不同免疫學檢驗方法對于結核病的臨床價值研究

高正洪

(江蘇省靖江市人民醫院檢驗科 214500)

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·臨床研究·

不同免疫學檢驗方法對于結核病的臨床價值研究

高正洪

(江蘇省靖江市人民醫院檢驗科 214500)

目的 探討蛋白芯片法與膠體金法對于結核病的臨床價值。方法 選取該院從2015年2～11月所收治的90例確診結核病患者作為臨床研究對象，同時采用蛋白芯片法與膠體金法進行檢測并比較兩種檢測方法的差異性，分析不同方法在結核病輔助診斷當中的臨床價值。結果 結核組患者的膠體金法陽性反應率為73.3%(66/90)，顯著高于對照組[7.8%(7/90)]，差異有統計學意義(P<0.05)；結核組患者蛋白芯片法的阿拉伯甘露糖脂(LAM)、蛋白16kD和蛋白38kD陽性反應率為53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90)，高于對照組5.6%(5/90)、0%(0/60)和5.6%(5/90)，差異有統計學意義(P<0.05)。結果表明，結核組患者的膠體金法陽性反應率顯著高于蛋白芯片法陽性反應率，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 膠體金法在結核病的輔助診斷中更有優勢，其靈敏度高、操作簡單，有利于推廣，對于結核病的早診斷、早治療具有較強實用性，是一種比較理想的免疫學檢驗方法。值得在今后臨床工作中推廣應用。

結核病； 診斷； 蛋白芯片法； 膠體金法

據研究報告，目前世界上大約1/3的人口被結核菌感染，而我國又是世界上結核病高負擔國之一，因此對于結核病的防控診治刻不容緩[1]。目前對于結核病的診斷，主要憑借對患者癥狀、體征、痰涂片培養以及影像學檢查，但對于不典型肺結核的診斷仍是臨床上棘手的問題。此外，影像學的檢查令結核病檢查變得快速、有效，大大提升了診斷效率，但無法找到結核菌確診。痰培養需時較長，肺結核痰培養的陽性反應率不高，容易導致漏診與誤診[2]。

結核病屬于免疫介導慢性疾病，采用免疫學檢驗方法對抗體進行檢測以輔助診斷結核病是較佳的方法。目前，蛋白芯片法與膠體金法是比較成熟的兩種免疫學檢驗方法。蛋白芯片法是同時對結核菌阿拉伯甘露糖脂(LAM)、蛋白16kD和蛋白38kD進行檢測，從而診斷結核菌的感染情況。膠體金色法則是采用葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物對結合IgG抗體進行標記呈色，從而判斷是否感染結核菌。本研究將2015年2～11月在本院治療的結核病患者90例作為研究對象，同時采用兩種不同方法進行檢測，比較兩種檢測方法的差異性，分析不同方法在結核病輔助診斷當中的臨床價值?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2015年2～11月所收治的90例確診結核病患者作為研究對象，其中男49例，女41例，年齡18～83歲，平均(46.7±11.2)歲。結核病類型：肺結核83例，結核性腦膜炎2例，結核性胸膜炎3例，骨關節結核2例。所有患者均符合人民衛生出版社2002版《內科學》的相關診斷標準[3]。另選取90例非結核病患者作為對照組，其中慢性支氣管炎27例，支氣管肺炎10例，急性上呼吸道感染13例，肺癌18例，淋巴結炎12例，塵肺10例。

1.2 方法[4]

1.2.1 蛋白芯片法 選擇結核分枝桿菌IgG抗體檢測試劑盒及 PBT-X2型芯片閱讀儀(南京大淵生物技術工程有限責任公司生產)對患者血清進行檢測，以3種結核菌復合群特異性抗原：LAM、蛋白16kD和蛋白38kD以檢測血清之中的抗體，若任一抗體檢測為陽性則判定患者為陽性。若3種抗體檢測全為陰性則判斷為陰性。

1.2.2 膠體金法 采用迪比多試劑盒(上海奧普生物科技有限公司生產)對患者血清進行檢測，采用斑點免疫膠體金滲濾技術，對結核分枝桿菌特異性膜蛋白抗原進行分離純化，再在硝酸纖維素膜上點樣再固定，膜上的結核抗原會和人血清中的結核分枝桿菌抗體進行結合，再用葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物和結合之后的結核IgG抗體的呈色，若出現紅色斑點，則判定患者為陽性。

1.3 統計學處理 采用SPSS19.0統計學軟件包對數據進行處理，計數資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

結核組患者的膠體金法陽性反應率為73.3%(66/90)，顯著高于對照組[7.8%(7/90)]，差異有統計學意義(P<0.05)；結核組患者的蛋白芯片法檢測LAM、蛋白16kD和蛋白38kD陽性反應率為53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90)，高于對照組5.6%(5/90)、0%(0/60)和5.6%(5/90)，差異有統計學意義(P<0.05)。結果表明，結核組患者的膠體金法陽性反應率顯著高于蛋白芯片法陽性反應率，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 蛋白芯片法和膠體金法對結核病的陽性反應率比較[n(%)]

注：與對照組比較，*P<0.05；與蛋白芯片法比較，#P<0.05。

3 討 論

結核病指的是顯微鏡下或者培養后的陽性結核分枝桿菌結果，或者具有影像學和臨床結核病特征，患者常有低熱、夜間盜汗和咳嗽等癥狀。目前，結核病已占據全世界感染性疾病死亡的首要原因，嚴重危害人們的生命健康，根據全國性的流行病學調查，我國活動性肺結核患病率為367/10萬，涂陽性肺結核患病率122/10萬，菌陽患病率為160/10萬[5]。在基礎衛生條件薄弱和群眾醫療意識不足的地區情況尤為嚴峻。

因此如何快速準確地診斷并予以有效的治療，意義重大。目前，分枝桿菌培養是診斷結核病的金標準，但培養的周期長，一般需要6周才能確診，因此影響了早期診斷和及時治療，甚至可能造成疾病的傳染[6]。影像學診斷快速有效，但若患者癥狀不典型，可能會造成誤診或漏診。近年來，血清免疫學檢驗方法逐漸廣泛應用，以補充影像學和痰涂片培養法的不足。而其中，蛋白芯片法和膠體金法是最為常用的兩種方法。

蛋白芯片法是采用結核菌特異性細胞壁脂多糖抗原LAM與基因工程充足DNA技術生產純化了的蛋白16kD和蛋白38kD特異性抗原固定在同一膜片上面，令抗原反應快速在固相膜中進行，再通過免疫金為標志物以顯色于膜上，實現對結核病的檢測[7]。

LAM為分枝桿菌屬于細胞壁的組成部分，屬于特異抗原，檢驗的靈敏度比較高。然而，除了結核分枝桿菌之外，還有多種分枝桿菌也含有LAM，因此其特異度不高[8]。而蛋白16kD和蛋白38kD屬于結核分枝桿菌的特有抗原，和其他分枝桿菌沒有交叉反應，因此特異度比較高。

膠體金法是采用斑點免疫膠體金滲濾技術，把結核分枝桿菌的特異性膜蛋白抗原進行分離純化后，采用葡萄球菌A蛋白對結核IgG進行檢測，并根據是否出現紅色斑點確定是否感染結核病[9]。膠體金法具有以下優勢：(1)結果穩定。由于血清中IgG的含量相對穩定，不會受到細菌活力與形態影像，因此其測驗的穩定性高；(2)使用方便。膠體金法不需要貴重的檢測儀器和材料，而且操作簡單，一般而言十多分鐘就能出結果，因此推廣型比較強[10]；(3)準確率高。和蛋白芯片法比較，膠體金法的檢測準確率比較高，適合用于臨床檢測。

本研究也表明，不同組別患者在兩種方法檢測的陽性反應率比較差異均有統計學意義(P<0.05)，表明不同免疫學檢驗方法均能有效對結核病進行診斷。而兩種方法的診斷有效率比較中，膠體金法陽性反應率為73.3%(66/90)，高于蛋白芯片法的LAM、蛋白16kD和蛋白38kD陽性反應率為53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90)，表明膠體金法較蛋白芯片法有更高的診斷效果。有研究表明，若同時采用兩種方法檢測，并不會有效提高診斷準確率，提示在兩種方法中，膠體金法是更好的選擇。

綜上所述，膠體金法在結核病的輔助診斷中更有優勢，其靈敏性高、操作簡單，有利于推廣，對于結核病的早診斷、早治療具有較強實用性，是一種比較理想的免疫學檢驗方法。值得在今后臨床工作中推廣應用。

[1]滕巖，遲偉，姜順愛，等.蛋白芯片法與膠體金標記結核抗體法在結核病患者檢測中的臨床價值[J].中國民康醫學,2016,27(7):80-81.

[2]米曉燕，劉春燕，李小謀，等.蛋白芯片法檢測結核抗體在活動性結核病的診斷價值[J].吉林醫學，2011,32(31)：6545-6546.

[3]葉任高.內科學[M].5版.北京：人民衛生出版社，2002：94.

[4]羅招凡，丁鶴林，劉香梅，等.蛋白芯片法診斷結核病的臨床應用評價[J].熱帶醫學雜志,2006,6(8):899.

[5]黃勝，余繼英，成波，等．兩種免疫學檢驗方法對于結核病的臨床價值比較[J]．臨床肺科雜志，2013，18(11)：2051-2052．

[6]劉尚武，李王平，鄒遠嫵.膠體金與蛋白芯片結核抗體檢測方法在結核病輔助診斷中的臨床價值[J].中華肺部疾病雜志,2011,4(5):388-391.

[7]羅招凡，林向華，李競.蛋白芯片法與金標法及抗酸染色法診斷結核病的比較[J].現代檢驗醫學雜志，2007,22(2)：52-54.

[8]莫鳳明，劉愛菊，張璐，等.血清結核桿菌抗體膠體金法的應用價值[J].檢驗醫學與臨床，2012,9(9)：1118-1119.

[9]樊學軍，孫敏.結核病現狀及其實驗診斷技術在衛生檢疫中的應用[J].旅行醫學科學，2006,12(1)：41-44.

[10]王霖．膠體金法檢測結核抗體對結核病診斷的價值探討[J]．中外醫療，2010，20(12)：3-4．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.059

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