部分倒出；⑤細(xì)胞被標(biāo)記磁性，在磁場中被磁場吸引，其仍然留在試管中，最后的2個步驟再重復(fù)3次后，即可得到CD34+細(xì)胞；⑥將其放光鏡下計(jì)數(shù)CD34+細(xì)胞，計(jì)算其平均數(shù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有測定出的數(shù)據(jù)全部用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其中呈正態(tài)分布的計(jì)量資料用（x±s）表示，兩組間正態(tài)分布樣本的比較，使用兩樣本t檢驗(yàn)，顯著性水平值α取0.05，P<0.05則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

AECOPD患者組外周血CD34+細(xì)胞數(shù)量明顯低于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以氣流持續(xù)受限，呈進(jìn)行性發(fā)展，氣流受限不完全可逆為特征的疾病，其發(fā)病率以及病死率近年來不斷增高，因而越來越受到人們的重視，而CD34+細(xì)胞與慢性阻塞性肺疾病的關(guān)系，以及在慢性阻塞性肺疾病急性加重期中數(shù)量的變化，近年來也越來越引起很多國內(nèi)外學(xué)者的重視。CD34+細(xì)胞存在于骨髓內(nèi)，在細(xì)胞因子等作用的調(diào)節(jié)下，遷移至外周血中，并粘附在血管，增殖并分化成為內(nèi)皮細(xì)胞。內(nèi)皮祖細(xì)胞主要由表達(dá)CD34+的細(xì)胞組成，其特征標(biāo)記是CD34+、CD133+，而目前對于內(nèi)皮祖細(xì)胞的定性，還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。

通過本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，急性加重期慢性阻塞性肺疾病 （AECOPD）患者外周血CD34+細(xì)胞的數(shù)量明顯地低于健康對照組，而AECOPD患者外周血中CD34+細(xì)胞數(shù)目的減少，關(guān)于其減少具體的機(jī)制目前仍不是十分清楚，國外有學(xué)者研究推測，AECOPD患者外周血中CD34+細(xì)胞數(shù)目的減少可能與其自身的炎癥反應(yīng)有關(guān)，從而導(dǎo)致CD34+細(xì)胞數(shù)目的降低。

在本實(shí)驗(yàn)研究中，我們可以大致分析得出：AECOPD患者外周血CD34+細(xì)胞數(shù)量較正常健康對照組是明顯減少的，可作為評價COPD嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一，為后續(xù)進(jìn)一步研究CD34+細(xì)胞與慢性阻塞性肺疾病的關(guān)系提供理論依據(jù)。

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編輯/蔡睿琳