食用植物油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的測定

楊衛(wèi)花，趙浩軍，徐 幸

(大理州質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督綜合檢測中心，云南大理 671000)

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食用植物油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的測定

楊衛(wèi)花，趙浩軍，徐 幸*

(大理州質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督綜合檢測中心，云南大理 671000)

[目的]建立一種可滿足植物油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的檢測方法。[方法]利用氣相色譜三重串聯(lián)四級桿質(zhì)譜技術(shù)，建立了植物油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物檢測方法并進行了樣品測試。[結(jié)果]該方法對食用植物油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的檢測，線性范圍為10～1 000 μg/L，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999，樣品中的檢出限最低達到0.2 mg/kg。17種組分3個濃度梯度(1.0 、5.0 和10.0 mg/kg)的平均回收率均在80.4%～110.9%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.4%～8.3%。[結(jié)論]該方法簡便、快速、檢出限低、結(jié)果準(zhǔn)確，可應(yīng)用于核桃油、菜籽油、玉米油等實際樣品中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的測定。

氣相色譜三重串聯(lián)四級桿質(zhì)譜；食用植物油；鄰苯二甲酸脂類；塑化劑

鄰苯二甲酸酯類化合物(phthalate acid esters，PAEs)因可增加塑料的柔韌性而被作為塑化劑使用[1]，目前是塑化劑的主體，其產(chǎn)量占塑化劑總量的80%左右[2]。塑料中脂溶性的PAEs 類物質(zhì)在接觸植物油的時候會被溶出而被人攝入體內(nèi)[3]。長期食用含有PAEs類物質(zhì)的食品可能會導(dǎo)致內(nèi)分泌失調(diào)和生殖系統(tǒng)異常，甚至可引起畸形、癌癥等[4-7]。食用植物油中的PAEs 類含量對人體健康有很大的風(fēng)險，因此必須準(zhǔn)確測定植物油中的塑化劑含量。

根據(jù)衛(wèi)生部2011 年6 月15 日發(fā)布的551 號公告《衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于通報食品及食品添加劑中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)最大殘留量的函》，公告中規(guī)定了食品中鄰苯二甲酸二(α-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)和鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)最大殘留量分別為1.5、9.0和0.3 mg/kg。目前國內(nèi)頒布了GB/T 21911—2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》[8]，而此標(biāo)準(zhǔn)僅有16 種鄰苯二甲酸酯的檢測方法，無DINP的檢測；另外，此標(biāo)準(zhǔn)中含油樣品中的檢出限為1.5 mg/kg，與551號公告內(nèi)容存在矛盾。針對上述問題，需對現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)方法進行改進。

目前，塑化劑的測定主要有氣相色譜-質(zhì)譜法[7-8]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[9]、GPC-GC-MS/MS法[10]及液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[1，11]等，這些方法中都未專門針對食用植物油中塑化劑的檢測，也未解決GB/T 21911—2008[8]中的問題。筆者利用 GC-MS-MS 的多重反應(yīng)監(jiān)測(MRM)高選擇性、高靈敏度[9，12]，建立了一種前處理更為簡單、快速，結(jié)果準(zhǔn)確，檢出限更低的方法，可滿足植物油中17種塑化劑包括DINP檢測的方法。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑及樣品。正己烷(色譜純)，默克公司；17 種PAEs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、鄰苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、鄰苯二甲酸二戊酯(DPP)、鄰苯二甲酸二己酯(DHXP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯(DCHP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二苯酯(DPhP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二異壬酯(DINP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)，以上溶液濃度均為1 000 mg/L，購自迪馬科技有限公司。34個植物油樣品，市場購買所得。

1.1.2 主要儀器。7890 氣相色譜儀、7000A 三重串聯(lián)四級桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，安捷倫公司；離子源為EI(電子轟擊)源；AB204-E萬分之一電子天平，梅特勒-托利多公司，VORTEX MAX MIX II型渦旋轉(zhuǎn)振蕩器，熱電公司；其他為實驗室常用設(shè)備。

1.2 方法

1.2.1 定量工作曲線。用正己烷將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液定容于100 mL 容量瓶，得到10 mg/L 的混合儲備液，將混合儲備液逐級稀釋成10、50、100、200、500、1 000、10 000 μg/L 的一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在優(yōu)化的色譜條件下測定色譜峰面積，用定量離子對的峰面積與含量繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

1.2.2 樣品處理。稱取0.1 g (精確至0.001 g)樣品于10 mL 比色管中后準(zhǔn)確加入10.0 mL 正己烷，渦旋2 min。

1.2.3 測定條件。

1.2.3.1 氣相色譜條件。DB-5MS 色譜柱( 30 m×0.25 mm，0.25 μm)；He流速，40.12 cm/s，1.2 mL/min；柱溫：60 ℃(1 min)，20 ℃/min升溫至 220 ℃，5 ℃/min 升溫至265 ℃，再以10 ℃/min升溫至 285 ℃(5 min)，共25 min；進樣口溫度，270 ℃；進樣體積，1 μL(不分流)。

1.2.3.2 質(zhì)譜條件。EI 源溫度為230 ℃；電離能量為70 eV；分辨率為1.2 amu；溶劑延遲時間為7 min；傳輸線溫度為285 ℃；真空度為10-5Pa。

2 結(jié)果與分析

2.1 質(zhì)譜多重反應(yīng)監(jiān)測條件優(yōu)化 在優(yōu)化的色譜分析條件下，運行一個全掃描方法，掃描離子質(zhì)量范圍為50～300 amu，NIST 譜庫檢索，得到特征一級質(zhì)譜圖，選定母離子，編輯產(chǎn)物離子的掃描條件，優(yōu)化碰撞電壓和增益，選擇豐度高的2個特征離子作為子離子，設(shè)定的多重反應(yīng)監(jiān)測(MRM)條件見表1。

用表1設(shè)定的MRM 條件采集17種PAEs 的標(biāo)準(zhǔn)品，得到提取離子色譜圖(圖1)。從圖1中可以看出，BMPP 為分叉峰，DINP 為五指峰[13]，其余15個組分的譜峰完全分離，峰形尖銳、對稱性好。

表1 17種鄰苯二甲酸酯類化合物多重反應(yīng)監(jiān)測的條件

注：1.DMP；2.DEP；3.DIBP；4.DBP；5.DMEP；6.BMPP；7.DEEP；8.DPP；9.DHXP；10.BBP；11.DBEP；12.DCHP；13.DEHP；14.DPhP；15.DNOP；16.DINP；17.DNP。Note：1.DMP；2.DEP；3.DIBP；4.DBP；5.DMEP；6.BMPP；7.DEEP；8.DPP；9.DHXP；10.BBP；11.DBEP；12.DCHP；13.DEHP；14.DPhP；15.DNOP；16.DINP；17.DNP.圖1 17種鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)色譜(1 000 μg/L)Fig.1 Multiple reaction monitoring(MRM)chromatogram of 17 PAEs

2.2 方法的線性范圍與檢出限 在優(yōu)化條件下，對10、20、50、100、200、500、1 000 μg/L濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進行了MRM的測定，并用儀器所帶軟件MassHunter 工作站將峰面積對標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度作曲線，得回歸方程及相關(guān)系數(shù)，同時以信噪比S/N=10確定17種PAEs的檢出限為0.2～1.0 mg/kg，具體見表2。

由表2可知，樣品中DBP的檢出限為0.2 mg/kg，低于551 號公告《衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于通報食品及食品添加劑中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)最大殘留量的函》中規(guī)定的DBP為 0.3 mg/kg的最大殘留量。

2.3 方法的回收率及精密度 對供試核桃油樣品進行1.0、5.0、10.0 mg/kg 3個水平添加并按“1.2.2”方法進行處理后，在優(yōu)化的色譜條件下進行測定，每個濃度做5個平行樣測試，計算回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。由表3可知，樣品加標(biāo)回收率均在80.4%～110.9%，RSD均在2.4%～8.3%，能夠滿足樣品測試要求。

2.4 植物油中17種鄰苯二甲酸酯類化合物的分布情況及分析 用所建立的方法，對34批次的植物油進行17種鄰苯

表2 17種鄰苯二甲酸酯類化合物的線性方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限

表3 17種鄰苯二甲酸酯類化合物的加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)(n=5)

二甲酸酯類化合物的檢測，其中DMP、DEP、BMPP、 DPP、DHXP、BBP、DPhP、 DNOP 8種塑化劑都未檢出或低于檢出限，另外9種塑化劑的檢出情況如表4所示。

由表4可知，34個樣品中僅1個樣品未檢出DBP，1個樣品的檢出值等于0.3 mg/kg，其余的32個樣品DBP檢出值都高于衛(wèi)生部2011 年6 月15 日發(fā)布的551 號公告中的0.3 mg/kg的最高限量，16個樣品的檢測值高于文獻[8]中1.5 mg/kg的檢出限；34個樣品中有31個檢出DEHP，檢出數(shù)值為0.3～38.8 mg/kg，其中，21個樣品的檢測值高于1.5 mg/kg；34個樣品DINP檢測中檢出29個樣品，檢出數(shù)值為1.5～191.2 mg/kg，其中，8個樣品的檢測值高于9.0 mg/kg的最高限量值。

34個樣品中有33個檢出DIBP，數(shù)值在0.8～19.3 mg/kg；DMEP有6個樣品檢出，數(shù)值在1.0～11.7 mg/kg；DEEP有7個樣品檢出，數(shù)值在0.3～6.0 mg/kg；DBEP有22個樣品檢出，數(shù)值在0.5～4.5 mg/kg；DCHP有19個樣品檢出，數(shù)值在1.1～9.9 mg/kg；DNP有9個樣品檢出，數(shù)值在0.5～1.9 mg/kg。

34個樣品中DIBP、DBP、DEHP基本都檢出，與文獻[14]食用油中DIBP、DBP和DEHP 3種塑化劑檢出率高的結(jié)論相一致。

表4 34個植物油樣品中鄰苯二甲酸脂類化合物檢測情況

注：“—”代表未檢出。

Note：— stands for not detected.

3 結(jié)論與討論

植物油作為食品的重要組成部分，是人們?nèi)粘Ｉ畹谋匦杵罚岣咧参镉唾|(zhì)量，保證我國植物油的安全是每個從事油脂行業(yè)人的責(zé)任。 該試驗采用正己烷提取植物油中的塑化劑，并利用GC-MS-MS中MRM方式的高靈敏度、高選擇性，建立了植物油中包括DINP在內(nèi)的17種PAEs的檢測方法。該方法前處理簡單、快速、結(jié)果準(zhǔn)確，可作為植物油生產(chǎn)企業(yè)和政府質(zhì)量控制部門日常質(zhì)量控制的方法。

該研究對34個植物油樣品進行了檢測，DIBP、DBEP、DCHP等檢出較為普遍，但國標(biāo)中都未規(guī)定其限量值。另外，DIBP、DIOP等在我國允許使用的PAEs 在歐盟、美國都不得使用[15]，因此對植物油中的各種PAEs進行風(fēng)險評估后制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)非常重要。另外，衛(wèi)生部于2011 年6 月15 日發(fā)布的551 號公告《衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于通報食品及食品添加劑中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)最大殘留量的函》中的限量與標(biāo)準(zhǔn)方法[8]中的檢測方法有矛盾，因此有必要對公告或者標(biāo)準(zhǔn)進行風(fēng)險評估后重新制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。同時，植物油中普遍檢出DBP、DEHP的現(xiàn)象，應(yīng)引起各植物油生產(chǎn)、包裝企業(yè)的注意，不使用塑化劑含量高的包裝容器，盡量降低產(chǎn)品中塑化劑的含量。參考文獻

[1] 馬燕紅，丁紅艷，馬麗，等.鄰苯二甲酸酯類化合物的定量結(jié)構(gòu)-色譜保留關(guān)系[J].食品科學(xué)，2012，33(24)：253-256.

[2] 曹九超，金青哲.食用油中塑化劑的污染途徑及分析方法的研究進展[J].中國油脂，2013，38(5)：1-5.

[3] 祝偉霞，楊冀州，袁萍，等.大氣壓化學(xué)電離-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定油基食品中的18種鄰苯二甲酸酯類化合物[J].現(xiàn)代食品科技，2012，28(1)：115-118.

[4] ADIBI J J，PERERA F P，JEDRYCHOWSKI W，et al.Prenatal exposures to phthalates among women in New York City and Krakow，Poland[J].Environ Health Persp，2003，111(14)：1719-1722.

[5] YANO K，HIROSAWA N，SAKAMOTO Y，et al.Phthalate levels in baby milk powders sold in several countries [J].Bull Environ Contam Tox，2005，74(2)：373-379.

[6] AGARWAL D K，LAWRENCE W H，AUTIAN J.Antifertility and mutagenic effects in mice from parenteral administration of di-2-ethylhexyl phthalate(DEHP)[J].J Toxicol Env Health，1985，16(1)：71-84.

[7] 吳惠勤，朱志鑫，黃曉蘭，等.不同類別食品中21種鄰苯二甲酸酯的氣相色譜-質(zhì)譜測定及其分布情況研究[J].分析測試學(xué)報，2011，30(10)：1079-1087.

[8] 常宇文，李偉，周相娟，等 食品中鄰苯二甲酸酯的測定：GB/T 21911—2008.[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[9] 徐幸，楊衛(wèi)花，趙浩軍，等.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定不同酒類食品中17種鄰苯二甲酸酯[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2013，4(3)：877-882.

[10] 丁春瑞，趙建勇.GPC-GC-MS/MS測定植物油中鄰苯二甲酸酯類化合物[J].中國油脂，2016，41(1)：64-67.

[11] 祝偉霞，劉亞風(fēng)，袁萍，等.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定紡織品中18種鄰苯二甲酸酯類化合物[J].理化檢驗(化學(xué)分冊)，2013(2)：156-160.

[12] 肖文，姜紅石.MS/MS的原理和GC/MS/MS在環(huán)境分析中的應(yīng)用[J].環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2004，27(5)：26-28.

[13] 王成云，劉彩明，施欽元，等.超聲萃取/氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定皮革制品中20 種鄰苯二甲酸酯類增塑劑[J].分析測試學(xué)報，2012，31(12)：1550-1555.

[14] 李鳳華，姜大峰，李蔚，等.固相萃取、同位素稀釋氣相色譜-質(zhì)譜法測定食用油中23種鄰苯二甲酸酯[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2014，24(18)：2617-2621.

[15] 劉曉毅，蔣可心，石維妮.國內(nèi)外食品接觸材料中鄰苯二甲酸酯類塑化劑遷移限量對比分析[J].食品工業(yè)科技，2011，32(10)：397-399，446.

Determination of 17 Phthalates in Edible Vegetation Oil

YANG Wei-hua, ZHAO Hao-jun, XU Xing*

(Dali Quality and Technical Supervision Comprehensive Inspection Centre, Dali, Yunnan 671000)

[Objective] The aim was to establish a method for detecting 17 phthalates esters(PAEs) in edible vegetation oil. [Method] A method for the determination of PAEs in edible vegetation oil by gas chromatography coupled with triple quadrupole mass spectrometry (GC-MS-MS) was established and samples were tested. [Result] The linear range of detection changed from 10 to 1 000 μg/L (r>0.999). The detection limits of samples of the 17 kinds of PAEs were 0.2 mg/kg. The average recoveries of three different concentrations (1.0, 5.0 and 10 .0 mg/kg) were ranged between 80.40% to 110.9% and the relative standard deviations were ranged from 2.4% to 8.3%. [Conclusion] This method is simple, quick, accurate, which can be applied to the determination of 17 PAEs in walnut oil, rapeseed oil, corn oil and other edible vegetation oil samples.

Gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry (GC-MS-MS); Edible vegetation oil; Phthalates esters(PAEs); Plasticizer

云南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局科技計劃項目(2013ynzjkj16)。

楊衛(wèi)花(1979- )，女，白族，云南麗江人，工程師，碩士，從事食品中添加劑及污染物限量檢測工作研究。*通訊作者，工程師，博士，從事食品中添加劑及污染物限量檢測研究。

2016-09-30

TS 225.1

A

0517-6611(2016)33-0086-04