青海省部分地區牦牛流產原因初步調查

胡廣衛 ， 沈艷麗 ， 趙全邦 ， 晁宜林 ， 闞 威 ， 周繼章 ， 馬睿麟 ， 蔡金山

(1.青海省動物疫病預防控制中心 ， 青海西寧810001 ； 2.中國農業科學院蘭州獸醫研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室 ， 甘肅蘭州730046)

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青海省部分地區牦牛流產原因初步調查

胡廣衛1， 沈艷麗1， 趙全邦1， 晁宜林1， 闞 威1， 周繼章2， 馬睿麟1， 蔡金山1

(1.青海省動物疫病預防控制中心 ， 青海西寧810001 ； 2.中國農業科學院蘭州獸醫研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室 ， 甘肅蘭州730046)

為查明青海省部分地區牦牛流產的病因，用問卷調查的方法對4個縣(市)7個鄉的104個牧戶進行了牦牛流產情況調查，流產率平均為21.39%；用虎紅平板試驗和間接血凝試驗對采自4個縣(市)的616份牦牛血清分別進行了布魯菌病、衣原體病和弓形蟲病抗體檢側，陽性率分別為45.62%、68.34%和13.96%。結果表明，這些地區牦牛的流產與衣原體病和布魯菌病密切相關。

青海 ； 牦牛 ； 流產

青海省牦牛存欄量約570 萬頭，占世界牦牛的三分之一還要多。牦牛產業是牧區農牧民賴以生存的物質基礎和支柱產業，是高原牧區藏族同胞生產和生活物資的來源。近年來，據部分地區獸醫工作人員和牧民反映，牦牛的空懷率和流產率逐年升高，對畜牧業的健康發展造成了極大的影響。青海省多年來未對布魯菌病進行詳細調查，而各地對動物衣原體病越來越重視，牦牛衣原體病的流行病學資料比較多[1，3，8]，個別縣(市)的陽性率也比較高。另外，家畜的流產也與弓形蟲病的感染有一定的關系。為了查清這些地區牦牛流產與布魯菌病、衣原體病和弓形蟲病的聯系，我們開展了相關動物疫病的流行病學調查。近期，農業部將布魯菌病納入強制免疫動物疫病范圍后，有必要對牦牛衣原體病的情況進行一些調查和研究，所以我們及時開展了牦牛衣原體滅活疫苗研究與推廣項目。在項目依托下，我們深入牧區牧戶，采取問卷調查和血清學調查的方式，對衣原體病、布魯菌病和弓形蟲病3種動物疫病進行檢測，分析結果，提出防治建議。

1 材料與方法

1.1 入戶調查 以問卷調查的方式，共調查貴南、海晏、烏蘭和玉樹4 個縣(市)7 個鄉的104 個牧戶，調查內容包括牦牛存欄數、母牛數、懷孕數、產仔數、流產數等。

1.2 血清來源 在貴南、海晏、烏蘭和玉樹4 個縣(市)入戶調查的同時，采集并分離牦牛血清，共采集616份牦牛血清。

1.3 材料 布魯菌病虎紅平板凝集抗原、陰性血清、陽性血清；弓形蟲IHA 抗原、陰性血清、陽性血清及稀釋液；衣原體抗原、陰性血清、陽性血清及稀釋液均由中國農業科學院蘭州獸醫研究所提供。

1.4 試驗方法

1.4.1 布魯菌病 采集和分離后的血清，每份按30 μL滴加到玻璃板上，加入30 μL虎紅平板凝集抗原，混勻后3 min 觀察結果。當出現肉眼可見的凝集顆粒時，判為陽性；無凝集的判為陰性。

1.4.2 衣原體病 在V型反應板所有孔中加入稀釋液0.075 μL；第1 孔加入被檢血清0.025 μL，呈4 倍遞增稀釋3 孔。第3 孔棄去0.025 μL，同時設陰、陽性和空白對照各2 孔；每孔加入抗原0.025 μL，置振蕩器上震蕩2 min，蓋上玻璃板在37 ℃恒溫箱中作用2 h 判定結果。要求陽性對照孔各稀釋度完全凝集，陰性、空白對照孔不發生凝集，則試驗成立；被檢血清第2 孔(1∶16)出現“++”及以上凝集者為陽性；1∶4孔出現“+”及以下凝集者為陰性；1∶4 孔出現“++”至1∶16 孔出現“+”以下者為可疑。

1.4.3 弓形蟲病 反應在96 孔V 型微量有機玻璃反應板上進行，設陰陽性對照孔，每孔加75 μL稀釋液和被檢樣品、陰性、陽性血清25 μL，稀釋至第3 孔。每孔加25 μL 診斷抗原，之后將反應板置于微量振蕩器上1～2 min，蓋上一塊玻璃板以防落入灰塵，置37 ℃下作用2～3 h 后，進行結果判定。陽性對照血清各孔均為凝集(+)，陰性對照血清除第l孔允許存在前滯現象(+)外，其余各孔均不能出現凝集(-)，被檢血清抗體滴度達到1∶64判為陽性，50%凝集(++)為陽性終點。

2 結果

入戶問卷調查結果顯示，牦牛流產率從高到低分別是玉樹市32.19%、海晏縣31.26%、貴南縣19.30%、烏蘭縣16.51%，平均為21.39%，見表1。實驗室檢驗結果顯示，牦牛衣原體病血清學陽性率從高到低分別是海晏縣88.89%、貴南縣74.29%、玉樹市42.22%、烏蘭縣39.45%，平均為68.34%；牦牛布魯菌病血清學陽性率從高到低分別是海晏縣55.56%、玉樹市53.33%、烏蘭縣44.95%、貴南縣32.86%，平均為45.62%；牦牛弓形蟲病血清學陽性率從高到低分別是烏蘭縣20.18%、貴南縣 15.71%、海晏縣 13.53%、玉樹市3.33%，平均為13.96%，見表2。除了弓形蟲病的血清學陽性率較低外，布魯菌病和衣原體病的陽性率均比較高。

3 討論

本次牦牛流產的調查是在問卷調查的基礎上，以血清學監測為主進行的。從問卷調查結果來看，4縣(市)牦牛流產率為16.51%～32.19%，平均 21.39%，比侯生庫等[2]的調查結果要高；相對應的，血清學調查結果顯示，衣原體病、布魯菌病和弓形蟲病的陽性率分別為68.34%、45.62% 和13.96%，相對于馬怡雋[1]和張立成等[3]開展的衣原體病血清學調查、王云平[4]和趙啟明等[5]進行的布魯菌病調查、李曉卉[6]和陳世堂等[7]進行的弓形蟲病血清學調查結果來說，陽性率高出很多。這與問卷調查和血清學調查都集中在牦牛發生流產情況比較嚴重的牧戶中進行有關，但也說明了這些地區牦牛比較嚴重，同時與多種動物疫病有關。

表1 2014-2015年貴南、海晏、烏蘭和玉樹

表2 2014-2015年貴南、海晏、烏蘭和玉樹4縣(市)

血清學監測結果中，貴南、海晏、烏蘭和玉樹4 縣(市)牦牛衣原體病陽性率分別為74.29%、88.89%、39.45%和42.22%，處在較高的水平，特別是牦牛衣原體滅活疫苗研究與推廣項目的試點縣貴南和海晏，陽性率在80%左右。周繼章等[8]報道了用間接血凝試驗對采自青海的牦牛血清檢測衣原體抗體，結果平均陽性檢出率為18.7%。馬怡雋等[1]報道了用正向間接血凝試驗對全省227 份牛血清進行了檢測，平均陽性率為26.4%。張立成等[3]報道了用正向間接血凝試驗對全省506 份牛血清進行了檢測，平均陽性率為36.8%。本次調查平均陽性率為68.34%，由此可見，近些年來青海省牦牛衣原體病的陽性率呈逐年上升的趨勢。從入戶調查的結果來看，4 縣(市)的牦牛流產率也比較高，除玉樹外，貴南、海晏和烏蘭牦牛流產率與衣原體病血清學陽性率呈正相關，說明這幾個地區牦牛的流產與衣原體病的感染有很大關系。

近些年，我國人間和畜間的布魯菌病感染率逐年上升，過去有布魯菌病流行的省區皆出現了疫情反彈，東北和西北的近10個省區尤為突出[9-10]。本次調查的牦牛布魯菌病血清學陽性率從高到低分別為海晏縣55.56%、玉樹市53.33%、烏蘭縣44.95%、貴南縣32.86%，4縣(市)陽性率均比較高，這也說明了這些地區牦牛的流產除了與衣原體病相關之外，還與布魯菌病有著密切的關系。李桂蘭等[11]在青海省天峻縣和祁連縣進行牛羊布魯菌病感染情況的調查，祁連縣牦牛陽性率為7.49%，母牛流產在5%～7%之間；天峻縣牦牛陽性率為13.13%，牛的流產率在2%，流產率較往年有所上升。黃文明等[12]進行了青海省牛布魯菌病血清學調查，陽性率為3.51%。本次調查的結果相比于以上數據，陽性率都比較高，說明這些地區牦牛布魯菌病嚴重流行。

弓形蟲病對動物繁殖的影響較大，我國牛弓形蟲病的感染率在2.41%～67.46%[13]。據蔡進忠等[14]的調查，青海省牦牛弓形蟲病陽性率平均為8.03%，各地高低不一。另據傅義娟[15]的調查，青海省牛弓形蟲病陽性率平均為12.67%。本次調查的結果平均為13.96%，與歷史數據較為相近。

青海省牦牛數量眾多，牦牛在農牧民的生產生活中占有十分重要的地位。牦牛的流產給農牧民的生產和增收造成了巨大的損失，降低牦牛的流產率是我們動物防疫部門迫切需要解決的問題。綜合3種動物疫病的調查結果，布魯菌病和衣原體病陽性率較高，相對應的，牧戶牦牛的流產率也較高，說明這兩種病是導致牦牛流產的主要原因；而弓形蟲病感染率相對不高，對牦牛流產的影響不如前兩種疫病。近年來，國家對家畜布魯菌病的防治比較重視，已經把布魯菌病的免疫納入強制免疫計劃；而無論是畜牧獸醫機構，還是牧戶，對家畜衣原體病的認識和重視程度均不高。所以，對家畜衣原體病的防治顯得尤為重要。我們開展的牦牛衣原體滅活疫苗研究與推廣項目以此為出發點，在前期充分進行流行病學調查的基礎上，采集了流產牦牛的胎盤和流產胎兒，分離純化病原并研制疫苗，為有效的防控牦牛衣原體病，降低牦牛流產率打下了基礎。

[1] 馬怡雋.青海省畜禽衣原體病的血清學調查[J].中國獸醫科學，2013，43(02)：213-215.

[2] 侯生庫，謝仲秀.牦牛地方性流產的病因學調查[J].畜牧與獸醫，2012，03：109-110.

[3] 張立成，王謝忠，張茂華，等.青海省牲畜衣原體病血清學監測[J].中國獸醫雜志，2014，50(4)：38-39.

[4] 王云平，王生祥，傅義娟，等.青海省牛羊布病疫情形勢及防治策略[J].青海畜牧獸醫雜志，2015，02：42-43.

[5] 趙啟明，游瀟倩，張乃忠，等.青海牛羊布魯菌病監測與分析[J].上海畜牧獸醫通訊，2014，02：60.

[6] 李曉卉.青海牦牛弓形體病的血清學調查[J].中國草食動物，2004，04：30-31.

[7] 陳世堂，王謝忠，沈得貴.青海省牦牛弓形體病的血清學調查[J].中國畜牧獸醫，2010，37(08)：192-193

[8] 周繼章，邱昌慶.我國家畜衣原體病流行狀況[J].中國畜牧獸醫，2007，34(7)：110-112.

[9] Xulong L，Hailong Q，Zhaoyang B，etal.Seroprevalence of Brucelia infection in yaks(Bos grunniens)on the Qinghai-Tibet plateau of China[J].Trop Anim Health Prod，2011，43(2)：305-306.

[10] ChenZ，Zhang W，Ke Y，etal.High-risk regionsof human brucellosis in china：implications for prevention and early diagnosis of travel-related infections[J].Clin Infect Dis，2013，57(2)：330-332．

[11] 李桂蘭，趙啟明.青海省祁連、天峻地區牛羊布魯菌病現狀調查[J].中國動物檢疫，2011，28(06)：57-58.

[12] 黃文明，尕松代吉，李增魁.青海省牛布魯菌病的流行病學調查[J].中國獸醫雜志，2015，51(06)：39-41.

[13] 張居作，陳漢忠，徐君飛.我國弓形蟲的感染現狀[J].動物醫學進展，2008，29(07)：101-104.

[14] 蔡進忠，李春花.青海家畜弓形蟲病血清學調查與流行情況分析[J].中國獸醫雜志，2011，47(1)：45-46.

[15] 傅義娟.青海省豬牛羊弓形蟲病的血清抗體檢測[J].中國獸醫科技，2003，33(9)：69-70.

Preliminary investigation on Abortion of Yaks in part of Qinghai Province

HU Guang-wei1， SHEN Yan-li1， ZHAO Quan-bang1， CHAO Yi-lin1，KAN Wei1， ZHOU Ji-zhang2， MA Rui-lin1， CAI Jin-shan1

(1.Qinghai Animal Disease Control Center，Xining 810001，China；2.Lanzhou Veterinary Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology，Lanzhou 730046，China)

In order to find out the reason on abortion of Yaks in part of Qinghai Province，the rates of abortion of yaks from 104 farmers of 7 townships and 4 counties were investigated.The average abortion rate was 21.39%.Chlamydiosis，brucellosis and toxoplasmosis in yaks were examined by rose bengal plate test and indirect hemagglutination assay，and the positive rates were 45.62%，68.34% and 13.96%，respectively.The results show that abortion of yaks in these regions is related to chlamydiosis and brucellosis.

Qinghai ； yak ； abortion

CAI Jin-shan

2016-03-02

青海省農業科技成果轉化與推廣計劃(2014-N K-532)

胡廣衛(1982-)，男，獸醫師，碩士，從事動物疫病防控工作，E-mail：qhhgw@sina.com

蔡金山，E-mail：cjsheyf@163.com

S823.8+5

A

0529-6005(2016)10-0003-03