血液溫度和貯存時間對去白細胞血液質量效果分析*

魯國勇，朱榮華，李維錦,陳兆慶，謝函凌，段志燕

(云南省保山市中心血站 678000)

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·臨床研究·

血液溫度和貯存時間對去白細胞血液質量效果分析*

魯國勇，朱榮華△，李維錦,陳兆慶，謝函凌，段志燕

(云南省保山市中心血站 678000)

目的 了解血液的溫度、采血后貯存時間對去白細胞血液制備的影響，尋找白細胞濾除的最佳溫度和貯存時間，為臨床提供更加優質的血液制品，讓更多患者受益。方法 按照血液溫度、采血后貯存時間，對濾后白細胞殘存量、紅細胞回收率效果進行統計分析。結果 (1)血液溫度的影響，通過397份標本的觀察，血液溫度在10 ℃及以下172份，合格率86.62%(149/172)；10 ℃以上225份，合格率61.77%(139/225)。2組白細胞濾過合格率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=30.22，P<0.05)。(2)采血后貯存時間的影響，通過545份標本的觀察，采血后貯存時間4 h內濾除208份，合格率59.13%(123/208)；4～12 h內濾出189份，合格率 87.30%(165/189)；12～48 h內濾除 148份，合格率 86.48%(128/148)；3組白細胞濾過率經過χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=18.16，P<0.05)。結論 結合當地實際，云南保山無償獻血血液白細胞去除工作最佳濾出溫度，血液溫度控制在2～10 ℃。兼顧到冷沉淀的制備時效(8 h內)，血液貯存4～8 h內進行白細胞濾出工作為最佳過濾時間。

白細胞； 時間； 溫度； 分析

臨床上由輸血引發的各種疾病越來越引起人們的重視，輸注過濾去除白細胞血液避免因輸入獻血者的白細胞而引起的非溶血性發熱性輸血反應(FNHTR)和同種免疫反應，防止輸血相關性移植物抗宿主病(TA-GVHD)的發生預防巨細胞病毒(CMV)感染，減少輸血引發的病毒性傳染疾病和血小板輸注無效等，是提高輸血療效和安全的有效手段，在臨床治療中，對輸血安全、臨床治療效果、成分血的保存起著十分重要的作用。去除白細胞血液質量又有明確規定GB18469-2012[1]，保山市對去除白細胞工作無數據可查，為保證質量，保山市中心血站開展濾除白細胞最佳溫度和最佳貯存時間觀察，以彌補保山少白細胞血液工作數據的空缺。現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 全血；一次性使用去白細胞多聯采血袋；大容量Nageotte血細胞計數板；普通顯微鏡；邁瑞BC-5300全自動血液細胞分析儀，溫差電偶溫度儀。

1.2 方法 隨機抽取采血時間在48 h內(采血時在血袋外用記號筆標明采血時間T0)用去白細胞多聯袋采集的全血，在濾除白細胞前測量全血溫度(三明治夾心法)，記錄測量溫度，在過濾開始時記錄時間(T1)，結束時記錄時間(T2)，過濾時間T=T2-T1，血液的貯存時間T=T1-T0。根據血液不同的測量溫度值、血液的貯存時間，白細胞、紅細胞計數，統計分析溫度對白細胞濾除效果(白細胞殘留量)以及對紅細胞的影響(紅細胞回收率)。

1.3 紅細胞、白細胞計數及過濾后白細胞驗證 過濾前、后用全自動血細胞計數儀計數白細胞、紅細胞。驗證白細胞：50 μL大容量Nageotte血細胞計數盤計數。

1.4 判定合格標準 白細胞殘留量小于2.5×106/U；紅細胞回收率為≥85%。

2 結 果

2.1 溫度對濾除白細胞的影響 通過397份標本的觀察，血液溫度在2～10 ℃ 172份，通過濾除白細胞后，合格率86.7%(149/172)，紅細胞回收率為92.9%；10～15 ℃150份，合格率74.0%(111/150)，紅細胞回收率為89.9%；15 ℃以上75份，合格率37.3%(28/75)，紅細胞回收率為91.2%；3組白細胞濾過率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=63.97，P<0.05);濾前溫度10～15 ℃、15 ℃以上兩組白細胞濾過合格率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=28.47，P<0.05)。

將濾前血液溫度2～10 ℃的172份分解為2組(2～8 ℃和8～10 ℃)進行白細胞濾過效果分析，其中2～8 ℃組35份，合格31份，不合格4份，合格率為88.57%，紅細胞回收率97.40%；8～10 ℃組137份，合格118份，不合格19份，合格率為86.13%，紅細胞回收率92%；兩組白細胞濾過合格率經χ2檢驗，差異無統計學意義(χ2=0.143，P>0.05)。

2.2 過濾溫度與過濾時間分析 血液溫度高，過濾時間短；溫度低，過濾時間長，見表1。

表1 過濾溫度與過濾時間的關系±s，min)

2.3 貯存時間對濾除白細胞效果的影響 通過545份標本的觀察，采血貯存時間4 h(A組)內濾除208份，合格率59.13%；4～12 h(B組)內濾出189份，合格率87.30%；13～48 h(C組)148份，合格率 86.48%，見表2。3組白細胞濾過率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=18.16，P<0.05)。兩兩比較，A組與B組白細胞合格率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=39.44，P<0.05)；A組與C組白細胞合格率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=31.11，P<0.05)；B組和C組白細胞合格率經χ2檢驗，差異無統計學意義(χ2=0.05，P>0.05)。

表2 貯存時間對濾除白細胞的影響

2.4 貯存溫度與時間之間的關系 溫度與貯存時間(8 h內)之間存在著負相關，Pearson相關系數(r=-0.691,P<0.05),其中200 mL相關系數(r=-0.753,P<0.05),300 mL相關系數(r=-0.742,P<0.05),400 mL相關系數(r=-0.396,P<0.05)。

3 討 論

本課題主要研究同一白細胞濾器對血液溫度和采血后貯存時間的影響。血液溫度在10 ℃及以下通過濾除白細胞后，合格率86.6%(149/172)，紅細胞回收率為92.9%；10 ℃以上合格率61.7%(139/225)，紅細胞回收率為90.2%。2組白細胞濾過合格率經χ2檢驗，差異有統計學意義(χ2=30.22，P<0.05)。說明血液溫度低過濾后白細胞去除率顯著提高，這與謝如鋒等[2]的研究結果相一致。效果較溫度高好。因為血液放置在2～6 ℃冰箱一段時間后白細胞、血小板和纖維蛋白凝聚形成微聚體從而容易被去除[3]。另外白細胞在4～6 ℃中變形能力差，容易被白細胞濾器攔截。在制備去白細胞血液過程中，去白細胞血液質量與濾器的材質也有很大關系。

從過濾時間看，200、300、400 mL 3種規格型號的血袋，血液溫度2～10 ℃組過濾時間均較10 ℃以上組均有延長1～2 min。當血液溫度降低時，血液黏度增加，流速減小，白細胞因重力慣性過濾機理穿過濾材的減少，使血液過濾材料中滯留的時間增長，有利于白細胞被濾材截留[4]。另外，當溫度降低時，細胞膜脂質雙分子層的流動性減弱，細胞的變形能力變差，使白細胞更容易被過濾材料截留[2]。

溫度與貯存時間(8 h內)之間存在著負相關，Pearson相關系數(r=-0.691,P<0.05),其中200 mL相關系數(r=-0.753,P<0.05),300 mL相關系數(r=-0.742,P<0.05),400 mL相關系數(r=-0.396,P<0.05)。血液在4 ℃貯存5 h后，血液溫度已均勻降至8 ℃左右[5]。本次觀察127份血液貯存在(4±2)℃冰箱5 h后溫度，血液溫度降至10 ℃以下97份，占76.38%，與相關研究基本一致。

4～8 h組與13～48 h(隔夜)組比較，紅細胞回收率13～48 h組稍有降低外，白細胞濾除效果并無顯著提高。過濾時間有一定延長。因此，對本文所使用的濾器而言，其過濾機制可能是以篩濾為主，血液溫度對白細胞濾除有顯著影響。增加貯存時間未能產生進一步的影響，僅使紅細胞回收率略有下降，其機制有待進一步研究。

白細胞在(4±2)℃只能保存5～8 d，全血在4 ℃儲存7 d，25%的粒細胞已不完整。隨著細胞的死亡和裂解，細胞碎片增加，它們中有些仍然含有HLA-Ⅱ類抗原，不能被去白細胞濾器濾除，同樣可引起同種免疫反應。現在許多研究者普遍認為，貯存前去除白細胞比貯存后去除白細胞更為優越，Yaprak等[6]研究了貯存前去除白細胞和貯存后去除白細胞的血液中生物活性物質的變化，細胞外髓過氧化物酶(MPO)、嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(BCP)，組胺(HIS)和Ⅰ型纖溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)在未濾除白細胞的血液中均呈現時間依賴性累計增加，貯存前濾除白細胞可預防這些物質的產生。

血液的貯存時間、貯存溫度、血漿的量、過濾前白細胞的量、過濾時間的長短、濾過時血液的流速等都會影響白細胞的去除效果[7]。本次研究的一次性濾除白細胞血袋，在保山市的最佳濾過濾時間為采血后4～8 h為最佳時間，最佳濾除溫度為2～10 ℃。在今后的工作中找出各種型號濾器血液濾除白細胞效果好、操作簡單的制備方法，掌握血液的最佳濾除白細胞時機是今后努力的方向。

[1]中華人民共和國衛生部.全血及成分血質量要求[M].北京:中國標準出版社,2012.

[2]謝如鋒,李云,戴勇超，等.血液溫度、貯存時間制備去白細胞全血的影響[J].臨床輸血與檢驗,2005,7(3):196-197.

[3]楊成民,李家增,季陽.基礎輸血學[M].北京:中國科學技術出版社,2001:444-446.

[4]柯勤飛.非組造濾材白細胞過濾膜型研究[J].中國紡織大學學報,2000,26(3):23-28.

[5]孟莉，黃慶香.影響去白細胞濾器效果的因素分析[J].中國輸血雜志,2015,28(9):1133.

[6]Yaprak I,Yercen N.Acomparison of different filters for white cell reduction[J].Turk，35(3):113-115.

[7] 劉加軍,伍新堯,潘祥林,等.去白細胞輸血治療對惡性血液病化療患者細胞免疫功能的影響[J].實用診斷與治療雜志,2004,18(1):6-7.

云南省保山市科技立項項目(保科字[2016]19號)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.037

A

1673-4130(2016)23-3334-03

2016-06-11

2016-09-01)

△通訊作者，E-mail:77531164@qq.com。