豬細小病毒病的再認識與防控

左振華，姚晶，余慶，王科文

[碩騰（上海）企業管理有限公司，上海長寧200050]

豬病防制與保健

豬細小病毒病的再認識與防控

左振華，姚晶，余慶，王科文

[碩騰（上海）企業管理有限公司，上海長寧200050]

豬細小病毒（Porcine parvovirus,PPV）于1983年在我國首次被分離到，目前在全國各地都有流行，能導致母豬以產木乃伊胎、死胎、弱仔和流產、返情、不孕為主要特征的繁殖障礙，特別是對初產母豬，是引起母豬繁殖障礙的主要病原體之一。隨著研究的深入，發現一些皮炎、腸炎、呼吸道問題的病例與PPV有關。本文將簡要回顧豬細小病毒病，分析目前控制存在的問題，以及探討如何控制PPV。

1 豬細小病毒簡要回顧

豬細小病毒病最早由Mary和Mahncel于1966年發現，Cartwright等（1967）首次分離到PPV，并證明了它的致病作用。潘雪珠等（1983）在我國首次分離到PPV。

1.1 病毒主要特點

PPV屬于細小病毒科，細小病毒亞科，細小病毒屬，為反單鏈DNA病毒，包含大約5 000個堿基（Molitoret等，1983），至少有兩個開放閱讀框（Bergeronet等，1993和1996）。Hao等（2011）將中國發現的PPV基因型分為4個群，中國早期分離到的屬于Ⅰ群，后來分離到的多屬Ⅱ群，也有PPV3和PPV4被分離到。該病毒粒子直徑大約28納米，由60個結構蛋白分子（VP1和VP2）構成，其中VP2蛋白分子占到90%，為主要中和抗體目標蛋白，為無囊膜病毒。目前PPV只有1個血清型，在各種血清試驗（中和試驗與血凝抑制試驗）中，所有分離毒株表現出高水平的交叉反應。

PPV主要在豬的心臟、肺臟、脾臟和性腺中復制。在母豬臟器中，主要攻擊子宮，子宮內病毒含量最高，也破壞肺臟等呼吸器官和脾臟等免疫器官；在胎豬臟器中，病毒主要在心臟、肺臟、脾臟和性腺中復制，以性腺含量最高。對胎豬來說，破壞脾臟、性腺等，同時破壞心臟等核心器官，能造成死亡。它可以在PK-15、SPEV、ST等幾個豬細胞系中生長。

PPV的適應性很強，熱穩定性很好，可以抵抗90℃干熱環境（濕熱環境抵抗力差）；當pH在3～10時，其感染性無明顯變化，對酶、脂溶劑及有機溶劑具有很強的抵抗力，用0.5%漂白粉溶液、2%燒堿水溶液作用5分鐘才可以殺死病毒。這些理化特性使得PPV可以在自然界長期、穩定、廣泛存在。

PPV可通過母豬胎盤垂直感染胎兒，也可通過公豬精液、發病豬、帶毒的器具、病毒污染的環境和鼠類等傳播。

1.2 主要臨床表現

豬細小病毒基因組差異較小，但病毒毒力有明顯差異，根據其不同的致病性至少可分為5組，即非致病性毒株、對免疫不完全胎兒致病能導致胎兒死亡的毒株、對免疫不完全胎兒致病能引起皮炎的毒株、腸炎型毒株和呼吸道型毒株。臨床表現為亞臨床感染，母豬繁殖障礙，腸炎、皮炎、呼吸道問題等多種形式。

1.2.1 繁殖障礙型表現免疫母豬群出現繁殖損失的情況比較少，但是在未免疫母豬群或者免疫失敗母豬群中，細小病毒會大面積暴發流產。豬細小病毒接種公豬、母豬，通常本身無臨床表現，也無眼觀病變，但可見微觀病變。母豬的微觀病變主要是子宮內膜、子宮肌層周圍的血管廣泛地存在單核細胞的血管套現象，在腦、脊髓、眼脈絡血管周圍也可見血管套現象；公豬在睪丸接種病毒后，引起生精上皮細胞的嚴重脫化，并伴有多核細胞的形成與脫落。

豬細小病毒的發病機理主要體現在病毒通過胎盤屏障感染胎兒的能力。但是，PPV是如何通過胎盤屏障的仍然不清楚。PPV通過胎盤屏障有3種可能：通過體液（血液或淋巴液）、通過逐漸感染胎盤細胞逐層突破、通過細胞（如巨噬細胞/淋巴細胞）運輸（Mengeling等，2000）。因為胎盤細胞對細小病毒并不易感，而且也沒有在胎盤細胞中看到細小病毒，所以第2種可能性很小。最可能的突破胎盤屏障的方法是通過免疫細胞的載體作用。有研究表明，在豬的淋巴組織中和胎兒的淋巴細胞中發現了細小病毒。一旦細小病毒進入胎兒體內，細小病毒利用胎兒的快速有絲分裂進行復制，病毒在胎兒的很多器官和組織中都能檢測出，細小病毒對胎兒器官與組織沒有傾向性。

母豬的繁殖障礙臨床表現與感染時所處的妊娠階段有關。母豬感染PPV以后，往往需要10～14天才能由子宮而感染胚胎或胎兒。如圖1所示，如果胚胎在受精后6天內感染PPV，PPV沒有能力突破透明帶的保護，胚胎將不受影響；如果胚胎在開始骨化之前（妊娠6～35天）感染PPV，胚胎將死亡，出現充血、水腫、出血、體腔血性漿液的積存以及出血性變色和脫水后逐漸變暗（木乃伊化）被母體吸收（Mengeling等，1975），母豬出現妊娠停止而返情；如果胎兒在母豬妊娠35天以后和能夠對PPV產生抵抗力的70天之前感染PPV，胎兒將死亡，這時胎兒已經骨化，母體不能完全吸收，會出現胎兒的木乃伊化。一般情況下，PPV感染胎兒為逐個、緩慢進行，如妊娠70天之前胎兒已全部感染，會出現妊娠70天以后母豬腹圍減小而出現空懷和不孕，如妊娠70天之后仍有胎兒未被感染，將出現不同大小的木乃伊（圖2）、活仔共存現象；如果胎兒在母豬妊娠70天以后接觸PPV，胎兒將存活。

圖1 胚胎、胎兒發育不同階段感染PPV的結果

圖2 不同發育時間感染PPV的胎兒死亡、木乃伊化

胎兒的病理變化往往是廣泛性的，主要表現為發育器官細胞的壞死，在肺臟、腎、骨骼肌，尤其是肝臟和心臟常出現壞死與礦化，在肌肉組織和皮下可觀察到出血。

1.2.2 腸炎型表現1983年夏季，S Dea在加拿大魁北克省豬場發現大批仔豬出現腹瀉癥狀，仔豬大小集中在2～3周齡。病豬排泄量大、糞便形式為水樣或黃痢，持續時間一般為1周，無嘔吐現象，并且保持很好的食欲。研究人員通過多方認證發現，病料中有大量直徑為18～26納米的細小病毒樣粒子存在，除輪狀病毒外，排除了其它病毒和細菌的干擾，證明PPV與仔豬腹瀉有一定關聯，但PPV是否是腹瀉產生的原發因素并未闡明。

Chea（2011）發現，在韓國豬細小病毒延長和誘導了地方性豬流行性腹瀉（PED），認為感染PPV的仔豬會發生免疫抑制而對PEDV高度敏感。同時，他提到在韓國PED地方流行場，PEDV和PPV的共感染率高達46.6%。

2010年以后，我國豬群發生大范圍的PED，給養豬業帶來巨大損失，尚不清楚PPV是否像在韓國一樣，對地方性的PED起到推波助瀾的作用，但細小病毒科的另一個成員—博卡病毒（Boca virus）在腹瀉豬糞便中常被分離到。翟少倫等（2010）報道該病毒在我國豬群存在高陽性率。

1.2.3 皮炎型表現Kresse等（1975）發現了PPV的一個新毒株—Kresse株，并隨后進行了一些研究，確定其為皮炎型強毒株。1985年，Kresse等再一次對其致病性進行了系統研究，試驗從患有嚴重皮膚炎癥的豬體分離并培養PPV，用胎豬腎細胞系（FPK）和豬睪丸細胞系（ST）進行傳代。用細胞毒和腳趾病變組織勻漿作為感染物，分別注射皮膚敏感部位（拱嘴、唇、舌、蹄上皮膚和腳趾間皮膚）或口服和同時腹腔注射，對12只同窩仔豬進行攻毒處理。試驗發現，PPV作為唯一病原感染時，被感染豬拱嘴、舌和蹄部的皮膚出現了病變，臨床表現為厭食、腹瀉和結膜炎，證明PPV可以導致皮膚炎癥。之后的多位學者在嚴重皮膚炎癥的豬體病變部位分離到PPV（Kresse等，1986；Whitaker等，1990），并同時分離到金黃色葡萄球菌，分別得出這些病例中的嚴重皮膚炎癥是PPV與細菌共同作用以及PPV侵入引起細菌繼發感染的結論。

后來的學者（Lager等，1993）也證實PPV能夠在受傷的皮膚中復制，但是并未發現明顯的皮膚炎癥和前面所述的滲出性皮炎或者口蹄處嚴重潰爛等現象。Kim等（2004）還從滲出性皮炎的回顧性研究中發現PCV2（圓環病毒2型）和PPV的共感染現象。

1.2.4 呼吸道型表現Kennedy等（2000）研究證實，仔豬單純感染PCV2能導致PMWS（斷奶仔豬多系統衰竭綜合征），臨床比例低而且溫和，但是，雙重感染PCV2和PPV的仔豬發生PMWS的機會高得多，臨床也嚴重得多，肺部、淋巴、肝臟等器官病理病變更嚴重，PCV2在這些器官中的抗體滴度明顯更高，說明PPV促進了PCV2的繁殖和病變表現。

2010年，Cheung等在和PCV2共感染的肺部發現PPV4，該毒株在中國豬群也被發現（Huang等，2010）。另外，Xiao等（2013）報道在美國的豬肺中發現PPV5毒株（但無臨床表現）。至目前為止，對這些從豬呼吸道分離到的PPV的致病作用還缺乏進一步的研究。

2 目前控制存在的問題

2.1 PPV在陽性豬群廣泛、持續存在

一方面，PPV經急性感染豬只的糞便與分泌物排毒后，對環境具有很高的耐受性，病毒在環境、污染欄舍與設備中可存活數月，并仍然具有感染性。

另一方面，母豬群通過免疫或者自然感染可獲得很好的免疫力，但是，研究表明免疫母豬攻毒后的抗體滴度比未免疫豬上升更快，并且免疫母豬攻毒后仍然可以排毒，這說明PPV能夠在免疫豬只體內復制（Józwik等，2009），母豬的免疫并不能完全阻止PPV在豬群的循環。

第三，PPV還可通過鼠類等多種途徑傳播病毒（Cartwright等，1967；Ruckerbauer等，1978）。

實際中，我們通過PPV血清調查發現（未發表），許多豬群的后備母豬盡管配種前已經免疫兩次PPV疫苗，但是低胎齡母豬（3胎以下）仍有抗體上升的過程；另外，許多豬群在生長肥育階段12～20周齡之間，有PPV抗體轉陽過程。盡管我們尚不能確定它們對養豬生產的影響，但是很顯然，PPV在這些豬群持續循環。

2.2 免疫效果容易受母源抗體干擾

母豬的母源抗體差異較大，可持續3～9個月，在母源保護存在的情況下免疫，往往會導致免疫失敗。許多低胎齡母豬群陽性率較低，可能與免疫時間過早、受到母源抗體干擾有關。

2.3 共感染現象較為普遍

徐君等（2012）從四川省21個規?；i場采集樣品273份，利用PCR方法檢測并分析了豬細小病毒和豬圓環病毒2型的單獨感染及混合感染情況。檢出PPV陽性豬場8個（占38.1%），陽性樣本47份（占17.22%），并發現種豬的感染率較高，仔豬感染率相對較低；檢出PCV2陽性豬場18個（占85.7%），陽性樣本143份（占52.38%），并發現PCV2感染率隨豬年齡的增長而升高，檢出PPV和PCV2混合感染樣品29份（占10.62%）；同時檢出PPV和PCV2陽性的豬場6個（占28.7%），混合感染主要集中在母豬和保育豬階段；僅有3個豬場未檢出PPV和PCV2病原，占14.3%。該結果說明PPV與PCV2感染及其混合感染在該地區流行廣泛。

鄔捷等（1986）國內首次報道了我國豬細小病毒與乙型腦炎病毒混合感染。隨后相繼（藺文成等，2010）報道豬細小病毒經常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、偽狂犬病病毒、豬瘟病毒、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌和豬肺炎支原體等病原混合感染，并報道混合感染加重了疾病的嚴重程度。黃夏等（2007）也發現廣西地區豬細小病毒與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟病毒、豬圓環病毒2型和偽狂犬病病毒等4種病毒均有混合感染現象，混合感染樣品占豬細小病毒陽性樣品的48.00%。

筆者也臨床發現多例臨床出現較高死胎、流產的豬群在排除PRRSV、PRV、JEV（乙型腦炎病毒）等常見導致母豬繁殖障礙的病原后，確定為PPV和PCV2混合感染。

2.4 缺乏迅速確診和血清學鑒別診斷

近年來，豬細小病毒的分子生物學診斷方法的研究進展迅速，為快速、準確診斷豬細小病毒病起到了重要的作用。但臨床上諸多類似癥狀的疾病會干擾診斷，特別是與偽狂犬病、乙型腦炎和豬布魯氏菌病的區別。如在臨床上確實出現了木乃伊胎，應將幾個這種胎兒（長度小于16厘米）或其肺臟送交實驗室進行診斷。建議不要把大的（即妊娠超過70天）木乃伊胎、死胎和新生仔豬送到實驗室檢查，因為即便這些胎兒感染了細小病毒，它們的組織內也含有抗體，將干擾實驗室的檢測。

目前的血清學檢測不能鑒別診斷野毒和疫苗刺激產生的抗體，給評估母豬群PPV的穩定狀態帶來一定的困難。

2.5 缺乏重視

近年來藍耳病、偽狂犬病和圓環病毒病等繁殖障礙病單獨或混合感染后對豬場造成了重大損失，轉移了疾病防控核心，使防控焦點總是凝聚在藍耳病、偽狂犬病和豬圓環病毒病這3大疾病之中，使之防控策略缺乏對豬細小病毒病的重視。

3 豬細小病毒的防控措施

3.1 制定科學的免疫程序

由于豬細小病毒的血清型單一，并具有較高的免疫原性，從而接種疫苗就能有效的防控豬細小病毒病。在早期的研究報告中，豬細小病毒疫苗的免疫為2次，一般間隔2～3周，隨著疫苗生產工藝的改進，一次免疫也能達到良好的效果，免疫后的后備母豬在妊娠40天時用強毒攻擊，可以獲得完全保護（丁壯等，2006）。

Edwards等認為豬細小病毒疫苗只能用于沒有母源抗體的豬，因為在田間條件下母源抗體可能在不同程度上干擾疫苗的效果。Paul等（1986）發現豬群在接種豬細小病毒滅活疫苗時，母源抗體水平低的豬與血清陰性豬的免疫應答完全一樣，而中等水平的母源抗體對疫苗免疫有輕微干擾作用，高效價抗體對疫苗有明顯的干擾作用。

呂建強等（2003）進行豬細小病毒母源抗體對滅活疫苗免疫效果影響的研究，結果證實不論母源抗體水平高低均不會明顯抑制疫苗的主動免疫反應，但是具有低效價母源抗體豬的主動免疫抗體反應規律，與具有高效價母源抗體豬的主動免疫抗體反應規律不同。在母源抗體滴度大于1∶149.5時，滅活疫苗接種后抗體水平先降低然后上升，增幅只有1～3倍；而母源抗體滴度小于1∶25.6時，主動免疫抗體持續上升，母源抗體陰性的豬抗體增幅最大。根據豬細小病毒的流行病學特點，仔豬哺乳后2～3天即可在血液中檢測到母源抗體，并于8～14天達到高峰，母源抗體可持續20～24周，因此多建議豬細小病毒疫苗的免疫接種時間應選擇在20周左右。

目前用于防治豬細小病毒的疫苗主要為滅活疫苗、弱毒活疫苗。試驗表明，豬細小病毒可被充分致弱，即使在懷孕期間不慎接種，也不可能引起繁殖障礙。盡管已有弱毒活疫苗在臨床上使用，但由于豬細小病毒強毒的大量存在，我們不得不考慮病毒重組和弱毒返強。因此，我們建議最好使用滅活苗。

免疫程序。原則上，應在母源抗體消失后免疫后備母豬。對于單點生產豬場，我們可以根據PPV在豬群的流行狀況把豬場分為兩類，第一類是PPV基本穩定豬場，該類場生長豬群不存在或很少存在PPV循環，后備母豬免疫以前PPV抗體陰性；第二類是PPV不穩定場，該類場后備母豬或肥育豬多在10周齡以后某個階段PPV抗體轉陽。對于第一類豬場，后備母豬可在5月齡以后，配種前20天完成2次免疫，3胎之內母豬可在產后15天免疫1次；對于第二類豬場，為減少PPV的循環，后備種豬可以選擇在20周齡進行免疫，之后3～4周再免疫1次,每胎母豬需在產后15天進行免疫1次，如有可能，可考慮一段時間內在合適的時間免疫生長肥育豬（具體免疫時間可視生長豬群的PPV抗體轉陽時間而定）以減少PPV的循環。種公豬每年春秋兩季分別進行免疫（仇錚等，2013）。對于兩點或多點生產豬場，多可采用第一類豬場的免疫方式。

3.2 健全生物安全措施

如前所述，PPV對環境耐受性很強，在環境中幾個月后仍具感染性。

對于PPV沒有循環或陰性豬群，主要是防止PPV通過各種途徑的傳入。需做好的事項包括：1）外來人員流動的控制；2）抓好運輸工具、物品流動的控制；3）強化衛生消毒；4）做好鳥類、鼠和昆蟲等的控制；5）不從PPV陽性場引進帶毒精液。

對于PPV存在循環的陽性豬群，要盡量減少場內污染物、感染豬的傳播。需做好的事項包括：1）內部豬只流動控制，特別是肥育豬群流動的控制；2）加強內部人員的管理，特別是接觸PPV循環的人員不能隨意進入易感豬群；3）加強器具的管理，特別是在母豬群和生長肥育豬、后備種豬舍的器具被PPV污染的可能性較大，要加強管理；4）加強全進全出，尤其是針對生長豬舍；5）嚴格清洗、消毒程序，尤其對肥育豬上市以后豬舍嚴格的清洗、消毒程序，包括上市豬可能污染的過道，從而減少PPV的污染；6）做好滅鼠及鳥類、昆蟲等的控制。

3.3 加強藍耳病、偽狂犬病和圓環病毒病的防控，減少與豬細小病毒的混合感染

對于藍耳病、偽狂犬病和圓環病毒病的控制可以參照《碩騰技術通報》第60、61和66期?？刂坪昧似渌《静「腥?，特別是藍耳病、偽狂犬病和圓環病毒病，單獨控制豬細小病毒就相對容易得多。

3.4 淘汰正在使用的陽性種公豬，加強引入后備豬的監控、隔離和馴化工作

按季度重復監控公豬精液是否帶毒，對于帶毒公豬予以淘汰，防止病毒傳播而引起基礎群生產波動。按計劃引進所需要的后備種公豬或補充所需要的后備母豬時，首先，必須了解后備種豬的豬群是否存在豬細小病毒循環；其次，隔離飼養必須60天，并遠離主生產區500米以上。如果后備母豬的豬群存在PPV循環，可考慮配合合適的馴化措施，例如，在隔離飼養2周后，接觸老母豬或者種公豬的糞便3次/周，至少喂3周左右；或在隔離飼養3周后，和老公豬或母豬鼻對鼻接觸，至少持續3周左右。之后，按免疫程序接種好疫苗。為安全起見，對于不存在PPV循環的豬群，強烈建議只使用疫苗免疫，而不使用糞便接觸等其它馴化措施來控制PPV。

4 小結

綜上所述，PPV是引起母豬繁殖障礙的主要病原體之一，可以導致敏感母豬妊娠早期胚胎死亡而返情以及產死胎、木乃伊胎和流產、不育等，還可能在腹瀉、皮炎以及呼吸道疾病中扮演一定角色，以及與豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬圓環病毒2型等常見病毒混合感染現象較為普遍存在，可能給養豬業造成更大損失。目前多數豬群同時存在多個疾病的情況下，應首先考慮有效控制PPV。免疫疫苗是控制豬細小病毒病的有效方式，在充分認識豬群PPV循環狀況的情況下，選擇穩定、有效的PPV疫苗和合理的免疫，配合生物安全和馴化等措施能有效地控制PPV。

（編輯：柳青）

S858.285.3

A

1002-1957(2016)03-0089-04

2016-04-02

左振華（1982），男，湖南永州人，碩士,主要從事養豬技術服務工作.E-mail:ZhenHua.Zuo@zoetis.com