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巨細胞病毒感染嬰兒及其母親不同體液HCMV—DNA比較

2016-12-31 00:00:00晏文強謝明水
醫學信息 2016年10期

摘要:目的 我們的研究目的是比較母親乳汁及血液與嬰兒尿液HCMV檢測在CMV感染中的價值。方法 我們收集醫院2014年3月~2015年2月出生1w~6個月HCMV感染的嬰兒尿液及其母親的乳汁和EDTA抗凝血。分別作為A,B,C組,通過實時定量PCR檢測。結果 嬰兒尿液HCMV-DNA陽性率為20.98%,嬰兒尿液或母親乳汁HCMV-DNA陽性率62.20%,嬰兒尿液或母親血液HCMV-DNA陽性率43.90%,嬰兒尿液或母親乳汁或血液HCMV-DNA陽性率為75.61%。結論 通過結果,我們認為難采血的HCMV感染的嬰兒有必要檢測母親的血液和乳汁HCMV-DNA。

關鍵詞:人巨細胞病毒;嬰兒;母親乳汁;尿液;血液

眾所周知,母乳喂養存在很多益處。而對于人巨細胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染的母親和嬰兒,出生后如實行母乳喂養,將會增加HCMV感染的概率。此外,母親體內的HCMV也可通過胎盤垂直傳播感染胎兒致出生后出現HCMV血癥[1]。嬰兒感染HCMV引起先天性畸形及肝炎,肺炎,腸炎,HCMV先天感染綜合征,先天性聽力損傷等疾病,對家庭及社會危害極大[2,3]。但是嬰兒感染HCMV早期很多無癥狀,呈隱形感染,將來有可能發展為智力底下,聽力受損等中樞神經系統損害[4]。嬰兒如果在感染HCMV的早期能夠得到診斷治療,可以減輕癥狀和改變預后[5]。HCMV引起的疾病常缺乏特異的臨床表現,要得到明確的診斷很大程度上依賴于實驗室檢驗指標的測定[6],血清HCMV-IgM抗體陽性常作為HCMV感染診斷的金標準。從標本的選擇來看,血液,乳汁,尿液均可。雖然患兒的采血較困難,尿液的收集相對方便,但尿液的非特異性較高。HCMV-IgM抗體的檢測固然重要,但對HCMV感染的臨床診斷不能完全依賴此指標,因為有時會出現假陽性和假陰性的問題。

1資料與方法

1.1標本來源 選取隨州市中心醫院2014年3月~2015年2月出生1w~6個月HCMV感染嬰兒及其母親作為研究對象,共有164例。其中男孩86個,女孩78個。采集嬰兒的尿液和母親的血液及乳汁。檢測指標包括尿液HCMV-DNA和乳汁,血液HCMV-DNA拷貝數。診斷標準參考HCMV感染診斷方案。

1.2樣本檢測 將研究對象分為3組:嬰兒尿液為A組,母親乳汁為B組,母親血液結果為C組。乳汁,血液,尿HCMV通過病毒DNA檢測。

1.3病毒DNA檢測 中山大學達安基因有限公司人類巨細胞病毒核酸定量檢測試劑盒。HCMV-DNA提取:12000 rpm離心5min,沉淀加DNA提取液混勻。100℃保溫10min。12000 rpm離心5min,取上清液5ul進行熒光定量PCR擴增。PCR循環條件:93℃,2min變性;然后按93℃,5s;57℃,45s;40個循環。若結果高于100copies/ml,則為陽性。

1.4主要儀器 熱循環儀(ABI7500,美國)。高速離心機(TG20-WS,湖南)。恒溫金屬浴(HB-100,杭州)。

2結果

2.1統計學分析 統計學采用SPSS19.0軟件進行分析。

2.2尿液與母親乳汁或血清檢測比較 2014年3月~2015年2月出生1w~6個月HCMV感染的嬰兒,其中男嬰86例,女嬰78例。研究結果表明嬰兒尿液HCMV-DNA陽性為35例,陽性率為20.98%,嬰兒尿液或母親乳汁HCMV-DNA陽性共102例,陽性率62.20%,嬰兒尿液或母親血液陽性共72例,陽性率43.90%,嬰兒尿液或母親乳汁HCMV-DNA陽性或母親血液陽性共124例,陽性率75.61%。

3討論

HCMV的不同之處在于病毒可以以不同濃度聚集在不同的組織或器官,在血液中不一定總有大量的排出,從尿液排出是十分多見的。無論是有癥狀的嚴重感染還是隱形感染患兒,尿液中均能檢測到HCMV,但尿液HCMV-DNA檢測敏感度較小,而嬰幼兒的血液又較難采集,故我們需要尋找合適的方法診斷HCMV感染。

本文研究HCMV感染的嬰兒尿液陽性率和其他文章中提到的結果一樣較低,但在結合母親的乳汁和血清HCMV檢測后,HCMV病毒的檢出率大大提高。也有許多文章指出母乳HCMV的概率高達93%,血液HCMV-DNA檢出率達21%,這篇文章從母親體液的角度來輔助診斷嬰兒感染HCMV的情況,以解決標本的采取難度及減輕嬰兒的痛苦。

嬰兒感染HCMV智力和聽力神經等中樞神經系統發育都會受到嚴重影響,給個人,家庭和社會帶來負擔。如果HCMV感染能夠早期得到發現并給予治療,由其引起的各種疾病都可以得到緩解甚至杜絕。對于不能訴說及難以觀察身體狀況的嬰兒,我們可以通過檢測尿液及母親的乳汁和血液對其進行篩查,及早發現HCMV感染。

參考文獻:

[1]湯潔,王夢醒,閻素文,等.哺乳期婦女乳汁CMV-DNA定量測定及意義[J].沈陽部隊醫藥,2008,21(6):378-379.

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[4]Barkai G1,Barzilai A,Mendelson E,et al.Newborn screening for congenital cytomegalovirus using real-time polymerase chain reaction in umbilical cord blood[J].Isr Med Assoc J,2013,15(6):279-283.

[5]邊鵬.80例兒童巨細胞病毒感染患者臨床治療分析[J].中外醫療,2013,26(32):55-56.

[6]杜正強.尿巨細胞病毒檢測在嬰兒巨細胞病毒感染診斷中的意義[J].中國血液流變學雜志,2012,22(2):301-302.

編輯/丁一

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