羅微：癌癥“戰士”

羅微：癌癥“戰士”

本刊記者 徐 賽

生活照

在我們體內的淋巴細胞中，存在一類細胞，它可以直接殺傷靶細胞、輔助或抑制B細胞產生抗體，對特異性抗原和促有絲分裂原發生免疫應答并產生細胞因子等，被稱作是身體中抵御疾病感染、腫瘤形成的“斗士”。它就是胸腺依賴性淋巴細胞，簡稱為“T細胞”。

佛山市第一人民醫院臨床醫學研究所所長羅微同樣也是一位“戰士”，她與顯微鏡下的“T細胞”并肩作戰，共同抗擊威脅人類健康的頭號殺手——癌癥。踏足T細胞免疫識別活化的基礎和應用研究領域以來，她先后主持了國家自然科學基金1項、廣東省自然科學基金3項、廣東省醫學科研基金1項、廣東省創新人才2項、佛山市科技創新平臺1項、廣州市科技計劃1項；申請專利14項，已獲授權5項。

伴著“敢于冒險、敢于拼搏、敢于挑戰”的精神，羅微懷揣夢想，一直堅持奮斗在抗癌幕后，潛心研究，以待成果惠及更多的病患。

歲月青蔥 初出茅廬

2003年，從三峽大學醫學院臨床醫學系本科畢業的羅微進入葛洲壩水利水電工程集團，成為溫泉療養院的一名醫師，收入叫同齡人羨慕，工作也十分清閑，但安逸的生活無法泯滅她對夢想的追求。1年后，她考入了廣東省南方醫科大學（原第一軍醫大學），重新邁入大學校園攻讀碩士。在碩士階段，羅微就已初露鋒芒。她參與國家“973”計劃項目“疾病相關的免疫識別技術與免疫耐受的研究（2003CB514113）”，建立起檢測TCR庫多樣性的CDR3譜型GeneScan技術平臺，并應用于系統性紅斑狼瘡、CMV感染、肺結核等疾病研究，發表論文10篇、SCI收錄7篇。

T細胞產生的免疫應答是細胞免疫。與靶細胞特異性結合，破壞靶細胞膜，進而直接殺傷靶細胞是細胞免疫的一種效應形式。然而，T細胞要想準確地找到宿主細胞，還需要特殊的介質，即特異性識別抗原并與之結合的分子結構，稱為“T細胞抗原受體”（T cell receptor，TCR）。

TCR是一種由α和β鏈或γ和δ鏈聚合而成的雙肽鏈分子。T細胞在發育過程中其α、β或γ、δ經過基因重排，最終在細胞表面表達不同的TCR，在克隆水平顯示各自的特異性，在個體水平則呈現豐富的多樣性。外周血中約95%的T細胞表達αβTCR，TCR的多樣性由α鏈和β鏈的V區決定，Vα和Vβ各有3個CDR，但只有CDR3直接和抗原相互作用，故TCR的多樣性主要由CDR3決定。由此可見，檢測TCR庫多樣性，可了解T細胞的組成和功能，對于腫瘤診斷和治療均有重要參考價值。

在碩士階段建立了CDR3譜型GeneScan技術平臺后，羅微沒有停止前進的腳步，在隨后的讀博和工作階段，她作為第二負責人，在傳染病防治重大專項、國家自然科學基金和廣東省自然科學基金重點項目資助下，率先開展TCR庫多樣性及其臨床意義研究，發現結直腸癌患者TCR庫變化與療效相關、結核患者疾病嚴重度與TCR庫相關，發表SCI論文5篇。同時，她完善了CDR3譜型分析技術平臺，在利用該平臺找到抗原特異TCR的基礎上，建立了TCR基因修飾T細胞技術，找到MTB抗原特異性TCR，證實其修飾的T細胞具有顯著的抗結核活性，并首次在國內權威雜志《科學通報》上發表。值得一提的是，僅僅用了兩年的時間，她就取得了南方醫科大學免疫學博士學位。

在前期研究的基礎上，羅微繼續優化了技術平臺，通過突變C區9個氨基酸，促使外源性α、β穩定結合，減少內外源性錯配，極大地提高了轉導TCR的胞膜表達水平和活性，文章發表在國際分子醫學領域知名期刊J Mol Med上。相關研究成果獲授權發明專利5項，并受到國際同行普遍關注。據悉，她現已與美國賓夕法尼亞大學和澳大利亞臥龍崗大學開展深入合作。

心懷夢想 突飛猛進

2012年，羅微入選廣東省“千百十工程”校級培養對象；2013年被評為廣州市“珠江科技新星”；2015年，由南方醫科大學調動到佛山市第一人民醫院工作，出任臨床醫學研究所所長。

臨床醫學研究所成立于1994年，是佛山市第一人民醫院大型綜合性重點開放實驗室研究平臺。現有基因工程實驗室、蛋白免疫學實驗室、細胞培養實驗室、分子生物學實驗室、分子遺傳學實驗室、生物樣本庫等6個功能實驗區，實驗室面積約1300平方米，擁有FACSCalibur流式細胞儀、ABI-7500熒光定量PCR儀、超速冷凍離心機等先進設備。

2015年6月底，除了流式外，研究所將其他全部臨檢項目移交給了檢驗科，專心開展科研并確立了“TCR庫分析及其在T細胞免疫相關疾病中的臨床應用”和“含IL-10受體阻斷劑的HPV治療性疫苗”兩個研究方向。羅微主要圍繞前者展開科研，在研究所，她的研究再次上了一級臺階。

“鼻咽癌患者T細胞受體庫多樣性特點及其臨床意義研究”是由羅微主持的一項國家自然科學基金項目。“鼻咽癌是廣東省高發的惡性腫瘤，早發現、早治療是提高生存率的關鍵”，鼻咽癌的發生發展與患者T細胞免疫功能密切相關。項目以鼻咽癌作為切入點，利用已建立的CDR3譜型分析技術與最新的擴增子救援多重PCR和高通量測序技術相結合，建立鼻咽癌患者腫瘤組織和外周血T細胞亞群治療前后多個階段TCR庫，分析其多樣性與療效相關性，為其應用于復發、轉移和預后判斷提供依據；同時，通過分析優勢克隆TCR，建立鼻咽癌特征性TCR譜，為早期診斷提供新的分子標識。項目不僅為TCR庫分析輔助鼻咽癌臨床診斷和治療提供依據，也為其他T細胞免疫相關疾病的同類研究提供模式和平臺。

目前，依托研究所標本庫，項目組對收集到外周血樣本的400余例鼻咽癌患者的臨床資料進行了整理和統計，篩選出102名鼻咽癌患者作為研究對象，同時收集108份非癌鼻咽炎患者外周血樣本作為對照。依據課題設計，按照實驗方案對4名鼻咽癌患者和4名非癌患者的樣本進行TCR庫構建預實驗。經過3個多月的摸索，終于建立了穩定的、自主創新的全序列高通量TCR庫實驗技術平臺。

團隊合影（前排左四為羅微）

勇于創新 攀登高峰

2016年，羅微入選廣東省“特支計劃”（高層次人才特殊支持計劃）科技創新青年拔尖人才，并獲得廣東省自然科學杰出青年基金資助，在腫瘤細胞免疫治療領域開展新的探索。

惡性腫瘤近年來不斷呈現年輕化、發病率和死亡率“三線”走高的態勢。據不完全統計，我國每年新發癌癥病例312萬，因癌癥死亡人數180萬，存量癌癥患者約3000萬。“由于起病隱匿，早期癥狀不明顯，絕大多數惡性腫瘤確診時已為中晚期，療效仍不盡如人意，相關腫瘤治療5年生存率長期處于瓶頸，復發和遠處轉移仍是擺在我們面前的現實問題。手術、放化療等傳統治療技術進入平臺期，難以遏制腫瘤快速發展的態勢，所以亟需開發新的治療手段應用于臨床”，羅微道出了腫瘤治療面臨的困境。

于是在已建立的技術平臺基礎上，羅微計劃建立腫瘤抗原特異性TCR儲備庫，并在動物體內實驗驗證TCR基因修飾T細胞的抑瘤作用和安全性。以肺癌、肝癌、結直腸癌這三種我國最常見的惡性腫瘤為代表，針對每一癌種建立攜帶腫瘤組織中CTL優勢取用TCR的載體庫，為其應用于TCR基因修飾T細胞過繼免疫治療奠定基礎；其次，利用已建立的高通量全克隆TCR庫檢測技術平臺，分析癌癥患者腫瘤組織中CD8+T細胞亞群的TCR庫，篩選出優勢取用的TCR，將其V（D）J基因人工合成后插入到預先制備好的載體中；最后，用TCR基因修飾腫瘤患者外周血T細胞，并鑒定TCR基因修飾的T細胞對腫瘤細胞的殺傷活性，將能介導較高殺傷活性的TCR納入到腫瘤抗原特異性TCR儲備庫中，作為將來TCR基因修飾T細胞過繼免疫治療腫瘤的TCR基因來源。目前，項目正在順利開展中。

一路走來，作為女性科研工作者，羅微承受了更多的壓力，但她憑借對科研事業的熱愛和堅韌的品格將一切默默扛在肩頭。未來，她仍會以“人無我有、人有我優”的創新精神去實現自己最初的夢想，繼續投身與癌癥的“戰斗”。路漫漫其修遠兮，靜待碩果滿枝。