血清中AFP,GPC3，DCP和VEGF 4種腫瘤標志物對原發性肝癌的早期診斷價值

盧凌鵬 黃艷芳

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血清中AFP,GPC3，DCP和VEGF 4種腫瘤標志物對原發性肝癌的早期診斷價值

盧凌鵬 黃艷芳

目的 探討AFP,GPC3，DCP和VEGF 4種腫瘤標志物對早期診斷原發性肝癌的價值。方法將82例原發性肝癌患者納入肝癌組，另外收集同期住院的肝硬化患者45例納入肝硬化組和健康體檢者50例納入對照組。檢測入選患者血清AFP,GPC3，DCP和VEGF濃度，ROC曲線分析4種腫瘤標志物診斷原發性肝癌的價值。結果肝癌組患者血清AFP、GPC3、DCP和VEGF的濃度顯著高于肝硬化組和對照組(P<0.05)；肝硬化組患者血清GPC3濃度顯著高于對照組(P<0.05)。4種腫瘤標志物診斷原發性肝癌的敏感度由高到低依次為VEGF(0.817)、GPC3(0.812)、DCP(0.724)和AFP(0.534)；特異度由高到低依次為GPC3(0.707)、VEGF(0.692)、DCP(0.665)和AFP(0.653)。其中GPC3和VEGF的敏感度和特異性顯著高于DCP和AFP(P<0.05)，但GPC3與VEGF之間無統計學差異(P>0.05)。聯合檢測的敏感度和特異度為0.852和0.800，顯著高于任何一種標志物(P<0.05)。ROC結果顯示聯合檢測的曲線下面積(AUC)為0.818，高于任一種標志物單獨檢測的AUC。結論血清GPC3、DCP和VEGF的檢測可協助AFP診斷原發性肝癌，聯合4種標志物檢測可顯著提高原發性肝癌的檢出率。

原發性肝癌；甲胎蛋白；磷脂酰基醇蛋白聚糖-3；異常凝血酶原；血管內皮生長因子

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1399～1401)

原發性肝癌是消化系統常見惡性腫瘤之一，早期診斷困難，治療難度大，疾病進展快，死亡率高，預后極差。研究表明80%的原發性肝癌患者存在肝硬化疾病基礎，因此對于肝硬化患者的定期篩查有利于原發性肝癌的早期診斷。常用的肝癌腫瘤標志物甲胎蛋白(alpha-fetoprorein，AFP)靈敏度和特異度不高，尋找可以替代或彌補AFP不足的肝癌腫瘤標志物是肝癌早期診斷的重要工作。本研究通過檢測原發性肝癌患者血清中AFP，磷脂酰基醇蛋白聚糖-3(glypican-3，GPC3)，異常凝血酶原(desrcarboxyprothrombin，DCP)和血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)濃度水平，探討4種標志物對于早期診斷原發性肝癌的價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2012年12月至2015年12月收治的原發性肝癌患者82例納入肝癌組，其中男性55例，女性27例；年齡27～81歲，平均(46.7±7.5)歲。另外收集同期住院的肝硬化患者45例納入肝硬化組和健康體檢者50例納入對照組。肝硬化組患者男性27例，女性18例；年齡32～79歲，平均(47.5±6.6)歲。對照組男性30例，女性20例；年齡18～80歲，平均(48.0±7.0)歲。肝癌組患者均為初治，由術后病理診斷確診為原發性肝癌。3組一般資料無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

所有入選患者于清晨空腹抽取靜脈血5 ml，3 000 r/min離心20 min分離血清。AFP檢測采用羅氏E601電化學發光檢測系統及配套試劑。GPC3、DCP采用酶聯免疫法(ELISA)檢測，試劑盒購自武漢優爾生生物有限公司。VEGF采用ELISA檢測，試劑盒購自美國安迪生物工程有限公司。

1.3 統計學方法

所得數據采用SPSS 17.0進行統計分析，計數資料以率表示并進行χ2檢驗，計量資料以均數±標準差表示并進行t檢驗，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗，特異性、靈敏度的評估采用ROC曲線，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 4種血清標志物在3組血清中的濃度比較

肝癌組患者血清AFP、GPC3、DCP和VEGF的濃度顯著高于肝硬化組和對照組(P<0.05)；肝硬化組患者血清GPC3濃度顯著高于對照組(P<0.05)，其他腫瘤指標的濃度在肝硬化組患者和對照組患者間無統計學差異(P>0.05)。見表1。

表1 3組腫瘤標志物的血清濃度比較(±s)

表1 3組腫瘤標志物的血清濃度比較(±s)

注：*為與對照組比較，P<0.05；#為與肝硬化和對照組比較，P<0.05。

腫瘤標志物肝癌組肝硬化組對照組AFP/(μg·L-1)112．6±25．4#12．3±9．610．7±8．6GPC3/(ng·L-1)249．3±40．5#212．2±23．1*132．9±15．4DCP/(mAu·mL-1)426．7±245．6#118．2±32．741．6±12．8VEGF/(pg·mL-1)802．7±638．6#465．2±403．5165．8±174．4

2.2 4種腫瘤標志物診斷原發性肝癌的價值比較

4種腫瘤標志物診斷原發性肝癌的敏感度由高到低依次為VEGF(0.817)、GPC3(0.812)、DCP(0.724)和AFP(0.534)；特異度由高到低依次為GPC3(0.707)、VEGF(0.692)、DCP(0.665)和AFP(0.653)。其中GPC3和VEGF的敏感度和特異性顯著高于DCP和AFP(P<0.05)，但GPC3與VEGF之間無統計學差異(P>0.05)。四者聯合檢測的敏感度和特異度為0.852和0.800，顯著高于任何一種標志物(P<0.05)，見表2。ROC結果顯示聯合檢測的曲線下面積(AUC)為0.818，高于任一種標志物單獨檢測的AUC，見圖1。

圖1 4種腫瘤標志物檢測原發性肝癌的ROC曲線

表2 4種腫瘤標志物的診斷原發性肝癌的價值比較

3 討論

惡性腫瘤是威脅人類生命的嚴重疾病，惡性腫瘤死亡率已占據我國人類疾病譜的第1位。原發性肝癌是全球第六大腫瘤，我國是世界上肝癌高發區之一，發病率為20.37/10萬，位于常見腫瘤的第3位。目前原發性肝癌的治療尚缺乏有效手段，早期以手術為主，術后復發率高，容易沿血管及淋巴管發生遠處轉移，預后差。由于原發性肝癌早期癥狀和體征不明顯或缺乏特異性，導致早期診斷率較低，患者就醫時常為中晚期，喪失治療機會。研究顯示，早中期原發性肝癌可手術治療，小肝癌手術切除術后5年生存率可達60%以上，大肝癌術后5年生存率則不足40%。同時，由于原發性肝癌對放療和化療均不敏感，預后總體較差。在目前治療尚無更好策略之際，對高危人群的有效篩選和早期診斷，是提高生存率、降低病死率的有效途徑。AFP是目前篩選、檢測和隨訪原發性肝癌最常用的腫瘤標志物，但在分化程度好的原發性肝癌或退行發育的原發性肝癌中可能僅有輕度或沒有AFP水平升高，對于腫瘤直徑小于1 cm的微小腫瘤病灶的檢出率仍不高，30%～40%早期、可切除性原發性肝癌患者中血清AFP可以沒有明顯升高，而良性或特殊疾病等情況下AFP可為陽性[1-2]，因此，對于原發性肝癌的診斷、特別是早期診斷還沒有可靠的血清學指標。

GPC3是一種膜性硫酸乙酰肝素糖蛋白，影響多種生物效應分子，進而在細胞的生長發育和癌變過程中起到關鍵作用[3-5]。GPC3在人體胎肝、胎盤等組織中高表達，但在正常成人肝臟中無表達，在原發性肝癌中的診斷價值評估成為當今熱門研究課題之一[6-8]。Liu等[9]研究顯示AFP聯合GPC3診斷HCC的敏感度(79.54%)顯著優于AFP單獨檢測(65.91%)及GPC3單獨檢測(61.36%)，有利于肝癌的早期發現。大部分病例中，GPC3水平的升高與AFP水平之間無相關關系，二者在HCC的診斷上相互獨立具有互補性。DCP是近年來研究較熱的肝癌腫瘤標志物，其表達主要與肝細胞缺氧及低維生素K濃度引起凝血酶原合成異常有關，能促進血管內皮細胞的增殖與遷移，大量研究顯示肝癌患者血清中DCP出現異常升高[10]。VEGF與惡性腫瘤的生長、侵襲、轉移及預后密切相關，肝細胞可通過分泌大量的VEGF以促進血管生成和血管通透性增加，加速腫瘤的生長增殖。

本研究檢測了82例原發性肝癌患者血清AFP、GPC3、DCP和VEGF,結果顯示，相比于非原發性肝癌患者，肝癌患者血清4種腫瘤標志物出現顯著升高，其中GPC3和VEGF的診斷敏感度和特異性較高。在肝硬化患者的血清中，血清AFP、GPC3、DCP和VEGF水平也出現了升高，但是與健康對照組患者比較，只有GPC3的升高與對照組有顯著差異，而其他3種腫瘤標志物的升高無統計學意義。ROC曲線分析表明GPC3的AUC略高于其他3種標志物，達到0.718，但是聯合4種標志物檢測，其診斷優勢明顯突顯出來，其敏感度和特異度為0.852和0.800，曲線下面積達到0.818，顯著高于任何一種標志物的單獨檢測，可見聯合4種標志物檢測遠遠提高了原發性肝癌的檢出率。

綜上所述，血清GPC3、DCP和VEGF的檢測可協助AFP診斷原發性肝癌，聯合4種標志物檢測可顯著提高原發性肝癌的檢出率。

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(編輯：甘 艷)

Value of Serum AFP,GPC3,DCP and VEGF Concentration in the Early Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma

LULingpeng,HUANGYanfang.ShanghaiSeventhPeople'sHospital,Shanghai,200137

Objective To investigate the effect of AFP,GPC3,DCP and VEGF in the early diagnosis of primary hepatocellular carcinoma.Methods 82 cases of primary liver cancer patients were selected as liver cancer group,45 cases of liver cirrhosis were liver cirrhosis group and 50 healthy subjects were the control group.Serum AFP,GPC3,DCP,and VEGF concentration of the patients were detected.Value of 4 kinds of tumor markers in the diagnosis of primary liver cancer was detected by ROC curve.Results The concentration of serum APF,GPC3,DCP and VEGF in liver cancer group were significantly higher than those of cirrhosis group and the control group (P<0.05).Concentrations of serum GPC3 in liver cirrhosis group was significantly higher than the control group (P<0.05).The sensitivity of tumor markers in the diagnosis of primary liver cancer from high to low were VEGF (0.817),GPC3 (0.812),DCP (0.724) and AFP (0.534),and the specificity from high to low were GPC3 (0.707),VEGF (0.692),DCP (0.665) and AFP(0.653).The sensitivity and specificity of GPC3 and VEGF were significantly higher than those of DCP and AFP (P<0.05),but there had no significant difference between GPC3 and VEGF (P>0.05).The sensitivity and specificity were 0.852 and 0.800 of combined detection,which were significantly higher than those of any kind of markers (P<0.05).ROC results showed that the area under the curve of joint detection (AUC) was 0.818,which was higher than that of any single marker detection AUC.Conclusion Detection of serum GPC3,DCP and VEGF,AFP can assist in the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma,combined with 4 kinds of markers can significantly improve the detection rate of primary liver cancer.

Primary hepatocellular carcinoma；AFP；GPC3；DCP；VEGF

200137 上海市第七人民醫院(盧凌鵬)；200137 上海市浦東新區高橋社區衛生服務中心(黃艷芳)

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.09.003

R735.7

A

1001-5930(2016)09-1399-03

2016-04-11

2016-07-29)