皮膚惡性黑色素瘤手術聯合免疫療法的臨床研究

王華斌

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皮膚惡性黑色素瘤手術聯合免疫療法的臨床研究

王華斌

目的 探討在皮膚惡性黑色素瘤手術治療中聯合免疫治療的臨床療效。方法回顧性分析收治的皮膚惡性黑色素瘤患者52例，根據治療方式不同分為治療組33例和對照組19例。兩組患者均行根治手術治療；對照組在根治術后直接進行移植皮修復。治療組在根治術后應用免疫療法。比較兩組患者整個治療過程所需時間和出血量；比較治療后第1年、第2年和第3年患者生存率；檢測兩組血清基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平。結果治療組患者整個治療過程平均所需時間和出血量分別為(2.25±0.43)h和(595.78±149.72)mL，與對照組(2.34±0.51)h和(604.27±155.33)mL比較差異無統計學意義(P<0.05，P<0.01)；治療后，治療組患者第2和第3年的生存率明顯高于對照組(P<0.05)；治療組治療后MMP-2和MMP-9水平均明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)。結論在皮膚惡性黑色素瘤手術治療中采取免疫療法可提高治療效果、提高術后生存率和降低血清MMP-2 和MMP-9含量，值得臨床應用。

皮膚惡性黑色素瘤；免疫療法；基質金屬蛋白酶-2；基質金屬蛋白酶-9

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1553～1555)

皮膚惡性黑色素瘤是黑色素細胞相關惡性腫瘤，在西方國家皮膚癌死亡首因[1]，在我國范圍內黑色素瘤發病率增速較快，具有致死性強、易轉移和對單純放化療不敏感等特點；該病在我國的發病率較低，但隨著我國人口疾病譜的變化，其發病率、死亡率正逐年升高，已對人們的健康構成了嚴重威脅[2]。對惡性黑色素瘤采取免疫療法已用于臨床各科疾病的治療，本研究中回顧性分析本室2010年4月至2012年7月收治的皮膚惡性黑色素瘤患者52例，結果證實在皮膚黑色素瘤手術治療中采取聯合免疫療法治療療效更佳，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2010年4月至2012年7月收治的皮膚惡性黑色素瘤患者52例，根據手術根治術后處理方式不同分為治療組33例和對照組19例。其中治療組男性20例，女性13例；年齡30～60歲，平均(42.1±7.7)歲；病程7個月～5年，平均(2.5±0.9)年；足底部22例，面部4例，上肢2例，下肢3例，胸部1例，肩部1例。創口面積：1.2 cm×1.7 cm～5.2 cm×5.6 cm。表淺擴散型20例，雀斑樣型8例，結節型5例；Clark分級：Ⅰ級1例，Ⅱ級9例，Ⅲ級13例，Ⅳ級7例，Ⅴ級3例。治療組男性12例，女性7例；年齡32～62歲；平均(44.4±7.8)歲；病程9個月～5.6年，平均(2.6±0.7)年；足底部13例，面部2例，上肢1例，下肢1例，胸部1例，肩部1例。創口面積：1.1 cm×1.7 cm～5.1 cm×5.5 cm；表淺擴散型14例，雀斑樣型3例，結節型2例；Clark分級：Ⅰ級1例，Ⅱ級3例，Ⅲ級9例，Ⅳ級5例，Ⅴ級1例。兩組一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

兩組患者均行根治手術治療，具體方法為：手術均在全麻下進行，沿原發病灶1.5～2.0 cm范圍切除病灶，切除深度約至深筋膜。對照組在根治術后，經病理檢查證實切緣及腫塊深面無腫瘤浸潤后，直接進行移植皮修復。治療組：在根治術后第3 d起，給予α-2b干擾素聯合白介素-2進行免疫治療；具體方法：α-2b干擾素，300萬單位/次；白介素-2，100萬單位/次；分別肌肉注射15次。術后第3個月和第6個月，再給予上次相同方法各治療一次。

1.3 觀察指標

術中情況比較：記錄和比較兩組患者整個治療過程所需時間和出血量。

對所有患者術后3年內進行隨訪，分別記錄和比較治療后第1年、第2年和第3年患者生存率。

檢測兩組血清基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平，均采用酶聯免疫法檢測，MMP-9試劑盒為上海樊克生物科技有限公司產品，批號FK-pk0069；MMP-9試劑盒為上海冠東生物科技有限公司產品，批號BMH075。

1.4 統計學處理

數據應用SPSS 17.0軟件分析，計量資料用表示，分析采取配對t檢驗，計數資料分析采取χ2檢驗分，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療所需時間和術中出血量比較

治療組患者整個治療過程平均所需時間和出血量分別為(2.25±0.43)h和(595.78±1495.72)mL，明顯少于對照組的(2.34±0.51)h和(604.27±155.33)mL，比較差異均無統計學意義(P>0.05)。

2.2 兩組患者生存率比較

治療組治療后第1年患者生存率高于對照組，但差異無統計學意義(P>0.05)；治療組第2和第3年生存率明顯高于對照組，比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組3年內生存率比較(例，%)

2.3 兩組血清MMP-2和MMP-9含量比較

兩組治療后血清MMP-2和MMP-9含量均明顯下降(P<0.0，P<0.01)；治療組治療后MMP-2和MMP-9含量均明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 兩組血清MMP-2和MMP-9含量比較

3 討論

皮膚黑色素瘤為最常見皮膚惡性腫瘤，隨著大氣臭氧層破壞加強，其發病率呈明升高，且遠超于其他惡性腫瘤[3]。初步分析其可能與紫外線的過渡照射密切相關[4]。此外，調查發現該病多見于男性，男性多見于背部，女性多見于上肢和腿部。本研究中病例呈現年齡最小30歲，好發于足底部，病理分級以Ⅲ級為主等特點。

皮膚黑色素瘤惡性程度高，好轉移，預后多不理想，臨床盡早進行手術根治是最理想療法。但對于病灶切除范圍多大更有利于臨床根治一直存在爭議。以往常認為切除病灶邊緣越寬，效果越好；因此，以5 cm邊緣灶是過去常用的切除標準[5]。國內學者也認為，皮膚黑色素瘤的手術根治術在病灶切除深度方面更為重要[6]。參照國內外最新標準，本研究沿原發病灶1.5～2.0 cm范圍切除病灶，切除深度約至深筋膜，取得良好效果。

應用免疫療法治療各種腫瘤的臨床研究不斷發展，在黑色素瘤的治療中也已被證實療效良好。針對惡性黑色素瘤的免疫治療制劑也有多種，如伊匹單抗等[7]。在目前的臨床研究中，在黑色素手術治療中同時給予免疫治療的確切療效及可能作用機制仍需進一步探討[8]。本研究中筆者在常規手術治療后，加用免疫制劑α-2b干擾素聯合IL-2治療取得良好效果；α-2b干擾素和IL-2為多肽類活性分子，均由活化的間質細胞或免疫細胞(如單核/巨噬細胞、NK細胞以及B淋巴細胞等)合成分泌[9]。研究證實，α-2b干擾素與IL-2可調節細胞生長、分化成熟，參與免疫應答和炎癥反應，促進創傷愈合以及腫瘤消長等作用[9]。

本研究結果顯示：兩組患者整體治療過程中手術操作所需時間一致，比較差異無統計學意義(P>0.05)；而治療后對患者的生存影響結果發現，加用α-2b干擾素聯合IL-2后患者的第2和第3年的生存率明顯高于對照組(P<0.05)，以上提示在皮膚黑色素瘤手術根治中采取α-2b干擾素聯合IL-2對于疾病的整個治療過程具有重要意義。

腫瘤浸潤、轉移是一個動態的、復雜的過程，在這一過程中基質金屬蛋白酶(MMPs)家族發揮了重要的作用調節作用[10]。目前已經證實，MMP-2 和MMP-9在肺癌、胃癌、乳腺癌和頭頸部癌等惡性腫瘤中均高表達，且與腫瘤的復發轉移和預后差密切相關[11-12]。但MMP-2 和MMP-9在皮膚黑色素瘤患者外周血中的表達卻少見報道。MMP-和MMP-9 均可降解細胞外基質及基膜中的膠原和彈力蛋白等成分，破壞基膜，從而腫瘤細胞侵襲結締組織，引起小血管和淋巴管而發生轉移[13]。

本組研究顯示，手術聯合α-2b干擾素和IL-2治療后患者血清MMP-2和MMP-9水平均明顯低于治療前和對照組，比較差異有統計學意義(P<0.01)；提示在皮膚黑色素瘤手術根過程中，采用α-2b干擾素聯合IL-2免疫治療可經免疫作用，增強自身抗腫瘤能力，間接清除手術腔內滲液和組織碎塊，這些可能是聯合免疫療法治療降低患者血清MMP-2和MMP-9水平的重要因素所在，而通過降低患者血清MMP-2和MMP-9水平可能與免疫療法發揮抑制腫瘤生長密切相關。

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(編輯：吳小紅)

Clinical Study of Immunotherapy in Operation Treatment for Cutaneous Malignant Melanoma

WANGHuabin.HubeiUmorHospital,Wuhan,430079

Objective To study the clinical value of immunotherapy in operation treatment for cutaneous malignant melanoma.Methods 52 cases of cutaneous malignant melanoma were randomly divided into the treatment group and the control group by different operation treatment.The control group was treated by free tissue flap transplantation after tumor resection.The treatment group was treated by immunotherapy during operation treatment,and then free tissue flap transplanatation.Time and amount of bleeding of whole treatment course were compared between the 2 groups.1-,2- and 3-year survival rates were compared .Serum levels of MMP-2 and MMP-9 were detected of the 2 groups.Results Time and amount of bleeding of whole treatment course in the treatment group were(2.25±0.43)h and (595.78±149.72)mL,which were lower than (2.34±0.51)h and (604.27±155.33)mL in the control group(P>0.05).After treatment,2- and 3-year survival rates of the treatment group were obviously higher than those of the control group(P<0.05).Serum levels of MMP-2 and MMP-9 in the treatment group were remarkably lower than those of the control group (P<0.01).Conclusion In operation treatment of cutaneous malignant melanoma,immunotherapy could increase efficacy,improve survival rate,and decrease serum levels of MMP-2 and MMP-9,it is worthy of clinical application.

Cutaneous malignant melanoma；Immunotherapy；MMP-2；MMP-9

430079 湖北省腫瘤醫院

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.09.051

R739.5

A

1001-5930(2016)09-1553-03

2015-10-08

2016-04-05)